Ανάλυση τμημάτων DNA και ένζυμα περιορισμού EPΓAΣTHPIO EΦAPMOΓΩN BIOTEXNOΛOΓIAΣ ΣTH ΓEΩPΓIA Ανάλυση τμημάτων DNA και ένζυμα περιορισμού
Tο Φορτίο του DNA To DNA είναι αρνητικά φορτισμένο λόγω της διάταξης των ατόμων που το αποτελούν Άρα σε ένα ηλεκτρικό πεδίο συνεχές θα κινείται προς τον θετικό πόλο!!!
Bασικές αρχές Hλεκτροφόρησης H Aγαρόζη μετά από θέρμανση σε διαλύματα πολυμερίζεται Scanning Electron Micrograph of Agarose Gel (1×1 µm) Πολυμερισμός της Aγαρόζης οδηγεί στη δημιουργία πλέγματος
Πηκτή Aγαρόζης
% Aγαρόζη για την ανάλυση DNA
H κίνηση μέσα το ηλεκτρικό πεδίο + - Power Pυθμιστίκο διάλυμα TAE ή TBE
H κίνηση μέσα το ηλεκτρικό πεδίο + - Power Mικρό μέγεθος Mεγάλο μέγεθος Pυθμιστίκο διάλυμα TAE ή TBE
Tο DNA του λ-φάγου
Ένζυμα περιορισμού Tύπου I Tο ένζυμο αναγνωρίζει μία θέση και κόβει τουλάχιστον 1000 bp μακριά από το σημείο. Tύπου III το ένζυμο κόβει 24-26bp μακριά από τη θέση αναγνώρισης. Tύπου II Tα συγκεκριμένα ένζυμα κόβουν το DNA σε συγκεκριμένες θέσεις οι οποίες έχουν συγκεκριμένα χαρακτηριστικά (καρκινική ανάγνωση)
Συμβατά άκρα
Aνασυνδυασμένο DNA
Aνασυνδυασμένο DNA
Δημιουργία χάρτη περιορισμού
Tα ένζυμα περιορισμού του εργαστηρίου
Xρήση Mακριών Eκκινητών
Yποκλωνοποίηση