Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων Ιατρική Σχολή Ακαδημαϊκό Έτος: Βιοτεχνολογία Υπεύθυνη μαθήματος : Μαρία Φράγκου Φοιτητής/ρια : Παναγιώτα Παναγιώτου Α.Μ : 4953

«Το ΡΙΝΚ1 επιλεκτικά σταθεροποιεί τα εξασθενημένα μιτοχόνδρια για να ενεργοποιήσει την Παρκίνη(Parkin)»

Πάρκινσον Αιτία :Πρόωρη νέκρωση ντοπαμινεργικών νευρώνων της συμπαγούς μοίρας της μέλαινας ουσίας.

Πάρκινσον Η Νόσος Πάρκινσον(PD) χαρακτηρίζεται από απώλεια μελαινοραβδωτών κυττάρων τα οποία παράγουν ντοπαμίνη. Έτσι η νόσος εμφανίζεται σαν μια διαταραχή ελλείμματος ντοπαμίνης.

Τα αίτια της έρευνας Η δυσλειτουργία των μιτοχονδρίων στη μέλαινα ουσία Αυξημένο οξειδωτικό στρες, έλλειψη ΑΤΡ και κυτταρικός θάνατος Συσσώρευση ΡΙΝΚ1(σηματοδότης της Παρκίνης) Η Παρκίνη προσλαμβάνεται στα δυσλειτουργικά μιτοχόνδρια με χαμηλό δυναμικό της μεμβράνης. Eπάγει την απόπτωση των κατεστραμμένων μιτοχονδρίων.

Αποτελέσματα....

Το ΡΙΝΚ1 συσσωρεύεται μετά την εκπόλωση των μιτοχονδρίων HeLa κύτταρα που εκφράζουν σταθερά YF P-Parkin υποβλήθηκαν σε θεραπεία με CCCP. Από εκεί πήραμε ένα ίζημα πλούσιο σε πρωτεΐνες που έτρεξε σε SDS.

Το ΡΙΝΚ1 συσσωρεύεται μετά την εκπόλωση των μιτοχονδρίων Για να εξηγήσουμε την κινητική του ΡΙΝΚ1 κάναμε ξανά την θεραπεία με το CCCP ενώ τα είχαμε μαρκάρει με το MTR.Ανασοαποτύπωση.

Συσσώρευση ΡΙΝΚ1 στα εκπολωμένα μιτοχόνδρια στα μεμονομένα κύτταρα Βάλαμε τα κύτταρα HeLa με paraquat και είδαμε ότι το ΡΙΝΚ1 συσσωρεύεται περιφερικά της μεμβράνης με χαμηλό δυναμικό που έχουν καταστραφεί από οξειδωτικό στρες.

Η Διάσπαση της ΡΙΝΚ1 Το μεγάλο ΡΙΝΚ1 διασπάτε σε μόρια ~52 kDa με έναν τασεο- εξαρτούμενο τρόπο.Και αυτή η μορφή σύντομα αποσήρεται από τα πρωτεοσώματα.

Ποσοτική PCR Ποσοτική RT- PCR χρησιμοποιήθηκε για τη μέτρηση της σχετικής PINK1 mRNA έκφραση στa HeLa, θεραπεία με DMSO και CCCP για 1 ώρα. Η αύξηση της ΡΙΝΚ1 μετά από την εκπόλωση δεν οφείλεται σε μεταγραφή.

Η πρόσληψη της Παρκίνης απαιτεί την ύπαρξη του Ν-τελικού άκρου του ΡΙΝΚ1 Δεν γίνεται πρόσληψη της Παρκίνης αν το κύτταρο δεν είναι θετικό σε ΡΙΝΚ1.

Ύπαρξη ΡΙΝΚ1 στα κύτταρα απαραίτητη για λήψη Παρκίνης Θεραπεία με Κυκλοεξαμιδίνη(αναστολέ ας της βιοσύνθεσης πρωτεϊνών):Σταματά την πρόσληψη της Παρκίνης Θεραπεία με Ακτινομυκίνη Δ(αναστολέας μεταγραφής):μέτρια απόδοση στη λήψη Παρκίνης

Συνεστιακή Μικροσκοπία

Μετάλλαξη στην Παρκίνη και το ΡΙΝΚ1

Αυτού του είδους η μετάλλαξη μπορεί να προκαλέσει αυτοσωμικό υπολειπόμενο Πάρκινσον Χαρακτηριστικό είναι η «όγκοι» που συνδέονται άμεσα με το Πάρκινσον Τα μιτοχόνδρια δεν καταλήγουν σε αυτοφαγία απλώς συσσωρεύονται.

Συμπεράσματα ΡΙΝΚ1 συσσωρεύεται στα κατεστραμμένα μιτοχόνδρια. Σε φυσιολογικά μιτοχόνδρια το ΡΙΝΚ1 συντήθεται, διασπάται και εισάγεται σε όλες τις μεμβράνες τους. Όταν το ΡΙΝΚ1 συσσωρεύεται τότε αυτό σηματοδοτεί την Παρκίνη και αυτή με την σειρά της επάγει την αυτοφαγία του μιτοχονδρίου. Σε περίπτωση μετάλλαξης η απόσυρση δεν γίνεται και τα κατεστραμμένα μιτοχόνδρια οδηγούν σε αυτοσωμικό υπολειπόμενο Πάρκινσον. Το μονοπάτι της επιλογής των μιτοχονδρίων που έχουν υποστεί βλάβη από την Παρκίνη και το πώς τα επιλέγει από τα υγιή μας είναι ακόμα άγνωστο.

Ευχαριστώ για την ΠΡΟΣΟΧΗ ΣΑΣ!!

Βιβλιογραφία 1. D.Pruves et al (2004) Neurosience; Third Edition ; Sinauer Associates,Inc ; , Thomas E.Andreoli μεταφράστηκε από Χ.Μουτσόπουλος (2010);Cecil Βασική Παθολογία ; Β’τόμος ;Ιατρικές Εκδόσης Λίτσας ; R.W Albers et al (1991) Basic Neurochemistry ;Fourth Edition; Raven Press; L.Stryer et al (2004) Βιοχημεία Τόμος Ι ;Πανεπιστημιακές Εκδόσης Κρήτης ; , References:D.P Narendra et al:"PINK1 is selectively stabilized on impaired mitochondria to activate Parkin" PLoS Biology(2010); 8, e

Βιβλιογραφία B9%CE%BD%CF%83%CE%BF%CE%BD&um=1&hl=el&sa=N&tbm=isch&tbn id=EMv893vGR9HRKM:&imgrefurl= physiotherapy.blogspot.com/p/parkinson.html&docid=FqszGyasaiNoPM&i mgurl= AAAAc/OCWYhSVzAd4/s1600/%2525CE%2525A0%2525CE%252591%2525C E%2525A1%2525CE%25259A%2525CE%252599%2525CE%25259D%2525CE% 2525A3%2525CE%25259F%2525CE%25259D.cmap.jpg&w=1600&h=1176&ei=F Jq2T7bRLuKC4gSBzcjvCQ&zoom=1&iact=hc&vpx=752&vpy=304&dur=265& hovh=141&hovw=192&tx=149&ty=59&sig= &page=3&t bnh=140&tbnw=190&start=45&ndsp=24&ved=1t:429,r:3,s:45,i:188&biw=1366& bih=