Αυξημένη γονιδιακή έκφραση α-2β αδρενεργικών υποδοχέων σε αιμοπετάλια ασθενών με μη επαρκώς ελεγχόμενη ιδιοπαθή υπέρταση Γιώργος Απιδιανάκης, Μαρία Ε. Μαρκέτου, Ιωάννα Κονταράκη, Κωνσταντίνος Ρούφας, Αλέξανδρος Πατριανάκος, Γεώργιος Κοχιαδάκης, Παναγιώτης Τσιβερδής, Δημήτρης Λεμπιδάκης, Ευάγγελος Ζάχαρης, Κώστας Φραγκιαδάκης, Ιωάννης Λογκάκης, Γεώργιος Μπαντουβάκης, Πάνος Βάρδας, Φραγκίσκος Παρθενάκης Γιώργος Απιδιανάκης Καρδιολογική Κλινική, Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο Ηρακλείου

Ιδιοπαθής Υπέρταση Θρομβωτικά Επεισόδια Έκφραση TF, vWF, P Selectin Αποκάλυψη ινών κολλαγόνου Αθηρωματικές βλάβες Μειωμένη παραγωγή ΝΟ Gawaz M, Langer H, May AE. Platelets in inflammation and atherogenesis. J Clin Invest 2005; 115:3378–3384 Savage B, Saldivar E, Ruggeri ZM. Initiation of platelet adhesion by arrest onto fibrinogen or translocation on von Willebrand factor. Cell 1996; 84:289–297

Ιδιοπαθής Υπέρταση Θρομβωτικά Επεισόδια ↑ Iνωδογόνου, Αντιθρομβίνης ΙΙΙ, vWF, πρωτεΐνης C ↑ PAI-1 Poli KA et al; Association of blood pressure with fibrinolytic potential in the Framingham offspring population. Circulation 2000; 101:264–269 Spencer CG, et al; ASCOT Steering Committee, Anglo-Scandinavian Cardiac Outcomes Trial. Von Willebrand factor, soluble P-selectin, and target organ damage in hypertension: a substudy of the Anglo-Scandinavian Cardiac Outcomes Trial (ASCOT). Hypertension 2002; 40:61–66.

Ιδιοπαθής Υπέρταση Θρομβωτικά Επεισόδια Διαταραχή ροής από την παρουσία αθηρωματικών πλακών ↑ γλοιότητα αίματος Lip GY et al. Relation of endothelium, thrombogenesis, and hemorheology in systemic hypertension to ethnicity and left ventricular hypertrophy. Am J Cardiol 1997; 80:1566–1571 Junker R, Heinrich J, Schulte H, Erren M, Assmann G. Hemostasis in normotensive and hypertensive men: results of the PROCAM study. The prospective cardiovascular Munster study. J Hypertens 1998; 16:917–923

Ιδιοπαθής Υπέρταση Θρομβωτικά Επεισόδια To PDNO έχει φανεί ότι μειώνει τη συσσώρευση των αιμοπεταλίων, την προσκόλληση στο ενδοθήλιο και το σχηματισμό Monocyte - Platelet Aggregations

Ιδιοπαθής Υπέρταση Θρομβωτικά Επεισόδια To PDNO έχει φανεί ότι μειώνει τη συσσώρευση των αιμοπεταλίων, την προσκόλληση στο ενδοθήλιο και το σχηματισμό Monocyte - Platelet Aggregations Mu¨ ller DN et al: Angiotensin II (AT1) receptor blockade reduces vascular tissue factor in angiotensin II-induced cardiac vasculopathy. Am J Pathol 2000, 157:111–122 Touyz RM, Schiffrin EL. Effects of angiotensin II and endothelin-1 on platelet aggregation and cytosolic pH and free Ca2+ concentrations in essential hypertension. Hypertension 1993; 22:853–862

Ιδιοπαθής Υπέρταση Θρομβωτικά Επεισόδια Ένας σημαντικός παράγοντας είναι η αυξημένη δραστηριότητα του συμπαθητικού.

↑ Δραστηριότητα Συμπαθητικού ΝΣ Θρομβωτικά Επεισόδια Διαταραχή ισορροπίας μεταξύ μηχανισμού πήξης - ινωδόλυσης Daniel Preckela and Roland von Känela; Regulation of Hemostasis by the Sympathetic Nervous System:Any Contribution to Coronary Artery Disease?; Heartdrug. 2004 ; 4(3): 123–130. doi:10.1159/000078415

↑ Δραστηριότητα Συμπαθητικού ΝΣ Θρομβωτικά Επεισόδια Διαταραχή ισορροπίας μεταξύ μηχανισμού πήξης - ινωδόλυσης Daniel Preckela and Roland von Känela; Regulation of Hemostasis by the Sympathetic Nervous System:Any Contribution to Coronary Artery Disease?; Heartdrug. 2004 ; 4(3): 123–130. doi:10.1159/000078415 Συσσώρευση αιμοπεταλίων μέσω του αδρενεργικού υποδοχέα α2 von Känel R, Dimsdale JE. Effects of sympathetic activation by adrenergic infusions on hemostasis in vivo. Eur J Haematol 2000;65:357–369 Επαγωγή της συσσώρευσης καλύτερα… Grassi G. Role of the sympathetic nervous system in human hypertension. J Hypertens 1998; 16:1979–1987

Αδρενεργικός Υποδοχέας α2 Υποδοχέας 7TM Σύζευξη με Gi

Αδρενεργικός Υποδοχέας α2 Υποδοχέας 7TM Σύζευξη με Gi Αναστολή AC  ↓ cAMP

Αδρενεργικός Υποδοχέας α2 Υποδοχέας 7TM Σύζευξη με Gi α2Α Αναστολή AC  ↓ cAMP Περιλαμβάνει τους υπότυπους α2Β α2C Ο υπότυπος α2Β είναι ιδιαίτερα σημαντικός, καθώς… (επόμενη διαφάνεια)

Αδρενεργικός Υποδοχέας α2 Β Σημαντικός ρυθμιστής της συσσώρευσης αιμοπεταλίων Marketou ME, Kintsurashvili E, Androulakis NE, Kontaraki J, Alexandrakis MG, Gavras I, et al. Blockade of platelet alpha2B-adrenergic receptors: a novel antiaggregant mechanism. Int J Cardiol 2013; 168: 2561-2566 Επαγωγή αποκάλυψης της περιοχής σύνδεσης του ινωδογόνου στην GPIIb/IIIa Plow EF, Marguerie GA. Induction of the fibrinogen receptor on human platelets by epinephrine and the combination of epinephrine and ADP.J Biol Chem. 1980;255:10971–10977 Ο υπότυπος α2Β εκφράζεται στην επιφάνεια των αιμοπεταλίων και αποτελεί σημαντικό ρυθμιστή της συσσώρευσης. Μάλιστα ο αποκλεισμός του έχει σημαντική μεταβολή στη συσσώρευση, ακόμα και σε ασθενείς που λαμβάνουν διπλή αντιαιμοπεταλιακή αγωγή.

Αδρενεργικός Υποδοχέας α2 Σκοπός Αδρενεργικός Υποδοχέας α2 Β Σημαντικός ρυθμιστής της συσσώρευσης αιμοπεταλίων Marketou ME, Kintsurashvili E, Androulakis NE, Kontaraki J, Alexandrakis MG, Gavras I, et al. Blockade of platelet alpha2B-adrenergic receptors: a novel antiaggregant mechanism. Int J Cardiol 2013; 168: 2561-2566 Επαγωγή αποκάλυψης της περιοχής σύνδεσης του ινωδογόνου στην GPIIb/IIIa Plow EF, Marguerie GA. Induction of the fibrinogen receptor on human platelets by epinephrine and the combination of epinephrine and ADP.J Biol Chem. 1980;255:10971–10977 Ο υπότυπος α2Β εκφράζεται στην επιφάνεια των αιμοπεταλίων και αποτελεί σημαντικό ρυθμιστή της συσσώρευσης. Μάλιστα ο αποκλεισμός του έχει σημαντική μεταβολή στη συσσώρευση, ακόμα και σε ασθενείς που λαμβάνουν διπλή αντιαιμοπεταλιακή αγωγή. Επίδραση των επιπέδων της συστολικής αρτηριακής πίεσης (ΣΑΠ) στη γονιδιακή έκφραση των α2β-ARs σε αιμοπετάλια ασθενών με ιδιοπαθή υπέρταση, συγκριτικά με υγιή άτομα

Σχεδιασμός Μελέτης Μη Ρυθμισμένοι (36) Πληθυσμός Ομάδα Ασθενών (68) ΣΑΠ ≥ 140mmHg (ιατρείο) ΣΑΠ ≥ 135mmHg (ημερησίως – εκτός ιατρείου) 22 ♂ Ηλικία 55 ± 9 Πληθυσμός Ομάδα Ασθενών (68) Ομάδα Ελέγχου (24) Ρυθμισμένοι (32) Εκτίμηση Υποδοχέα α2Β ΣΑΠ < 140mmHg (ιατρείο) ΣΑΠ < 135mmHg (ημερησίως – εκτός ιατρείου) 21 ♂ Ηλικία 58 ± 8 Υγιή άτομα 12 ♂ 53 ± 10 Άλλες Εξετάσεις Στατιστική Ανάλυση Κριτήρια Αποκλεισμού: 2παθής υπέρταση Στεφανιαία Νόσος Καρδιακή Ανεπάρκεια Απέκκριση Αλβουμίνης > 300mg/24h Εγκυμοσύνη Νόσος Θυρεοειδούς Νόσος ήπατος, νεφρών Αγγειακή Νόσος Φλεγμονώδεις νόσοι Λοιμώδη Νοσήματα Αλκοόλ - Ναρκωτικά Αιματολογική νόσος Κακοήθεια BMI > 35 kg/m2

Σχεδιασμός Μελέτης Δείγματα Αίματος Πληθυσμός Φυγοκέντρηση Υπερκείμενο πλάσμα 75% (πλούσιο σε αιμοπετάλια) Απομόνωση Αιμοπεταλίων (με φυγοκέντρηση) Απομόνωση Ολικού RNA (TRI Reagent) Αντίστροφη Μεταγραφή (PrimeScript RT reagent Kit) Ποσοτικοποίηση Υποδοχέα α2Β (qPCR – Corbett Reshearch 6000) Πληθυσμός Εκτίμηση Υποδοχέα α2Β Άλλες Εξετάσεις Στατιστική Ανάλυση

Σχεδιασμός Μελέτης Πληθυσμός Εκτίμηση Υποδοχέα α2Β Κλινική Εξέταση Εκτίμηση ΒΜΙ Κλασικές εργαστηριακές εξετάσεις U/S Άλλες Εξετάσεις Στατιστική Ανάλυση

Σχεδιασμός Μελέτης Πληθυσμός Εκτίμηση Υποδοχέα α2Β Άλλες Εξετάσεις t test Ανάλυση Ποσοτικών Δεδομένων x2 test Ανάλυση Ποιοτικών Δεδομένων Συντελεστής Pearson Απλή Γραμμική Παλινδρόμηση IBM-SPSS 21 Βαθμός Σημαντικότητας 5% Στατιστική Ανάλυση

Αποτελέσματα

Αποτελέσματα Κλινικά Χαρακτηριστικά: Χωρίς στατιστικά σημαντική διαφορά στα υπόλοιπα κλινικά χαρακτηριστικά των δύο ομάδων

Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Αποτελέσματα Στατιστική Ανάλυση : 1η Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Ομάδα ασθενών με μη ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση 77.4 ± 59.7 Ομάδα ασθενών με ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση 37.2 ± 24.6 α2Β AR Γονιδιακή Έκφραση αιμοπεταλίων Ομάδα Ελέγχου Υγιών 38.6 ± 34.6

Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Αποτελέσματα Στατιστική Ανάλυση : 1η Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Ομάδα ασθενών με μη ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση 77.4 ± 59.7 Ομάδα ασθενών με ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση α2Β AR P < 0.01 37.2 ± 24.6 Γονιδιακή Έκφραση αιμοπεταλίων Ομάδα Ελέγχου Υγιών 38.6 ± 34.6

Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Αποτελέσματα Στατιστική Ανάλυση : 1η Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Ομάδα ασθενών με μη ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση 77.4 ± 59.7 P < 0.01 Ομάδα ασθενών με ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση α2Β AR 37.2 ± 24.6 Γονιδιακή Έκφραση αιμοπεταλίων Ομάδα Ελέγχου Υγιών 38.6 ± 34.6

Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Αποτελέσματα Στατιστική Ανάλυση : 1η Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Ομάδα ασθενών με μη ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση 77.4 ± 59.7 Ομάδα ασθενών με ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση α2Β AR 37.2 ± 24.6 Γονιδιακή Έκφραση αιμοπεταλίων Ομάδα Ελέγχου Υγιών 38.6 ± 34.6 Αυξημένη γονιδιακή έκφραση του υποδοχέα α2Β AR σε αιμοπετάλια ασθενών με μη ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση

Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Αποτελέσματα Στατιστική Ανάλυση : 1η Σύγκριση έκφρασης α2Β AR σε κάθε group Ομάδα ασθενών με ρυθμισμένη Ιδιοπαθή Υπέρταση α2Β AR 37.2 ± 24.6 Γονιδιακή Έκφραση αιμοπεταλίων Ομάδα Ελέγχου Υγιών 38.6 ± 34.6 Χωρίς στατιστικά σημαντική διαφορά στη γονιδιακή έκφραση των δύο ομάδων

Αποτελέσματα α2Β AR ΣΑΠ Στατιστική Ανάλυση : 2η 1η Στατιστική Ανάλυση : 2η 1η α2Β AR Γονιδιακή Έκφραση αιμοπεταλίων r = 0.51 p < 0.001 ΣΑΠ Επίπεδα Στατιστικά σημαντική Συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων γονιδιακής έκφρασης του υποδοχέα α2Β AR και των επιπέδων Συστολικής Αρτηριακής Πίεσης

Συμπεράσματα Αυξημένα επίπεδα γονιδιακής έκφρασης του υποδοχέα α2Β AR σε αιμοπετάλια ασθενών με ανεπαρκώς ρυθμισμένη ιδιοπαθή υπέρταση Μέγεθος γονιδιακής έκφρασης α2Β AR εξαρτώμενο από την αποτελεσματική ρύθμιση της υπέρτασης Έκφραση υποδοχέα σε ασθενείς με επαρκώς ρυθμισμένη υπέρταση παρόμοια με ομάδα υγιών Σημαντική συσχέτιση έκφρασης υποδοχέα με την τιμή της ΣΑΠ

Πιθανός Θεραπευτικός Στόχος Συμπεράσματα Νέοι παθοφυσιολογικοί μηχανισμοί για τα θρομβωτικά επεισόδια στην ιδιοπαθή υπέρταση Αποκλεισμός υποδοχέα α2Β Πιθανός Θεραπευτικός Στόχος

Σας Ευχαριστώ!