Η παρουσίαση φορτώνεται. Παρακαλείστε να περιμένετε

Η παρουσίαση φορτώνεται. Παρακαλείστε να περιμένετε

Ειρήνη Παρασκάκη, Βιοπαθολόγος, Διευθύντρια Μικροβιολογικού Τμήματος, Παράρτημα Νοσοκομείου Παίδων > Το αντιβιόγραμμα στην καθημερινή Εργαστηριακή Πρακτική.

Παρόμοιες παρουσιάσεις


Παρουσίαση με θέμα: "Ειρήνη Παρασκάκη, Βιοπαθολόγος, Διευθύντρια Μικροβιολογικού Τμήματος, Παράρτημα Νοσοκομείου Παίδων > Το αντιβιόγραμμα στην καθημερινή Εργαστηριακή Πρακτική."— Μεταγράφημα παρουσίασης:

1 Ειρήνη Παρασκάκη, Βιοπαθολόγος, Διευθύντρια Μικροβιολογικού Τμήματος, Παράρτημα Νοσοκομείου Παίδων > Το αντιβιόγραμμα στην καθημερινή Εργαστηριακή Πρακτική 7η Ημερίδα Κλινικής Μικροβιολογίας 20 Ιανουαρίου 2007

2 Κύριοι φανότυποι μικροβιακής αντοχής του πνευμονιοκόκκου και άλλων απαιτητικών μικροβίων και η ερμηνεία τους Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae Neisseria gonorrhoae Neisseria meningitidis

3 Αντοχή του Streptococcus pneumoniae στα β-λακταμικά αντιβιοτικά (Ι) Τροποποίηση των πενικιλλοδεσμευτικών πρωτεϊνών (PBPs) που κωδικοποιούνται από μωσαϊκά γονίδια Το ξένο γενετικό υλικό ενσωματώνεται στο DNA του πνευμονιοκόκκου με μεταμόρφωση (transformation) Παραγωγή β-λακταμάσης δεν έχει ανιχνευτεί

4 Αντοχή του Streptococcus pneumoniae στα β-λακταμικά αντιβιοτικά (ΙΙ) Έχουν περιγραφεί 5 υψηλού ΜΒ πρωτεΐνες (PBP 1a, 1b, 2a, 2b, 2x) & μία χαμηλού ΜΒ (PBP3) Κύριος στόχος για την πενικιλλίνη είναι η PBP 2b Πρωτεΐνη στόχος για την κεφοταξίμη είναι η PBP 2x

5 Αντοχή του Streptococcus pneumoniae στα β-λακταμικά αντιβιοτικά (ΙΙΙ) Η πενικιλλίνη έχει πολύ πιο έντονη βακτηριολυτική δράση από τις κεφαλοσπορίνες Η ‘’in vitro’’ευαισθησία ή αντοχή στην πενικιλλίνη δεν συνεπάγεται απαραίτητα και ανάλογη ευαισθησία ή αντοχή στις κεφαλοσπορίνες τρίτης γενιάς

6 Αντοχή του Streptococcus pneumoniae στα β-λακταμικά αντιβιοτικά (ΙΙΙ) Για την έκφραση αντοχής χαμηλού επιπέδου αρκούν μεταλλαγές σε μία μόνο PBP Για την έκφραση αντοχής υψηλού επιπέδου χρειάζονται μεταλλαγές & σε άλλες PBPs H αντοχή συμβαίνει σταδιακά

7

8

9 Εξάπλωση της αντοχής στα β- λακταμικά αντιβιοτικά Οριζόντια μεταφορά: μωσαϊκών pbp γονιδίων που κωδικοποιούν αντοχή στα εν λόγω αντιβιοτικά από ένα στέλεχος σε άλλο Κάθετη μεταφορά: διχοτόμηση και δημιουργία ανθεκτικού κλώνου Κλωνική διασπορά: μετάδοση από άνθρωπο σε άνθρωπο

10

11

12 Αντοχή του Streptococcus pneumoniae στις μακρολίδες Ενεργητική έξοδος του αντιβιοτικού από το κύτταρο Τροποποίηση του στόχου δράσης (23S τμήμα της 50S υπομονάδας του rRNA)

13 Ενεργητική έξοδος του αντιβιοτικού από το κύτταρο Μ-φαινότυπος Επιτελείται με τη δράση μιας μεμβρανικής πρωτεΐνης → γονίδιο mefA Χαμηλού επιπέδου αντοχή μόνο στις 14-, και 15-μελείς μακρολίδες

14

15 Τροποποίηση του στόχου δράσης MLS B -αντοχή Μεθυλίωση μιας αδενίνης στη θέση 2058 του 23S τμήματος της 50S υπομονάδας (erm γονίδια) Διασταυρούμενη αντοχή με τις μακρολίδες, λινκοσαμίδες και στρεπτογραμίνη Β

16 Φαινότυποι αντοχής λόγω τροποποίησης του στόχου (Ι) MLS Β- αντοχή Ι) Ιδιοσυστασιακός (constitutive resistance phenotype, cMLSB) Υψηλή αντοχή σε όλες τις μακρολίδες (14-, μελείς) Υψηλή αντοχή στη στρεπτογραμίνη Β Υψηλή αντοχή στην κλινταμυκίνη

17 Φαινότυποι αντοχής λόγω τροποποίησης του στόχου (ΙΙ) MLS B αντοχή ΙΙ) Επαγώγιμος (inducible resistance phenotype, iMLSB) Χαμηλή αντοχή σε όλες τις μακρολίδες Υψηλή αντοχή στη στρεπτογραμίνη Β Υψηλή αντοχή στις λινκοσαμίδες

18 Νέοι φαινότυποι (ΜS B, ML) Οφείλονται σε μεταλλαγές στο rRNA του 23S – θέση 2059-, ή στις πρωτεΐνες L2 ή L4 ΜS B → αντοχή στις μακρολίδες και τη στρεπτογραμίνη Β ML → αντοχή στις μακρολίδες και την κλινταμυκίνη Το επίπεδο της αντοχής στις μακρολίδες είναι ανάλογο το αριθμού και του είδους των μεταλλαγών

19

20 iMLSB- φαινότυπος cMLSB- φαινότυπος M-φαινότυπος A: δίσκος κλινταμυκίνης, Β: δίσκος ερυθρομυκίνης

21 Ανίχνευση μηχανισμών αντοχής στις μακρολίδες σε 175 στελέχη πνευμονιοκόκκου Φαινότυπος αντοχής με τη δοκιμασία ανταγωνισμού Ανίχνευση γόνων με μοριακές τεχνικές Αρ. στελεχών ΦαινότυποςΑρ. στελεχών Γόνος 138Μ (mefA)138mefA 2ΙR (ermB)1111 ermB ermTR+mefA 35CR (ermB) ermB ermB+mefA Κανένα

22 Έλεγχος ευαισθησίας του πνευμονιοκόκκου Μέθοδος διάχυσης των δίσκων Μέθοδος των μικροαραιώσεων των αντιβιοτικών σε ζωμό (Προσδιορισμός της MIC) Το Etest → καλή εναλλακτική τεχνική

23 Μειονέκτημα της μεθόδου διάχυσης των δίσκων Δεν μπορεί να ελεγχθεί αξιόπιστα η ευαισθησία του πνευμονιοκόκκου στα β-λακταμικά αντιβιοτικά

24 Αλγόριθμος ελέγχου ευαισθησίας στελεχών πνευμονιοκόκκου στα β-λακταμικά αντιβιοτικά από ασθενείς με άλλη λοίμωξη, εκτός μηνιγγίτιδας Μέθοδος των δισκίων Διάμετρος > 20 mm→ ευαίσθητο σε όλα τα β-λακταμικά αντιβιοτικά Διάμετρος < 20 mm MIC Πενικιλλίνη, κεφοταξίμη ή κεφτριαξόνη Οξακιλλίνη 1μg

25 Breakpoints στελεχών πνευμονιοκόκκου σε κεφοταξίμη/κεφτριαξόνη/κεφεπίμη ανάλογα με τη λοίμωξη (NCCLS, 2002) ΚατηγορίαΣτελέχη από ΕΝΥ (μg/ml) Στελέχη από άλλα υλικά (μg/ml) Ευαίσθητο<1<1<0,5 Μέτρια ευαίσθητο 21 Ανθεκτικό>4>4>2>2

26 Αντιβιοτικά για τον έλεγχο ευαισθησίας του πνευμονιοκόκκου Ομάδα ΑΠενικιλίνη (δίσκος οξακιλλίνης), ερυθρομυκίνη, τριμεθοπρίμη/σουλφαμεθοξαζόλη Ομάδα Β*Αμοξυκιλίνη *Κεφουροξίμη *Κεφοταξίμη ή κεφτριαξόνη *Μεροπενέμη Κλινταμυκίνη, χλωραμφαινικόλη,τετρακυκλίνη Λεβοφλοξακίνη Ριφαμπικίνη Βανκομυκίνη *Αντιβιοτικά που ελέγχονται με MIC Πίνακας CLSI τροποιηθείς, 2006

27 Αλγόριθμος ελέγχου ευαισθησίας στελεχών πνευμονιοκόκκου από ασθενείς με μηνιγγίτιδα MIC πενικιλλίνη Ευρέως φάσματος κεφαλοσπορίνη Δισκία, ή MIC Βανκομυκίνη

28 Δεν θα αναφέρονται σε ασθενείς με μηνιγγίτιδα Από το στόμα χορηγούμενους αντιμικροβιακούς παράγοντες Κεφαλοσπορίνες α΄& β΄γενεάς Μακρολίδες Κλινταμυκίνη Κινολόνες Τετρακυκλίνη

29 Haemophilus influenzae

30 Αντοχή του H. influenzae στην αμπικιλλίνη (Ι) Στο διεθνή χώρο Αμπικιλλίνη: συνήθως έως 35%, σπάνια έως 60% Στον ελληνικό χώρο Αμπικιλλίνη: έως 15%

31 Αντοχή του H.influenzae στην αμπικιλλίνη (ΙΙ) Παραγωγή β-λακταμάσης (ΤΕΜ-1 >95%) Τροποποίηση των PBPs (β-Lactamase Negative Ampicillin Resistant στελέχη, BLNAR (<2%) Στον ελληνικό χώρο BLNAR στελέχη: <1,0%

32 Στελέχη H.influenzae β- λακταμάση θετικά Δοκιμασία νιτροσεφίνης θετική Ανθεκτικά σε αμπικιλλίνη & αμοξικιλλίνη Ευαίσθητα σε αμοξυκιλλίνη-κλαβουλανικό οξύ Για τις κεφαλοσπορίνες & τις άλλες β-λακτάμες ισχύει η in vitro ευαισθησία ή αντοχή

33 Στελέχη H.influenzae αμπικιλλίνη ανθεκτικά, β- λακταμάση αρνητικά (BLNAR) Δοκιμασία νιτροσεφίνης αρνητική Ανθεκτικά στην αμπικιλλίνη & αμοξικιλλίνη Ανθεκτικά στους συνδυασμούς β- λακταμικών με αναστολείς β-λακταμασών Ανθεκτικά στις κεφαλοσπορίνες α & β γενεάς MIC της αμπικιλλίνης χαμηλή (4 mg/ml)

34 Ομάδα Α Αμπικιλλίνη, τριμεθοπρίμη/σουλφαμεθοξαζόλη κλαριθρομυκίνη ή αζιθρομυκίνη, Ομάδα Β Αμοξικιλλίνη-κλαβουλανικό οξύ κεφακλόρη, κεφουροξίμη Κεφοταξίμη ή κεφτριαξόνη Χλωραμφαινικόλη Αζτρεονάμη Λεβοφλοξακίνη Ριφαμπικίνη Τετρακυκλίνη H. influenzae Πίνακας τροποιηθείς, CLSI, 2006

35 Neisseria gonorrhoeae

36 Αντιβιοτικά Πενικιλλίνη Κεφαλοσπορίνες γ γενεάς Τετρακυκλίνη Σπεκτινομυκίνη Κινολόνες

37

38 Αντοχή της Neisseria gonorrhoeae στην πενικιλλίνη Α) Πλασμιδιακή Παραγωγή β-λακταμασών τύπου ΤΕΜ- 1(penicillinase producing N. gonorrhoaea, PPNG) Δοκιμασία νιτροσεφίνης θετική Υψηλού επιπέδου αντοχή (>8μg/ml) Ανθεκτικά στην πενικιλίνη, αμπικιλίνη, αμοξυκιλλίνη

39 B) Χρωμοσωμιακή αντοχή στην πενικιλλίνη (Chromosomally mediated resistant N. gonorrhoaea, CMRNG) Δοκιμασία νιτροσεφίνης αρνητική Χαμηλού επιπέδου αντοχή (<4 μg/ml) Οφείλεται σε: Μειωμένη διαπερατότητα κυτταρικού τοιχώματος (Mtr,env γονίδια) Τροποποίηση της PBP-2 (penΑ γονίδιο):

40 Αντοχή της Neisseria gonorrhoeae στην τετρακυκλίνη Α) Πλασμιδιακή Υψηλού επιπέδου αντοχή Πλασμίδιο tetM Β) Χρωμοσωμιακή Χαμηλού επιπέδου

41 Κινολόνες Οφείλεται σε: Μεταλλαγές στα γονίδιο gyr Α ή parC Μειωμένη διαπερατότητα Έλεγχος της αντοχής: με ναλιδιξικό οξύ Ταυτόχρονες μεταλλαγές στα γονίδια gyr Α και parC→ πιο υψηλή αντοχή Χορήγηση κινολονών σε υποθεραπευτικές δόσεις → πολλαπλές μεταλλαγές

42 Έλεγχος ευαισθησίας το μικροβίου Μέθοδος διάχυσης των δίσκων Μέθοδος αραιώσεων των αντιβιοτικών σε άγαρ Etest αποτελεί καλή εναλλακτική τεχνική

43 Σχόλια Δεν ενδείκνυται η μέθοδος των μικροαραιώσεων σε ζωμό Στελέχη που παράγουν β-λακταμάση είναι ανθεκτικά στην πενικιλλίνη, αμπικιλλίνη, αμοξυκιλλίνη Όλα τα στελέχη που ανήκουν σε μη ευαίσθητες κατηγορίες αποστέλλονται στο ΕΚΑΓ

44 Αντιβιοτικά για τον έλεγχο ευαισθησίας του γονοκόκκου πενικιλλίνη Κεφοταξίμη ή κεφτριαξόνη Σπεκτινιμυκίνη Τετρακυκλίνη Σιπροφλοξακίνη ή οφλοξακίνη NEISSERIA GONORHOEAE Πίνακας CLSI, 2006, τροποποιηθείς

45 NEISSERIA MENINGITIDIS

46 Αντοχή της Neisseria meningitidis στην πενικιλλίνη Φάρμακο εκλογής: πενικιλλίνη ή ευρέως φάσματος κεφαλοσπορίνη Σπάνια απομονώνονται στελέχη με μειωμένη ευαισθησία στην πενικιλλίνη Στην Ελλάδα απομονώνονται σε συχνότητα 15% Η μειωμένη ευαισθησία οφείλεται σε τροποποίηση της PBP2 (penA γονίδιο)

47 Μέθοδοι ελέγχου ευαισθησίας του μικροβίου Μέθοδος διάχυσης των αντιβιοτικών σε άγαρ Μέθοδος αραιώσεων των αντιβιοτικών σε άγαρ ή σε ζωμό (Προσδιορισμός της MIC) Εtest

48 Προτεινόμενα αντιβιοτικά CLSI, 2006 Θεραπευτική χρήσηΠροφύλαξη ΠενικιλλίνηΣιπροφλοξακίνη Κεφοταξίμη ΚεφτριαξόνηΤετρακυκλίνη ΜεροπενέμηΣουλφαμεθοξαζόλη/ τριμεθοπρίμη ΧλωραμφαινικόληΡιφαμπικίνη

49 Σχόλια Η πενικιλλίνη ελέγχεται με MIC Η δοκιμασία νιτροσεφίνης είναι απαραίτητη Χρησιμοποιείται το ναλιδιξικό οξύ για την ανίχνευση της αντοχής στις κινολόνες Πρέπει να τηρούνται οι προφυλάξεις βιοασφάλειας επιπέδου ΙΙ

50 Σχόλια (ΙΙ) Τα μη ευαίσθητα στελέχη αποστέλλονται σε Κέντρο Αναφοράς α) CLSI: ενδιάμεση ευαισθησία → μg/ml, ή 0.25 μg/ml β) European Monitoring Group of Meningococci (EMGM): ενδιάμεση ευαισθησία → > μg/ml

51 Έκθεση αποτελέσματος σε γυναίκα 65 χρόνων με μηνιγγίτιδα από πνευμονιόκοκκο ΑντιβιοτικόMIC (μg/ml)Κατηγορία Πενικιλλίνη2Α Κεφοταξίμη μηνιγγίτιδα1ΜΕ άλλη λοίμωξη1Ε Κεφτριαξόνη μηνιγγίτιδα1ΜΕ άλλη λοίμωξη1Ε Ερυθρομυκίνη1Α Λεβοφλοξακίνη< 0.5Ε Κοτριμοξαζόλη> 4/76Α Βανκομυκίνη< 0.5Ε

52 Από την καλλιέργεια του ΕΝΥ απομονώθηκε πνευμονιόκοκκος ΑντιβιοτικόMIC (μg/ml)Κατηγορία Πενικιλλίνη2Α Κεφοταξίμη1ΜΕ Βανκομυκίνη< 0.5Ε


Κατέβασμα ppt "Ειρήνη Παρασκάκη, Βιοπαθολόγος, Διευθύντρια Μικροβιολογικού Τμήματος, Παράρτημα Νοσοκομείου Παίδων > Το αντιβιόγραμμα στην καθημερινή Εργαστηριακή Πρακτική."

Παρόμοιες παρουσιάσεις


Διαφημίσεις Google