Η παρουσίαση φορτώνεται. Παρακαλείστε να περιμένετε

Η παρουσίαση φορτώνεται. Παρακαλείστε να περιμένετε

Μπορρελίωση Νόσος Lyme Καραμπαξόγλου-Χατζοπούλου Δήμητρα Αναπληρώτρια Διευθύντρια Μικροβιολογικού Εργαστηρίου Νοσοκομείου Ειδικών Παθήσεων Θεσσαλονίκης.

Παρόμοιες παρουσιάσεις


Παρουσίαση με θέμα: "Μπορρελίωση Νόσος Lyme Καραμπαξόγλου-Χατζοπούλου Δήμητρα Αναπληρώτρια Διευθύντρια Μικροβιολογικού Εργαστηρίου Νοσοκομείου Ειδικών Παθήσεων Θεσσαλονίκης."— Μεταγράφημα παρουσίασης:

1 Μπορρελίωση Νόσος Lyme Καραμπαξόγλου-Χατζοπούλου Δήμητρα Αναπληρώτρια Διευθύντρια Μικροβιολογικού Εργαστηρίου Νοσοκομείου Ειδικών Παθήσεων Θεσσαλονίκης

2 Μπορρελίωση-Νόσος Lyme  Αναγνωρίστηκε ως νόσος το 1975  Πολυσυστηματική νόσος  Mεταδίδεται με αρθρόποδα (κρότωνες) του γένους Ixodes  Εμφανίζεται κυρίως την άνοιξη και το καλοκαίρι

3 Μπορρελίωση-Νόσος Lyme  Στην Αμερική αποτελεί την πιο συχνή νόσο που μεταδίδεται με αρθρόποδα  Ενδημεί κυρίως στις βορειοανατολικές περιοχές των ΗΠΑ  Στην Ευρώπη η νόσος ενδημεί κυρίως στη Γερμανία, Αυστρία, Ελβετία, Γαλλία και Σουηδία  Περιπτώσεις νόσου έχουν περιγραφεί και σε χώρες της Ανατολικής Ευρώπης, της Βαλκανικής χερσονήσου, Κίνα, Ιαπωνία και Αυστραλία

4 Μελέτη της νόσου στην Ελλάδα  Στην Ελλάδα η νόσος είναι μάλλον σπάνια, η πραγματική επίπτωση της δεν είναι γνωστή  Δεν απομονώθηκε κανένα είδος μπορρέλιας από κρότωνες Ixodes ricinus  Αντισώματα IgG σε υγιή άτομα  Σε νεαρούς άνδρες με ELISA 3,27% και με WB 0,27%  Σε αιμοδότες 4,7% θετικά με ELISA, κανένα δεν επιβεβαιώθηκε με WB  Σε τυχαίο υγιή πληθυσμό με ELISA και IFA 14,78%  Σε αθίγγανους με ELISA 1,1%

5 Μελέτη της νόσου στην Ελλάδα  Όχι ισχυρή εργαστηριακή τεκμηρίωση –1994: Περίπτωση ραγοειδίτιδας –1991 και 2002: Δύο περιπτώσεις ασθενών με νευρολογικές διαταραχές –2004: Περίπτωση δευτεροπαθούς σπειραματονεφρίτιδας –2006: Περίπτωση καρδίτιδας  Ανιχνεύθηκε B.valaisiana στο ΕΝΥ με PCR –2004: Περίπτωση σπαστικής παραπάρεσης  Αντισώματα σε α σθενείς  Με αρθρίτιδα, με IFA 7,3% με WB 0%  Με αρθρίτιδα ή με συμπτώματα από το ΚΝΣ Mία περίπτωση ενδεικτική νόσου Mία περίπτωση ενδεικτική νόσου Μεγάλος αριθμός ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων Μεγάλος αριθμός ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων

6 Μπορρελίωση-Νόσος Lyme  Το αίτιο της νόσου αναγνωρίστηκε το 1982, όταν απομονώθηκε από τους Burgdorfer και Barbour από κρότωνες  Το 1983 απομονώθηκε από ασθενείς  Αναγνωρίστηκε ως νέο είδος του γένους Borrelia, ονομάστηκε B.burgdorferi

7 Borrelia burgdorferi Ελικοειδές βακτήριο με 3-10 αβαθείς σπείρες, μήκος μm και πάχος 0,2-0,5 μm Αποτελείται από πρωτοπλασματικό κύλινδρο, κυτταρική μεμβράνη, 7-11 περιπλασμικές βλεφαρίδες, εξωτερική μεμβράνη Φέρει γραμμικό χρωμόσωμα, 21 πλασμίδια, 100 διαφορετικές πρωτεΐνες Φαίνεται με μικροσκόπιο αντίθεσης φάσεως και σκοτεινού πεδίου ή με χρώση Giemsa

8 Είδη της B.burgdorferi Δεκατέσσερα είδη B.burgdorferi sensu lato (5 στην Αμερική, 6 στην Ευρώπη και 7 στην Ασία) Δεκατέσσερα είδη B.burgdorferi sensu lato (5 στην Αμερική, 6 στην Ευρώπη και 7 στην Ασία) Κύρια παθογόνα είδη για τον άνθρωπο Κύρια παθογόνα είδη για τον άνθρωπο –B.burgdorferi sensu stricto –B.afzelii –B.garinii Άλλα παθογόνα B.spielmanii, B.valaisiana, B.bissettii, B.lusitaniae Άλλα παθογόνα B.spielmanii, B.valaisiana, B.bissettii, B.lusitaniae Διαχωρίζονται σε 8 οροτύπους (OspA) και 16 οροτύπους (OspC) Διαχωρίζονται σε 8 οροτύπους (OspA) και 16 οροτύπους (OspC) Σημαντικές διαφορές μεταξύ των στελεχών που απομονώνονται σε Αμερική και σε διάφορες περιοχές της Ευρώπης Σημαντικές διαφορές μεταξύ των στελεχών που απομονώνονται σε Αμερική και σε διάφορες περιοχές της Ευρώπης B. burgdorferi s.s. B. afzelii B. garinii B. spielmani

9

10 Μετάδοση Μεταδίδεται στον άνθρωπο με τους κρότωνες του γένους Ixodes Μεταδίδεται στον άνθρωπο με τους κρότωνες του γένους Ixodes –Αμερική Ixodes scapularis (I.dammini) –Ευρώπη Ixodes ricinus Η μετάδοση γίνεται κατά τη διάρκεια του δήγματος με το σίελο και τα περιττώματα των κροτώνων Η μετάδοση γίνεται κατά τη διάρκεια του δήγματος με το σίελο και τα περιττώματα των κροτώνων Μετάδοση από άνθρωπο σε άνθρωπο δεν παρατηρείται Μετάδοση από άνθρωπο σε άνθρωπο δεν παρατηρείται Μεταδίδεται κατά την ενδομήτριο ζωή Μεταδίδεται κατά την ενδομήτριο ζωή

11 Μπορρέλια Κρότωνες Κύρια δεξαμενή του μικροβίου τα μικρά τρωκτικά, πουλιά, ελάφια, από τα οποία μολύνονται οι κρότωνες τα μικρά τρωκτικά, πουλιά, ελάφια, από τα οποία μολύνονται οι κρότωνες Αναλογία μόλυνσης των κροτώνων στην Ευρώπη 3-58%, παραμένουν σε όλα τα στάδια εξέλιξης τους Δεν γίνεται κάθετη μετάδοση στους κρότωνες Η Β.burgdorferi προσβάλλει και κατοικίδια ζώα τα οποία νοσούν

12 Παθογένεια Μετά την είσοδό της στο δέρμα η μπορρέλια εξαπλώνεται φυγόκεντρα και ακολουθεί διασπορά στο αίμα και τα διάφορα όργανα Στα όργανα κατορθώνει και επιβιώνει για μεγάλο χρονικό διάστημα διαφεύγοντας τους αμυντικούς μηχανισμούς του οργανισμού Οι φλεγμονώδεις διεργασίες στα διάφορα όργανα οφείλονται στην παραμονή της μπορρέλιας, αλλά και στην αντισωματική απάντηση και την παραμονή ανοσοσυμπλεγμάτων

13 Κλινική εικόνα  Πολυσυστηματική νόσος με εκδηλώσεις από δέρμα, καρδιά, νευρικό και μυοσκελετικό σύστημα  Η νόσος διακρίνεται σε τρία στάδια: Στάδιο 1 ή πρώιμη εντοπισμένη νόσος Στάδιο 1 ή πρώιμη εντοπισμένη νόσος Στάδιο 2 ή πρώιμη συστηματική νόσος Στάδιο 2 ή πρώιμη συστηματική νόσος Στάδιο 3 ή όψιμη νόσος Στάδιο 3 ή όψιμη νόσος  Δεν εμφανίζονται απαραίτητα και τα τρία στάδια  Ασυμπτωματική νόσος σε αναλογία 5-10%

14 Στάδιο 1 ή πρώιμη εντοπισμένη νόσος Κύριο σύμπτωμα το μεταναστευτικό ερύθημα στο σημείο του δήγματος (3-30 ημέρες μετά το δήγμα σε 60-80% των περιπτώσεων) Κύριο σύμπτωμα το μεταναστευτικό ερύθημα στο σημείο του δήγματος (3-30 ημέρες μετά το δήγμα σε 60-80% των περιπτώσεων) Μονήρες διαμέτρου >5cm επίπεδο, επεκτείνεται περιφερικά, με δακτυλιοειδή μορφή και διαύγαση στο κέντρο Μονήρες διαμέτρου >5cm επίπεδο, επεκτείνεται περιφερικά, με δακτυλιοειδή μορφή και διαύγαση στο κέντρο Συνοδεύεται από πυρετό, πονοκέφαλο, μυαλγίες, αρθραλγίες, λεμφαδενίτιδα Συνοδεύεται από πυρετό, πονοκέφαλο, μυαλγίες, αρθραλγίες, λεμφαδενίτιδα Υποχωρεί χωρίς θεραπεία μετά από 3-4 εβδομάδες Υποχωρεί χωρίς θεραπεία μετά από 3-4 εβδομάδες

15 Στάδιο 2 ή πρώιμη συστηματική νόσος  Εμφανίζεται εβδομάδες έως μήνες μετά τη μόλυνση  Κλινικές εκδηλώσεις –Δερματικές βλάβες, λεμφοκύττωμα –Νευρολογικές: (10-15%), μηνιγγίτιδα, παράλυση του προσωπικού νεύρου, εγκεφαλίτιδα –Καρδιά: καρδίτιδα, μυοκαρδίτιδα, περικαρδίτιδα –Μυοσκελετικό σύστημα: αρθραλγίες, μυαλγίες με μεταναστευτικό χαρακτήρα –Συμπτώματα από οφθαλμούς, ήπαρ, σπλήνα κ.λ.π.  Τα συμπτώματα χωρίς θεραπεία διαρκούν ένα χρόνο

16 Στάδιο 3 ή όψιμη νόσος Εμφανίζεται μήνες ή χρόνια από τη μόλυνση Κύριες κλινικές εκδηλώσεις Χρόνια ατροφική ακροδερματίτιδαΧρόνια ατροφική ακροδερματίτιδα Χρόνια προοδευτική εγκεφαλίτιδα ή μηνιγγοεγκεφαλίτιδαΧρόνια προοδευτική εγκεφαλίτιδα ή μηνιγγοεγκεφαλίτιδα Μονοαρθρίτιδα ή πολυαρθρίτιδα, κυρίως στους ενήλικους σε αναλογία 10%, χρόνια αρθρίτιδα στο γόνατο συχνότερα σε άτομα με HLA-DR4Μονοαρθρίτιδα ή πολυαρθρίτιδα, κυρίως στους ενήλικους σε αναλογία 10%, χρόνια αρθρίτιδα στο γόνατο συχνότερα σε άτομα με HLA-DR4

17

18 Κλινική μορφή και είδος Τα διάφορα είδη της Β.burgdorferi sensu lato έχουν διαφορετική παθογόνο δράση Αρθρίτιδα προκαλεί κυρίως η B.burgdorferi sensu stricto (75%) και σε πολύ μικρότερη αναλογία τα άλλα δύο είδη Νευρομπορρελίωση προκαλεί η B.garinii (100%) Ατροφική ακροδερματίτιδα προκαλεί η B.afzelii (100%) Διαφορετικές κλινικές εκδηλώσεις σε Αμερική και Ευρώπη

19 Διάγνωση Η διάγνωση της νόσου παρουσιάζει πολλές δυσκολίες Η διάγνωση της νόσου παρουσιάζει πολλές δυσκολίες Στην πρώιμη νόσο στηρίζεται κυρίως στα κλινικά ευρήματα Στην πρώιμη νόσο στηρίζεται κυρίως στα κλινικά ευρήματα Στα μετέπειτα στάδια απαιτείται εργαστηριακή επιβεβαίωση των κλινικών ευρημάτων Στα μετέπειτα στάδια απαιτείται εργαστηριακή επιβεβαίωση των κλινικών ευρημάτων

20 Εργαστηριακή διάγνωση Άμεση αναζήτηση του μικροβίου –Μ–Μ–Μ–Μικροσκόπηση –Α–Α–Α–Ανίχνευση ειδικών πρωτεϊνών –Α–Α–Α–Αναζήτηση του DNA με μοριακές τεχνικές –Α–Α–Α–Απομόνωση του μικροοργανισμού Ανοσολογικές μέθοδοι –Α–Α–Α–Ανοσοφθορισμός –Α–Α–Α–Ανοσοενζυμικές μέθοδοι –Α–Α–Α–Ανοσοαποτύπωση

21 Άμεση αναζήτηση του μικροβίου Κλινικά δείγματα: Κλινικά δείγματα: –Τεμάχιο βιοψίας ή έκπλυμα δέρματος –ΕΝΥ –Αρθρικό υγρό –Ολικό αίμα ή πλάσμα –Ούρα –Δείγματα βιοψίας από διάφορα όργανα

22 Ανίχνευση των μπορρελιών Ανίχνευση των αντιγόνων  Πτωχά αποτελέσματα λόγω του μικρού αριθμού των μπορρελιών  Μικροσκόπιο αντίθεσης φάσεως ή σκοτεινού πεδίου  Μικροσκόπιο φθορισμού με χρώσεις Warthin- Starry ή acridine orange  Ανίχνευση ειδικών πρωτεϊνών με αμφισβητούμενα αποτελέσματα

23 Καλλιέργεια Η μπορρέλια είναι απαιτητικό μικρόβιο Κλασικό θρεπτικό υλικό για την απομόνωση του μικροβίου είναι το BSK Επωάζεται στους ο C σε μικροαερόφιλες συνθήκες για τουλάχιστον 12 εβδομάδες Έλεγχος ανάπτυξης του μικροοργανισμού στο υπερκείμενο της καλλιέργειας Μικροσκοπική εξέταση παρασκευάσματος Χρησιμοποίηση μονοκλωνικών αντισωμάτων Ανίχνευση του DNA του μικροβίου με PCR

24 Καλλιέργεια Είναι επίπονος, χρονοβόρα και γίνεται σε εξειδικευμένα εργαστήρια Η αναλογία απομόνωσης του μικροβίου από καλλιέργεια τεμαχίου βιοψίας δέρματος ή αίματος κυμαίνεται από %, ενώ από το ΕΝΥ είναι πολύ μικρή κάτω από 10%

25 Αναζήτηση του DNA του μικροβίου Οι μοριακές τεχνικές χρησιμοποιούνται για: Οι μοριακές τεχνικές χρησιμοποιούνται για: –Επιβεβαίωση της κλινικής διάγνωσης –Μοριακή τυποποίηση των μπορρελιών που απομονώνονται στην καλλιέργεια Σημαντική η λήψη και προετοιμασία του DNA Σημαντική η λήψη και προετοιμασία του DNA Ποιοτική PCR (conventional και nested PCR) Ποιοτική PCR (conventional και nested PCR) Ποσοτική PCR (competitive και real time PCR) Ποσοτική PCR (competitive και real time PCR) Φυλογενετική ανάλυση Φυλογενετική ανάλυση

26 Αναζήτηση του DNA του μικροβίου Γονίδια στόχοι: Γονίδια στόχοι: –Χρωμοσωμικά (flaB, recA, p66) –Τμήματα γονιδίων (23SrRNA 16SrRNA, 5S/23SrRNA) –Πλασμιδιακά (ospA)

27 PCR - Προβλήματα  Το αποτέλεσμα της PCR εξαρτάται από:  Το κλινικό στάδιο της νόσου  Τον αριθμό των μπορρελιών στο κλινικό δείγμα  Την επιλογή του γονιδίου στόχος και των εκκινητών  Την προηγούμενη λήψη αντιβιοτικών  Καλύτερα αποτελέσματα έχει η PCR σε τεμάχια βιοψίας δέρματος (μεταναστευτικό ερύθημα έως 89%, ακροδερματίτιδα έως 100%), καθώς και σε αρθρικό υγρό (81%) και ιστό  Χαμηλή ευαισθησία στο αίμα (10-18%) και στο ΕΝΥ (10-30%)  Καλά αποτελέσματα έχει η PCR όταν χρησιμοποιείται ως στόχος το γονίδιο που κωδικοποιεί τις βλεφαρίδες Μικρός αριθμός μπορρελιών Το DNA του μικροοργανισμού παραμένει:  Στη δερματική βλάβη 1-6 μήνες μετά το ερύθημα  Στο ΕΝΥ και στο αρθρικό υγρό >10 χρόνια  Αρνητική PCR λίγες ημέρες μετά την έναρξη της θεραπείας

28 Αντισωματική απάντηση Η εμφάνιση των αντισωμάτων είναι αργή και διαφέρει πολύ από ασθενή σε ασθενή Τα IgM εμφανίζονται την 2 η -3 η εβδομάδα, κορυφώνονται την 6 η -8 η και συνήθως επανέρχονται σε 4-8 μήνες Τα IgG εμφανίζονται την 4 η -6 η εβδομάδα, κορυφώνονται τον 4 ο -6 ο μήνα, παραμένουν για πολλά χρόνια Στην πρόσφατη νόσο ανευρίσκονται IgM και IgG στα μετέπειτα στάδια μόνο IgG

29 Αντισωματική απάντηση Αντισώματα ανιχνεύονται: 1 ο στάδιο στο 20-50% των ασθενών (FlaB, OspC, DbpA, BmpA, VlsE) 2 ο στάδιο στο 70-90% των ασθενών (p39, p58) 3 ο στάδιο στο 100% των ασθενών (p83/100, p58, p43, p39, p30)

30 Αντισωματική απάντηση  Όταν η θεραπεία αρχίζει νωρίς τα αντισώματα ελαττώνονται σε 3-6 μήνες  Στην όψιμη νόσο παραμένουν για χρόνια ακόμη και μετά από επιτυχημένη θεραπεία  Τα αντισώματα δεν είναι προστατευτικά

31 Ορολογικές δοκιμασίες  Η αναζήτηση των αντισωμάτων γίνεται στον ορό ή στο ΕΝΥ  Εξετάζονται δύο, ή περισσότερα, δείγματα ορού με μεσοδιάστημα 3-6 εβδομάδες  Ορολογικές δοκιμασίες που χρησιμοποιούνται είναι:  Ο ανοσοφθορισμός  Η ELISA  Η ανοσοαποτύπωση

32 Νευρομπορρελίωση  Ενδονωτιαία παραγωγή IgM και IgG αντισωμάτων  Εξετάζονται ταυτόχρονα ορός και ΕΝΥ  Υπολογίζεται ο δείκτης των ειδικών αντισωμάτων: ο λόγος του τίτλου των αντισωμάτων έναντι της μπορρέλια στο ΕΝΥ προς τον τίτλο των αντισωμάτων του ορού. Εάν είναι μεγαλύτερος της μονάδας τότε ενδονωτιαία παραγωγή  Για να αποκλεισθεί η είσοδος των IgG από τον ορό λόγω διαταραχής του αιματoεγκεφαλικού φραγμού προσδιορίζεται και ο λόγος των ολικών IgG του ΕΝΥ προς τα ολικά IgG του ορού  Όταν ο λόγος των ειδικών αντισωμάτων είναι μεγαλύτερος από το λόγο των IgG τότε έχουμε ενδονωτιαία παραγωγή

33 Έμμεσος ανοσοφθορισμός Χρησιμοποιείται ως αντιγόνο ολόκληρο το μικροβιακό κύτταρο Χρησιμοποιείται ως αντιγόνο ολόκληρο το μικροβιακό κύτταρο Θετικοί τίτλοι θεωρούνται μεγαλύτεροι από 64 ή 256 ανάλογα με τη μέθοδο Θετικοί τίτλοι θεωρούνται μεγαλύτεροι από 64 ή 256 ανάλογα με τη μέθοδο Συχνά παρατηρούνται ψευδώς θετικά αποτελέσματα Συχνά παρατηρούνται ψευδώς θετικά αποτελέσματα

34 ELISA - Αντιγόνο Χρησιμοποιείται ολόκληρο το μικροβιακό κύτταρο Χρησιμοποιείται ολόκληρο το μικροβιακό κύτταρο Ψευδώς θετικά αποτελέσματα Διασταυρούμενα αποτελέσματα Προσροφημένο αντιγόνο με το στέλεχος Reiter του τρεπονήματος Προσροφημένο αντιγόνο με το στέλεχος Reiter του τρεπονήματος Ειδικές καθαρές ή ανασυνδυασμένες ή συνθετικές πρωτεΐνες του μικροβίου (OspC, OspF, p22, p34, p39) ή πεπτίδια ή συνδυασμός αυτών Ειδικές καθαρές ή ανασυνδυασμένες ή συνθετικές πρωτεΐνες του μικροβίου (OspC, OspF, p22, p34, p39) ή πεπτίδια ή συνδυασμός αυτών Δεσμευτική (Capture) ELISA Δεσμευτική (Capture) ELISA  Η χρήση τους έχει ως πλεονέκτημα το ότι δίνουν λίγες διασταυρούμενες αντιδράσεις και αντιδρούν με όλα τα είδη της μπορρέλιας  Το C10 τμήμα 10 αμινοξέων της OspC ενώνεται με τα IgM αντισώματα και ανιχνεύει αντισώματα στην πρώιμη νόσο και όχι στην όψιμη, με καλή ειδικότητα δίχως να έχει τόση ετερογένεια όσο η OspC  Tο C6 τμήμα της VlsE υψηλή ευαισθησία και ειδικότητα σε όλα τα στάδια και σε πολλές γεωγραφικές περιοχές  Μικροβιακές λοιμώξεις: T.pallidum, Leptospira, Rickettsiae  Ιογενείς λοιμώξεις: EBV, CMV, HIV  Αυτοάνοσα νοσήματα

35 ELISA - Ευαισθησία Η ευαισθησία της ELISA εξαρτάται από το είδος του μικροβίου που χρησιμοποιείται ως αντιγόνο, από το στάδιο και την κλινική εκδήλωση της νόσου Στην πρώιμη νόσο με ερύθημα είναι 59-66% Στην πρώιμη νευρομπορρελίωση είναι 63-75% Στην αρθρίτιδα η ευαισθησία φθάνει το 89-95% Στην όψιμη νευρομπορρελίωση το %

36 Ανοσοαποτύπωση (Western Blot) Χρησιμοποιείται για να αυξήσει την ειδικότητα στη διάγνωση της νόσου Χρησιμοποιείται για να αυξήσει την ειδικότητα στη διάγνωση της νόσου Ο ορός του ασθενούς αντιδρά με τις διάφορες πρωτεΐνες της μπορρέλιας που βρίσκονται σε ταινία νιτροκυτταρίνης Ο ορός του ασθενούς αντιδρά με τις διάφορες πρωτεΐνες της μπορρέλιας που βρίσκονται σε ταινία νιτροκυτταρίνης –Ηλεκτροφορημένο ολικό εκχύλισμα Borrelia Ανιχνεύουν αντισώματα έναντι μεγάλου αριθμού αντιγόνων Ανιχνεύουν αντισώματα έναντι μεγάλου αριθμού αντιγόνων –Ανασυνδυασμένα αντιγόνα Δυνατότητα επιλογής αριθμού και είδους αντιγόνου Δυνατότητα επιλογής αριθμού και είδους αντιγόνου

37 Ανοσοαποτύπωση (Western Blot) Tο CDC πρότεινε κάθε θετικό αποτέλεσμα με IFA ή ELISA να επιβεβαιώνεται με WB Tο CDC πρότεινε κάθε θετικό αποτέλεσμα με IFA ή ELISA να επιβεβαιώνεται με WB Αποτέλεσμα αρνητικό με την ELISA ή με τον IFA θα πρέπει να θεωρείται αρνητικό για νόσο Lyme τουλάχιστον για τη στιγμή που γίνεται Αποτέλεσμα αρνητικό με την ELISA ή με τον IFA θα πρέπει να θεωρείται αρνητικό για νόσο Lyme τουλάχιστον για τη στιγμή που γίνεται Όταν η Western Blot γίνεται τις πρώτες 4 εβδομάδες της νόσου πρέπει να εξετάζονται και τα IgM και τα IgG Όταν η Western Blot γίνεται τις πρώτες 4 εβδομάδες της νόσου πρέπει να εξετάζονται και τα IgM και τα IgG Tο CDC έθεσε κριτήρια για την ερμηνεία της WB Tο CDC έθεσε κριτήρια για την ερμηνεία της WB

38 Ανοσοαποτύπωση - Κριτήρια  Αξιολόγηση των IgM  Θετικό θεωρείται το αποτέλεσμα όταν είναι παρούσες δύο από τις ακόλουθες μπάντες: 24 kDa (OspC), 39 kDa (BmpA), 41 kDa (Fla)  Αξιολόγηση των IgG  Θετικό θεωρείται το αποτέλεσμα όταν είναι παρούσες πέντε από τις ακόλουθες μπάντες: 18 kDa, 21 kDa, 28 kDa, 30 kDa, 39 kDa (BmpA), 41 kDa (Fla), 45 kDa, 58 kDa (not GroEL), 66 kDa, kai 93 kDa 28 kDa, 30 kDa, 39 kDa (BmpA), 41 kDa (Fla), 45 kDa, 58 kDa (not GroEL), 66 kDa, kai 93 kDa

39 Western Blot – Προβλήματα Η WB έχει πολλά προβλήματα ερμηνείας στην Ευρώπη, εξαρτώμενη από το είδος της μπορρέλιας που χρησιμοποιείται ως αντιγόνο Η WB έχει πολλά προβλήματα ερμηνείας στην Ευρώπη, εξαρτώμενη από το είδος της μπορρέλιας που χρησιμοποιείται ως αντιγόνο Θεσπίστηκαν κανόνες για την Ευρώπη Θεσπίστηκαν κανόνες για την Ευρώπη Οι κανόνες αυτοί δεν μπορούν να εφαρμοστούν στο κάθε εργαστήριο, αλλά να χρησιμοποιηθούν ως οδηγοί Οι κανόνες αυτοί δεν μπορούν να εφαρμοστούν στο κάθε εργαστήριο, αλλά να χρησιμοποιηθούν ως οδηγοί Η WB να μη χρησιμοποιείται ως επιβεβαιωτική δοκιμασία, αλλά μάλλον ως υποστηρικτική της διάγνωσης Η WB να μη χρησιμοποιείται ως επιβεβαιωτική δοκιμασία, αλλά μάλλον ως υποστηρικτική της διάγνωσης

40 Western Blot – Προβλήματα  Σε περιοχές χαμηλής ενδημικότητας να χρησιμοποιούνται μέθοδοι με μεγάλη ειδικότητα  Σημαντικές πρωτεΐνες για τα IgM είναι οι p41 και p21 και για τα IgG οι p83/100, p58 και VlsE  Προτείνουν στην Ευρώπη να χρησιμοποιούνται μέθοδοι που έχουν ως αντιγόνο την B.afzelii

41 Άλλες μέθοδοι διάγνωσης  Ανίχνευση αντισωμάτων συνδεδεμένων σε κυκλοφορούντα ανοσοσυμπλέγματα  Δοκιμασία μετατροπής των λευκοκυττάρων μετά από έκθεσή τους σε αντιγόνα της σπειροχαίτης  Χημειοκίνη CXCL13: Δείκτης πιθανός για τη διάγνωση της νευρομπορρελίωσης

42 Κλινική μορφή-Διάγνωση Μεταναστευτικό ερύθημα Μεταναστευτικό ερύθημα  Κλινικά ευρήματα  Ανίχνευση μικροοργανισμού σε τεμάχιο βιοψίας δέρματος με καλλιέργεια ή PCR  Ανεύρεση IgM και IgG αντισωμάτων σε δύο δείγματα ορού Πρόσφατη νευρομπορρελίωση Πρόσφατη νευρομπορρελίωση   ΕΝΥ: Αύξηση λεμφοκυττάρων και λευκώματος  Ανεύρεση IgM και IgG αντισωμάτων σε δύο δείγματα ορού και ΕΝΥ  Ανίχνευση του μικροοργανισμού στο ΕΝΥ με καλλιέργεια ή PCR

43 Κλινική μορφή-Εργαστηριακή διάγνωση Χρόνια νευρομπορρελίωση Χρόνια νευρομπορρελίωση   ΕΝΥ: Αύξηση των λεμφοκυττάρων και λευκώματος  Ανεύρεση IgG αντισωμάτων στον ορό και στο ΕΝΥ Αρθρίτιδα Αρθρίτιδα  Αρθρικό υγρό: Αύξηση των πολυμορφοπυρήνων, των ανοσοσυμπλεγμάτων και των κρυοσφαιρινών  Ανίχνευση του μικροοργανισμού στο αρθρικό υγρό με καλλιέργεια ή PCR  Ανεύρεση IgM και IgG ή μόνο IgG αντισωμάτων σε δύο δείγματα ορού

44 Πρωτόκολλο Εργαστηρίου Ν.Ε.Π.Θ. Ανίχνευση IgM και IgG αντισωμάτων στον ορό ή στο ΕΝΥ με ELISA και IFA (στέλεχος B.burgdorferi sensu stricto) Ανίχνευση IgM και IgG αντισωμάτων στον ορό ή στο ΕΝΥ με ELISA και IFA (στέλεχος B.burgdorferi sensu stricto) Τα θετικά αποτελέσματα επανεξετάζονται με WB (ηλεκτροφορημένο στέλεχος B.afzeli + VlsE) Τα θετικά αποτελέσματα επανεξετάζονται με WB (ηλεκτροφορημένο στέλεχος B.afzeli + VlsE) Υλικό: Άτομα με δερματικές ή νευρολογικές εκδηλώσεις συμβατές με μπορρελίωση Υλικό: Άτομα με δερματικές ή νευρολογικές εκδηλώσεις συμβατές με μπορρελίωση Δεν αποδείχθηκε σε κανένα άτομο μπορρελίωση Δεν αποδείχθηκε σε κανένα άτομο μπορρελίωση

45 Θεραπεία Η νόσος έχει συνήθως καλή πρόγνωση Η νόσος έχει συνήθως καλή πρόγνωση Η θεραπεία περιορίζει τη νόσο, προλαμβάνει τις επιπλοκές και τη χρονιότητα Η θεραπεία περιορίζει τη νόσο, προλαμβάνει τις επιπλοκές και τη χρονιότητα Όταν η νόσος επεκταθεί σε άλλα όργανα η αποτελεσματικότητα της θεραπείας είναι περιορισμένη Όταν η νόσος επεκταθεί σε άλλα όργανα η αποτελεσματικότητα της θεραπείας είναι περιορισμένη Ο έλεγχος αποτελεσματικότητας της θεραπείας στηρίζεται σε κλινικά κριτήρια και όχι σε προσδιορισμό των αντισωμάτων Ο έλεγχος αποτελεσματικότητας της θεραπείας στηρίζεται σε κλινικά κριτήρια και όχι σε προσδιορισμό των αντισωμάτων

46 Θεραπεία  Για τη θεραπεία της νόσου στα δύο πρώτα στάδια, χωρίς την παρουσία νευρολογικών και καρδιακών εκδηλώσεων, συνιστάται η χορήγηση doxycycline ή amoxicillin, για ημέρες  Για τη θεραπεία των ασθενών με σοβαρότερες επιπλοκές συνιστάται ceftriaxone, penicillin, cefotaxime ή doxycycline, για 4 εβδομάδες

47 Προφύλαξη-Εμβόλιο  Στην Αμερική κυκλοφόρησε εμβόλιο ( Lymerix ), το οποίο είναι δραστικό μόνο έναντι της B.burgdorferi sensu stricto  Περιέχει ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη της εξωτερικής μεμβράνης ( OspA )  Χορηγείται μόνο σε άτομα υψηλού κινδύνου, σε ενδημικές περιοχές, η αποτελεσματικότητά του είναι 80%, αλλά παρέχει προστασία για μικρό χρονικό διάστημα, για μερικούς μήνες  Το 2002 αποσύρθηκε από την κυκλοφορία

48 Αποφυγή επαφής με κρότωνες Αποφυγή επαφής με κρότωνες Προφύλαξη Έρευνες για καινούργιο εμβόλιο

49 Προφυλακτικά μέτρα Επάλειψη με εντομοαπωθητικό Ενδυμασία ανοικτού χρώματος με μακριά μανίκια και μακριά παντελόνια Το κάτω μέρος του παντελονιού να τοποθετείται μέσα στις κάλτσες Συχνός έλεγχος των εκτεθειμένων σημείων του σώματος για παρουσία κροτώνων Απομάκρυνση όσο το δυνατόν πιο γρήγορα του κρότωνα από το δέρμα με μικρή λαβίδα

50 ΕΥΧΑΡΙΣΤΩΕΥΧΑΡΙΣΤΩ


Κατέβασμα ppt "Μπορρελίωση Νόσος Lyme Καραμπαξόγλου-Χατζοπούλου Δήμητρα Αναπληρώτρια Διευθύντρια Μικροβιολογικού Εργαστηρίου Νοσοκομείου Ειδικών Παθήσεων Θεσσαλονίκης."

Παρόμοιες παρουσιάσεις


Διαφημίσεις Google