ΝΙΚΟΛ-ΔΗΜΗΤΡΑ ΣΑΡΑΝΤΗ 4565 Η ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΩΝ ΚΑΙ ΟΓΚΟΓΟΝΙΔΙΩΝ ΣΤΟ ΜΕΤΑΒΟΛΙΣΜΟ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΠΟΥ ΕΧΟΥΝ ΑΠΟΚΟΛΛΗΘΕΙ ΑΠΟ ΤΗ ΒΑΣΙΚΗ ΜΕΜΒΡΑΝΗ – ΣΩΤΗΡΙΑ ΑΠΟ ΤΗ ΜΟΙΡΑ «ANOIKIS» ΝΙΚΟΛ-ΔΗΜΗΤΡΑ ΣΑΡΑΝΤΗ 4565 ΜΑΘΗΜΑ: ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑ ΥΠΕΥΘΥΝΟΣ: ΚΑ ΦΡΑΓΚΟΥ ΙΑΤΡΙΚΗ ΣΧΟΛΗ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΙΩΑΝΝΙΝΩΝ ΜΑΙΟΣ 2010

? ΥΠΟΘΕΣΗ – Η ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΕΡΕΥΝΑΣ ΟΓΚΟΓΟΝΙΔΙΑ ANOIKIS ΚΑΡΚΙΝΟΣ ΚΥΤΤΑΡΑ Schafer Z., Grassian A., et al. “Antioxidant and Oncogene Rescue of Metabolic Defects caused by Loss of Matrix Attachement”. Nature 3 Sep. 2009: 109-113 ΟΓΚΟΓΟΝΙΔΙΑ ΚΑΡΚΙΝΟΣ ANOIKIS ΚΥΤΤΑΡΑ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΑ ?

ANOIKIS ΚΥΤΤΑΡΑ «ΑΝΕΥ ΟΙΚΟΥ» - HOMELESS CELLS ΚΥΤΤΑΡΑ που έχουν ΑΠΟΚΟΛΛΗΘΕΙ ΑΠΟ ΤΗ ΒΑΣΙΚΗ ΜΕΜΒΡΑΝΗ (Β.Μ) και κατά συνέπεια οδηγούνται σε Προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο, δηλ. ΑΠΟΠΤΩΣΗ

ΒΙΝΤΕΟ ΠΟΥ ΕΠΕΞΗΓΕΙ ΤΗΝ ΕΝΝΟΙΑ ANOIKIS

ANOIKIS KAI ΟΓΚΟΓΟΝΙΔΙΑ ΣΤΑΔΙΟ 1Ο ANOIKIS KAI ΟΓΚΟΓΟΝΙΔΙΑ

ΕΛΕΓΧΟΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΩΝ ΕΠΙΠΕΔΩΝ ATP ΠΡΟΣΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΑΙ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΒΗΜΑ 1Ο ATPlite ASSAY ΕΛΕΓΧΟΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΩΝ ΕΠΙΠΕΔΩΝ ATP MCF-10A ΚΥΤΤΑΡΑ ΠΡΟΣΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΑΙ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ

ATPlite ASSAY

ΣΗΜΑΝΤΙΚΗ ΜΕΙΩΣΗ ATP ΣΕ ΚΥΤΤΑΡΑ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΓΙΑ 24 ΩΡΕΣ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ 1Ο ATP levels (a.u) ΣΗΜΑΝΤΙΚΗ ΜΕΙΩΣΗ ATP ΣΕ ΚΥΤΤΑΡΑ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΓΙΑ 24 ΩΡΕΣ

ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ 10 ATP ΚΥΤΤΑΡΑ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ = ΑΝΤΙΘΕΤΑ Η ΕΚΦΡΑΣΗ ΤΟΥ ERBB2 ΑΠΟΤΡΕΠΕΙ ΤΗΝ ATP ΣΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΠΟΥ ΕΧΟΥΝ ΑΠΟΚΟΛΛΗΘΕΙ ΑΠΟ ΤΗ ΒΑΣΙΚΗ ΜΕΜΒΡΑΝΗ

ΒΗΜΑ 2Ο ΑΝΟΣΟΑΠΟΤΥΠΩΣΗ WESTERN ΕΛΕΓΧΟΣ ΕΠΙΔΡΑΣΗΣ ERBB2 ΣΤΗΝ ΕΚΦΡΑΣΗ EGFR ΣΕ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ

ΑΝΟΣΟΑΠΟΤΥΠΩΣΗ WESTERN

ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ 2Ο - Α ΣΤΑΘΕΡΟΠΟΙΗΣΗ ΤΟΥ EGFR ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗ ERK1(MAPK3) ΚΑΙ ERK2 (MAPK1) ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΣΗ ΜΕΤΑΒΟΛΙΚΟΥ ΜΟΝΟΠΑΤΙΟΥ PI(3)K-AKT

ΜΟΝΟΠΑΤΙ RAS - MAPK

ΜΟΝΟΠΑΤΙ RAS- MAPK

PI(3)K-AKT ΜΟΝΟΠΑΤΙ

ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ 2Ο - Β ATP levels (a.u) Έκφραση παραλλαγών των PI(3)K και AKT επιτρέπουν τη διατήρηση υψηλών επιπέδων ATP σε αποκολλημένα κύτταρα

ΒΗΜΑ 3Ο ΕΛΕΓΧΟΣ ΕΠΙΠΕΔΩΝ ΓΛΥΚΟΖΗΣ ΣΕ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΑΙ ΜΗ ΚΥΤΤΑΡΑ AMPLEX RED GLUCOSE ASSAY ΕΛΕΓΧΟΣ ΕΠΙΠΕΔΩΝ ΓΛΥΚΟΖΗΣ ΣΕ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΑΙ ΜΗ ΚΥΤΤΑΡΑ

+ AMPLEX RED GLUCOSE ASSAY RED AMPLEX REAGENT + REACTION BUFFER peroxidase substrate ΠΙΠΕΤΑ MICROPLATE D-GLUCOSE + GLUCOSE OXIDASE D-GLUCONOLACTONE + H2O2 H2O2 + AMPLEX RED AGENT RESORUFIN red-fluorescent oxidation product

ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ 3Ο ΣΤΑ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ, ΤΟ ERBB2 ΑΠΟΤΡΕΠΕΙ ΤΗΝ GLUCOSE UPTAKE ΣΤΑ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ, ΤΟ ERBB2 ΑΠΟΤΡΕΠΕΙ ΤΗΝ ΠΤΩΣΗ ΤΗΣ ΠΡΟΣΛΗΨΗΣ ΓΛΥΚΟΖΗΣ

ΔΙΑΣΩΣΗ ΚΥΤΤΑΡΟΥ – ΔΙΑΤΗΡΗΣΗ ATP ΓΕΝΙΚΟ ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ ERBB2 ΣΤΑΘΕΡΟΠΟΙΗΣΗ EGFR ΕRBB2 ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗ ΜΕΤΑΒΟΛΙΚΩΝ ΜΟΝΟΠΑΤΙΩΝ ERBB2 ΑΠΟΚΑΤΑΣΤΑΣΗ ΕΙΣΟΔΟΥ ΓΛΥΚΟΖΗΣ ΔΙΑΣΩΣΗ ΚΥΤΤΑΡΟΥ – ΔΙΑΤΗΡΗΣΗ ATP

ANOIKIS KAI ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΑ

? ΒΗΜΑ 1Ο ΤΑ ΕΠΙΠΕΔΑ ROS ΕΠΗΡΕΑΖΟΝΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗΝ ΑΠΟΚΟΛΛΗΣΗ ΤΟΥ ΚΥΤΤΑΡΟΥ ΑΠΟ ΤΗ ΒΑΣΙΚΗ ΜΕΜΒΡΑΝΗ ? ΜΕΤΡΗΣΗ ΕΠΙΠΕΔΩΝ ROS ΣΕ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΑΙ ΜΗ ΚΥΤΤΑΡΑ

ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ 1Ο ΤΟ ERBB2 ΑΠΟΤΡΕΠΕΙ ΤΗΝ ΑΥΞΗΣΗ ΤΩΝ ΕΠΙΠΕΔΩΝ ROS LEVELS (a.u) BCL2 ATTACHED DETACHED ΤΟ ERBB2 ΑΠΟΤΡΕΠΕΙ ΤΗΝ ΑΥΞΗΣΗ ΤΩΝ ΕΠΙΠΕΔΩΝ ROS ΣΤΑ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ

ΒΗΜΑ 2Ο ΔΡΑΣΗ DHEA ΚΑΙ 6AN ΜΕΣΩ ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗΣ ΤΟΥ ΔΡΟΜΟΥ ΕΙΝΑΙ ΓΝΩΣΤΟ ΠΩΣ ΤΑ ΕΠΙΠΕΔΑ ROS ΜΠΟΡΟΥΝ ΝΑ ΜΕΙΩΘΟΥΝ ΜΕΣΩ ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗΣ ΤΟΥ ΔΡΟΜΟΥ ΤΩΝ ΦΩΣΦΟΡΙΚΩΝ ΠΕΝΤΟΖΩΝ (Δ.Φ.Π) ΔΡΑΣΗ DHEA ΚΑΙ 6AN ΕΛΕΓΧΟΥΜΕ ΤΗΝ ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΤΟΥ Δ.Φ.Π ΣΤΑ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ

ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ 2Ο Η ΔΡΑΣΗ ΑΝΑΣΤΟΛΕΩΝ ΤΟΥ Δ.Φ.Π. ΕΜΠΟΔΙΖΕΙ ATP LEVELS (a.u) Η ΔΡΑΣΗ ΑΝΑΣΤΟΛΕΩΝ ΤΟΥ Δ.Φ.Π. ΕΜΠΟΔΙΖΕΙ ΤΟ ERBB2 ΝΑ ΔΙΑΤΗΡΗΣΕΙ ΤΑ ΕΠΙΠΕΔΑ ATP

ΓΕΝΙΚΟ ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ ROS ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΣΗ Δ.Φ.Π ERBB2 ΔΙΑΤΗΡΗΣΗ ATP ΕΠΙΒΙΩΣΗ ΚΥΤΤΑΡΟΥ

ΤΑ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΑ ΟΔΗΓΟΥΝ ΣΕ ΥΨΗΛΑ ΕΠΙΠΕΔΑ ATP ΣΕ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΕΠΙΠΛΕΟΝ ΕΛΕΓΧΟΙ ATP LEVELS (a.u) ΤΑ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΑ ΟΔΗΓΟΥΝ ΣΕ ΥΨΗΛΑ ΕΠΙΠΕΔΑ ATP ΣΕ ΑΠΟΚΟΛΛΗΜΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ

ΕΠΙΠΛΕΟΝ ΕΛΕΓΧΟΙ ΕΙΝΑΙ ΓΝΩΣΤΟ ΟΤΙ ΤΑ ΚΑΡΚΙΝΙΚΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΔΙΑΤΗΡΟΥΝ ΤΟ ATP ΤΟΥΣ ΜΕΣΩ ΤΗΣ ΟΞΕΙΔΩΣΗΣ ΛΙΠΑΡΩΝ ΟΞΕΩΝ CO2 Counts ΤΑ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΑ ΑΥΞΑΝΟΥΝ ΤΩΝ ΑΡΙΘΜΟ ΤΩΝ ΟΞΕΙΔΩΣΕΩΝ ΛΙΠΑΡΩΝ ΟΞΕΩΝ ΚΑΙ ΕΤΣΙ ΤΟ ΚΥΤΤΑΡΟ ΤΡΟΦΟΔΟΤΕΙΤΑΙ ΜΕ ATP

ΓΙΑ ΤΟΥ ΛΟΓΟΥ ΤΟ ΑΛΗΘΕΣ… ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΟ ΔΥΟ ΦΩΤΟΝΙΩΝ

ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΟ ΔΥΟ ΦΩΤΟΝΙΩΝ

ΣΩΤΗΡΙΑ ΑΠΟ ΤΗ ΜΟΙΡΑ ΤΟΥ ANOIKIS ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ ERBB2 (EGFR + ΜΕΤΑΒ.ΜΟΝΟΠ.) ATP ΔΙΑΣΩΣΗ ΚΥΤΤΑΡΟΥ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΑ (ΜΕΙΩΣΗ ROS + Δ.Φ.Π) FAO ATP ΔΙΑΣΩΣΗ ΚΥΤΤΑΡΟΥ ΣΩΤΗΡΙΑ ΑΠΟ ΤΗ ΜΟΙΡΑ ΤΟΥ ANOIKIS

ANOIKIS ΚΑΙ ΚΑΡΚΙΝΟΣ

ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΑΔΥΝΑΜΙΑ ΠΡΟΣΛΗΨΗΣ ΓΛΥΚΟΖΗΣ ΑΥΞΗΣΗ ROS ΑΣΙΤΙΑ – ΑΠΟΚΟΛΛΗΣΗ Β.Μ (ANOIKIS) ΑΔΥΝΑΜΙΑ ΠΡΟΣΛΗΨΗΣ ΓΛΥΚΟΖΗΣ ΑΥΞΗΣΗ ROS ΑΣΙΤΙΑ – ΕΛΛΕΙΨΗ ATP ΟΞΕΙΔΩΤΙΚΟ ΣΤΡΕΣ ΑΠΟΠΤΩΣΗ

ΚΑΡΚΙΝΙΚΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΠΑΘΟΛΟΓΙΚΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΥΠΕΡΕΚΦΡΑΣΗ ΑΠΟΚΟΛΛΗΣΗ Β.Μ ERBB2 ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗ PI(3)K/AKT RAS-MAPK ΜΟΝΟΠΑΤΙΩΝ ΠΡΟΣΛΗΨΗ ΓΛΥΚΟΖΗΣ ΜΕΤΑΣΤΑΣΗ ΕΠΙΒΙΩΣΗ

BINTEO ΠΟΥ ΠΑΡΟΥΣΙΑΖΕΙ ΤΩΝ ΚΑΡΚΙΝΙΚΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΤΟ ΜΟΝΤΕΛΟ ΔΡΑΣΗΣ ΤΩΝ ΚΑΡΚΙΝΙΚΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ

ΕΡΩΤΗΜΑΤΑ ΠΟΥ ΑΝΑΚΥΠΤΟΥΝ ΔΙΤΤΗ ΕΙΝΑΙ ΣΩΣΤΟ ΝΑ ΧΟΡΗΓΟΥΜΕ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΑ ΓΙΑ ΤΗΝ ΚΑΤΑΠΟΛΕΜΗΣΗ ΤΟΥ ΚΑΡΚΙΝΟΥ ? ΔΡΑΣΗ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΩΝ ΔΙΤΤΗ ΚΑΤΑΠΟΛΕΜΗΣΗ ΚΑΡΚΙΝΟΓΕΝΕΣΗΣ ΟΧΙ ΟΞΕΙΔΩΤΙΚΗ ΚΑΤΑΣΤΡΟΦΗ DNA ΠΡΟΑΓΩΓΗ ΚΑΡΚΙΝΟΓΕΝΕΣΗΣ ΕΠΙΒΙΩΣΗ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΜΕ ΔΙΑΤΑΡ. ΜΕΤΑΒΟΛΙΣΜΟ

ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ Schafer Z., Grassian A., et al. “Antioxidant and Oncogene Rescue of Metabolic Defects caused by Loss of Matrix Attachement”. Nature 3 Sep. 2009: 109-113 Berg J., Tymoczko J. and Lubert Stryer. Biochemistry, 5th Edition. New York: W.H. Freeman & Co., 2002 Lodish, Berk et al. Molecular Cell Biology, 5th Edition. New York: W.H. Freeman & CO., 2003 http://www.copewithcytokines.de/cope.cgi?key=Anoikis http://www.invitrogen.com http://www.perkinelmer.com http://www.youtube.com/watch?v=qjjHKDn12qI http://www.youtube.com/watch?v=Xwb2CFEjMcM&feature=related

ΕΥΧΑΡΙΣΤΩ