Utjecaj matrice u kvantitativnoj analizi ostataka aktivnih tvari pesticida u hrani GC-MS/MS-om dr.sc. Mateja Bulaić, Jasna Jakovljević, dipl.ing., Marija Kovač, mag.ing., univ.spec. Edita Čupurdija Izazovi u analizi hrane i ambalaže 06.03.2019., Zagreb

PESTICIDI Danas je teško zamisliti proizvodnju bez upotrebe pesticida lakši uzgoj, bolji prinosi štetnost za zdravlje ljudi i okoliš

Nekoliko tisuća zaštitnih sredstava na tržištu. PESTICIDI Nekoliko tisuća zaštitnih sredstava na tržištu. Kako ih kontrolirati?

KONTROLA REZIDUA PESTICIDA Zahtjevi metode: Veliki broj parametara (500+) Visoka osjetljivost Kratko vrijeme analize Pouzdanost rezultata Kromatografske tehnike (plinska i tekućinska) spregnute s masenim detektorima – MRM metode

KONTROLA REZIDUA PESTICIDA EKSTRAKCIJA GC-MS/MS HOMOGENIZACIJA PROČIŠĆAVANJE Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, Safe QUECHERS • HRN EN 15662:2008

KONTROLA REZIDUA PESTICIDA liner kapilarna kolona aktivno mjesto (siloksani i nataloženi teško hlapivi spojevi) matrica analit (interakcija s aktivnim mjestima)

KONTROLA REZIDUA PESTICIDA POJAČAVANJE signala Efekt matrice (%ME) SUPRESIJA signala

Kalibracija u matrici %ME= [ nagib (matrica) nagib (ACN) ] -1*100% 105,7% %ME= [ nagib (matrica) nagib (ACN) ] -1*100%

KONTROLA REZIDUA PESTICIDA Kompenziranje fenomena: Temeljit clean-up Interni standard Standardna adicija Protektanti Kalibracija u matrici

Kalibracija u matrici Korištenje ekstrakta uzorka (matrice) umjesto otapala Moguće je koristiti svaki prethodno analiziran uzorak iz iste kategorije proizvoda za koji je analizom pokazano da su koncentracije analita ispod granice detekcije U slučaju da više uzoraka u „batch”-u pripada istoj grupi proizvoda (npr. visok sadržaj vode), moguće je pomiješati ekstrakte matrica (SANTE/11813/2017, str.6, C23)

Kalibracija u matrici Razlike u izgledu pikova – matrica mrkva/ACN niži odziv

Kalibracija u matrici Razlike u izgledu pikova – matrica mrkva/ACN niži odziv „tailing”

Kalibracija u matrici Klorfenprop metil Metakrifos Tiometon Area: 21546 Area: 60337

Kalibracija u matrici – razlike u nagibu pravca HCH β (mrkva) HCH β (brašno) HCH β (biljno ulje) 49,7% 76,7% 34,7%

Kalibracija u matrici – razlike u nagibu pravca Kloroneb (mrkva) Kloroneb (biljno ulje) Kloroneb (brašno) 116,3% 107,6% 54,4%

Kalibracija u matrici – razlike u nagibu pravca Metoksiklor (mrkva) Metoksiklor (brašno) Metoksiklor (biljno ulje) 321,3% 323,9% 114,4%

Kalibracija u matrici – razlike u nagibu pravca HCH β (5g i 2g i ACN 5g) Chloroneb (5g i 2g i ACN 5g) Metoksiklor (5g i 2g i ACN 5g)

Kalibracija u matrici – ME% Parametar Linearnost u ACN R2 u ACN Linearnost u otopini matrice (mrkva) R2 u otopini matrice Utjecaj matrice izražen postotkom (%) p,p-DDT Y=8,27*103X-9,47*103 0,990 Y=1,79*104X-5,38*104 0,999 116 Cihalotrin-R Y=9,79*103X-8,39*103 0,992 Y=2,87*104X-6,57*103 0,998 193 Diazinon Y=5,85*103X-9.47*103 Y=1,68*104X-4,70*103 187 Klorprofam Y=6,96*103X-9.47*103 0,991 Y=1,30*104X-1,18*104 0,993 122 α-Endosulfan Y=6,09*102X-1,95*103 Y=4,45*103X+9,30*102 230 Fenitrotion Y=1,43*103X-1,02*104 Y=8,43*103X-3,68*103 0,996 489 α-HCH Y=3,15*103X-1,56*104 Y=1,33*104X-6,57*103 0,997 322 ɣ-HCH Y=7,04*103X-2,48*104 0,994 Y=1,48*104X-5,22*103 0.998 110 Heksaklorbenzen Y=5,96*103X-3,74*103 Y=1,22*104X-1,43*103 105 Paration-metil Y=6,82*103X-5,26*104 Y=1,45*104X-1,05*104 113 Pirimifos-metil Y=2,36*103X-9,20*103 Y=6,30*103X-2,65*102 167 Permetrin cis Y=8,70*103X-4,17*103 Y=1,45*104X-9,49*103 67 Permetrin trans Y=5,58*103X-2,51*103 Y=1,41*104X+2,03*103 153 Procimidon Y=2,85*103X-8,34*104 Y=4,46*104X+5,38*104 156 Vinklozolin Y=1,31*103X-8,36*102 Y=2,29*103X-5,38*102 75

Kalibracija u matrici – ME% Parametar Linearnost u ACN R2 u ACN Linearnostu otopini matrice (žitarice i proizvodi od žitarica) R2 u otopini matrice Utjecaj matrice izražen postotkom (%) p,p-DDT Y=8,27*103X-9,47*103 0,990 Y=1,14*104X-1,37*104 0,999 38 Cihalotrin-R Y=9,79*103X-8,39*103 0,992 Y=2,86*103X-4,54*103 0,997 192 Diazinon Y=5,85*103X-9.47*103 Y=5,56*103X-1,84*104 0,993 5 Klorprofam Y=6,96*103X-9.47*103 0,991 Y=6,86*103X-1,96*104 2 α-Endosulfan Y=6,09*102X-1,95*103 Y=8,61*102X-3,06*103 41 Fenitrotion Y=1,43*103X-1,02*104 Y=2,47*103X-6,22*103 0,995 73 α-HCH Y=3,15*103X-1,56*104 Y=3,95*103X-4,72*103 25 ɣ-HCH Y=7,04*103X-2,48*104 0,994 Y=4,98*103X-5,72*103 0.998 -30 Heksaklorbenzen Y=5,96*103X-3,74*103 Y=4,01*103X-5,64*103 0,996 -33 Paration-metil Y=6,82*103X-5,26*104 Y=8,42*103X-2,32*104 23 Pirimifos-metil Y=2,36*103X-9,20*103 Y=2,34*103X-8,50*103 10 Permetrin cis Y=8,70*103X-4,17*103 Y=3,87*103X-9,72*103 -56 Permetrin trans Y=5,58*103X-2,51*103 Y=3,10*103X-8,26*103 -45 Procimidon Y=2,85*103X-8,34*104 Y=2,26*104X-3,32*104 0,998 69 Vinklozolin Y=1,31*103X-8,36*102 Y=9,45*102X-9,42*102 -28

Kalibracija u matrici – ME% Parametar Linearnost u ACN R2u ACN  Linearnost u otopini matrice (čaj) R2 u otopini matrice Utjecaj matrice izražena postotkom (%) p,p-DDT Y=8,27*103X-9,47*103 0,990 Y=3,22*104X+1,37*103 0,999 289 Cihalotrin-R Y=9,79*103X-8,39*103 0,992 Y=1,78*104X+1,28*105 82 Diazinon Y=5,85*103X-9.47*103 Y=4,06*103X+4,30*103 0,991 -59 Klorprofam Y=6,96*103X-9.47*103 Y=1,64*104X+1,47*104 0,996 136 α-Endosulfan Y=6,09*102X-1,95*103 Y=1,12*103X-4,91*102 259 Fenitrotion Y=1,43*103X-1,02*104 Y=8,65*103X+3,49*103 505 α-HCH Y=3,15*103X-1,56*104 Y=7,88*103X+6,54*103 150 ɣ-HCH Y=7,04*103X-2,48*104 0,994 Y=1,06*104X+6,85*103 0.994 51 Heksaklorbenzen Y=5,96*103X-3,74*103 Y=9,53*103X-2,17*102 60 Paration-metil Y=6,82*103X-5,26*104 Y=1,53*104X+2,44*104 124 Pirimifos-metil Y=2,36*103X-9,20*103 Y=4,21*103X-3,17*102 78 Permetrin cis Y=8,70*103X-4,17*103 Y=9,39*103X+1,24*104 9 Permetrin trans Y=5,58*103X-2,51*103 Y=1,02*104X-1,63*104 83 Procimidon Y=2,85*103X-8,34*104 Y=3,73*104X+4,73*105 128 Vinklozolin Y=1,31*103X-8,36*102 Y=2,40*103X+1,87*103

Kalibracija u matrici

Kalibracija u matrici Prednosti Kalibracija u matrici ispravlja njen utjecaj pri kvantifikaciji analita Snažan alat za kvalitetu i pouzdanost rezultata Nedostaci Priprema kalibranata zahtijeva više vremena Onečišćenje uređaja Pronalazak „blank” uzoraka za pripremu kalibranata Osigurati matricu odgovarajuće grupe proizvoda

Hvala na pažnji!

Hvala na pažnji!