The Role of real-time PCR in the CBRN Environment Palaiodimos L., Schinas A., Fourka S., Anastasilakis C., Vorres A., Kakabouras E. Joint CBRN Defense Company Hellenic National Defense General Staff Presented at the 23 rd Polythematic Medical Symposium of Hellenic Armed Forces Feb 2014, Air Force General Hospital, Athens

The Role of real-time PCR in the CBRN Environment Palaiodimos L., Schinas A., Fourka S., Anastasilakis C., Vorres A., Kakabouras E. Joint CBRN Defense Company, Hellenic National Defense General Staff • Polymerase Chain Reaction (PCR) is a laboratory technique of molecular biology used to amplify a particular DNA sequence. • PCR allows the identification of the genetic footprint of organisms including those that could be used as Biological Warfare Agents (BWA).

The Role of real-time PCR in the CBRN Environment Palaiodimos L., Schinas A., Fourka S., Anastasilakis C., Vorres A., Kakabouras E. Joint CBRN Defense Company, Hellenic National Defense General Staff • In conventional PCR, the product of DNA amplification is detected at the end of the reaction. • The key feature of real-time PCR is that the amplified DNA is detected as the reaction progresses in “real time” providing results much earlier. (Invitski et al, 2003)

The Role of real-time PCR in the CBRN Environment Palaiodimos L., Schinas A., Fourka S., Anastasilakis C., Vorres A., Kakabouras E. Joint CBRN Defense Company, Hellenic National Defense General Staff The rapid detection of Biological Warfare Agents (BWAs) is crucial in order to proceed with: • The necessary measures to eliminate the contamination • The appropriate therapeutic interventions Real-time PCR is a rapid technique of simultaneous molecular identification of various BWAs with satisfactory sensitivity and specificity. (Peruski et al, 2003) Hellenic Armed Forces operate the R.A.P.I.D. (Ruggedized Advanced Pathogen Identification Device), which is a portable BWA detection system based on real-time PCR appropriate for use at the CBRN warm zone. Currently JCBRNDC is in the process of acquiring new bio-detection technologies in order to enhance its field capabilities

The Role of real-time PCR in the CBRN Environment Palaiodimos L., Schinas A., Fourka S., Anastasilakis C., Vorres A., Kakabouras E. Joint CBRN Defense Company, Hellenic National Defense General Staff R.A.P.I.D. advantages are: • User friendliness: simple mix of specimen and water, user friendly software • Portability: small size and low weight • Compatibility: supported by any portable computer operating Windows XP software • High Speed: capability of analyzing 16 specimens within a few hours • High sensitivity and specificity comparable to other similar devices (Christensen D. et al, 2006)

The Role of real-time PCR in the CBRN Environment Palaiodimos L., Schinas A., Fourka S., Anastasilakis C., Vorres A., Kakabouras E. Joint CBRN Defense Company, Hellenic National Defense General Staff Biological Warfare Agents Detected by R.A.P.I.D. Bacillus AnthracisCambylobacter Francisella TularensisCryptosporidium SmallpoxEbola Virus Yersinia PestisBrucella ListeriaAvian Influenza Virus E. Coli O157Clostridium Botulinum SalmonellaMarburg Virus References 1) Nucleic acid approaches for detection and identification of biological warfare and infectious disease agents. Ivnitski et al, BioTechniques 35: (October 2003) 2) Rapid diagnostic assays in the genomic biology era: detection and identification of infectious disease and biological weapon agents. Peruski et al, BioTechniques 35: (October 2003) 3) Detection of Biological Threat Agents by Real-Time PCR: Comparison of Assay Performance on the R.A.P.I.D., the LightCycler, and the Smart Cycler Platforms, Christensen et al, Clin Chem 2006 Jan;52(1):141-5

ΟΙ ΧΗΜΙΚΕΣ ΠΟΛΕΜΙΚΕΣ ΟΥΣΙΕΣ ΚΑΙ Η ΠΡΟΚΛΗΣΗ ΓΙΑ ΤΙΣ ΥΓΕΙΟΝΟΜΙΚΕΣ ΥΠΟΔΟΜΕΣ Λ. Παλαιοδήμος, Α. Σχοινάς, Ι. Γαλατάς* Ειδικός Διακλαδικός Λόχος ΠΒΧ (Πυρηνικής-Βιολογικής-Χημικής) Άμυνας, ΓΕΕΘΑ *Τξχος-Ιατρός (εα) – Εκδότης «CBRNE-Terrorism Newsletter» ΣΚΟΠΟΣ: Η ανάδειξη της σημασίας που έχει η ύπαρξη υγειονομικών υποδομών και κατάλληλα εκπαιδευμένου προσωπικού για την αντιμετώπιση μαζικών απωλειών υγείας μετά από χρήση χημικών όπλων στην παρούσα εύθραυστη διεθνή γεωπολιτική συγκυρία. ΥΛΙΚΟ: Ανασκόπηση σχετικής βιβλιογραφίας και εμπειρία Μονάδας. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ: Οι καταστρεπτικές συνέπειες από τη χρήση χημικών πολεμικών ουσιών είναι γνωστές από τις αρχές του 20 ου αιώνα. Η χρήση τους στον 1οΠΠ, η επίθεση με σαρίν στο μετρό του Τόκυο (1995) και η τρέχουσα υπόθεση των χημικών όπλων της Συρίας υπογραμμίζει τις καταστρεπτικές συνέπειες των εν λόγω παραγόντων. Η πλειονότητα των επαγγελματιών υγείας πρωτοβάθμιας περίθαλψης δεν έχει ιδιαίτερη γνώση για τον τρόπο χειρισμού παρόμοιων κρίσεων. Πολλά μπορούν να δρομολογηθούν σε επίπεδο εκπαίδευσης ώστε να εξοικειωθεί το προσωπικό των υγειονομικών υποδομών με διαδικασίες αυτοπροστασίας, διαλογής, παροχής πρώτων βοηθειών, χρήσης αντιδότων και μαζικής/ατομικής απολύμανσης από τοξικούς παράγοντες. Η εμπειρία από τις εκπαιδευτικές προσομοιώσεις σε ελληνικό έδαφος, από περιστατικά χρήσης χημικών ουσιών για πολεμικούς-τρομοκρατικούς σκοπούς σε διεθνές επίπεδο και ακούσιας έκθεσης του πληθυσμού μετά από βιομηχανικά ατυχήματα μεγάλης έκτασης δείχνουν ότι απαιτείται συνεχής εκπαίδευση, κατάλληλος εξοπλισμός και εγρήγορση. ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ: Οι χημικές πολεμικές ουσίες και η χρήση τους για πολεμικό-τρομοκρατικό σκοπό ή η διαρροή τους μετά από βιομηχανικό ατύχημα αποτελούν μία διαρκή πρόκληση για κάθε σύστημα υγείας. Η συνεχής εκπαίδευση του προσωπικού και η ετοιμότητα των υγειονομικών υποδομών μπορεί να σώσουν ζωές. Το αναπάντεχο πάντα συμβαίνει! CWAs – A challenge to health infrastructure Palaiodimos L, Schinas A, Galatas I* Joint CBRN Defense Company, HNDGS; * CBRNE-Terrorism Newsletter Presented at the 40 th Pan-Hellenic Medical Congress (14-17 May 2014) CWAs – A challenge to health infrastructure Palaiodimos L, Schinas A, Galatas I* Joint CBRN Defense Company, HNDGS; * CBRNE-Terrorism Newsletter Presented at the 40 th Pan-Hellenic Medical Congress (14-17 May 2014)