Άσκηση 11 Κυτταρομετρία Ροής

Slides:



Advertisements
Παρόμοιες παρουσιάσεις
ΦΑΣΜΑΤΟΦΩΤΟΜΕΤΡΙΑ Προσδιορισμος της σταθερας ταχυτητας αντΙδρασης οξεΙδωσης ιωδιοΥχων ΙΟΝΤΩΝ απΟ υπεροξεΙδιο του υδρογΟνου.
Advertisements

2ο ΛΥΚΕΙΟ ΑΓΙΑΣ ΒΑΡΒΑΡΑΣ
Ο Ρόλος της Κυτταρομετρίας Ροής
Φυσική Γ Λυκείυ Γενικής Παιδείας - Το Φώς - Η Φύση του Φωτός
ΘΕΡΜΟΦΩΤΑΥΓΕΙΑ ΚΑΙ ΕΦΑΡΜΟΓΕΣ ΣΕΜΦΕ ΣΕΜΙΝΑΡΙΑ ΦΥΣΙΚΗΣ 2003
ΚΥΚΛΙΚΟΣ ΔΙΧΡΩΙΣΜΟΣ
Εργαστήριο Φυσικής Χημείας | Τμήμα Φαρμακευτικής Δημήτριος Τσιπλακίδης
Φασματοσκοπία με Φθορισμό των Ακτίνων Χ (XRF)
Μηχανισμοί ειδικής άμυνας
ΚΥΤΤΑΡΟΜΕΤΡΙΑ ΡΟΗΣ FLOW CYTOMETRY
Μικροσκόπιο σκοτεινού πεδίου
Το πρότυπο του Bohr για το υδρογόνο
Φωτεινές πηγές - λαμπτήρες
Η θεωρία των χρωμάτων. η θεωρία των χρωμάτων.
ΕΘΝΙΚΟ ΚΑΙ ΚΑΠΟΔΙΣΤΡΙΑΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ ΣΧΟΛΗ ΘΕΤΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ – ΤΜΗΜΑ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ Αλίνα Πανταζή Αθήνα 2004 ΜΕΛΕΤΗ ΤΩΝ ΦΥΣΙΚΩΝ ΦΟΝΙΚΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΚΑΤΑ.
Επιμέλεια: Δρακοπούλου Ευαγγελία Αριθμός Μητρώου:
ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΑ Εργασία του φοιτητή Ιατρικής Α.Π.Θ. Καραβασίλη Χρήστου
Μηχανισμοί ειδικής άμυνας Ανοσία
Τι είναι η κυτταρομετρία ροής
ΜΕΤΑΛΛΕΥΤΙΚΗ ΝΟΜΟΘΕΣΙΑ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΚΑΙ ΑΞΙΟΠΟΙΗΣΗ ΜΕΤΑΛΛΕΥΜΑΤΩΝ Τζίμας Σπύρος Μηχανικός Μεταλλείων – Μεταλλουργός ΕΜΠ.
ΣΥΣΤΑΣΗ - ΣΥΓΚΡΟΤΗΣΗ ΑΥΤΟΔΙΟΙΚΗΣΗΣ ΚΑΙ ΑΠΟΚΕΝΤΡΩΜΕΝΗΣ ΔΙΟΙΚΗΣΗΣ Οι δήμοι και οι περιφέρειες συγκροτούν τον πρώτο και δεύτερο βαθμό τοπικής αυτοδιοίκησης.
OΠΤΙΚΑ (ΦΩΤΟΝΙΚΑ) ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΑ. ΓΕΝΙΚΕΣ ΑΡΧΕΣ. Ως οπτικά ή φωτονικά αναφέρονται τα μικροσκόπια εκείνα που χρησιμοποιούν το τμήμα του ηλεκτρομαγνητικού φάσματος.
ΥΠΟΔΟΧΕΑΣ ΤΩΝ Τ ΛΕΜΦΟΚΥΤΤΑΡΩΝ I.Εισαγωγικά στοιχεία II.Δομή του TCR III.Οργάνωση των γονιδίων του TCR IV.Το σύμπλεγμα του TCR (TCR-CD3) V.Συνυποδοχείς.
ΑΝΟΣΟΛΟΓΙΑ 24, 25, 26 / 10 & Ρ. Τσιτσιλώνη ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗ ΚΑΙ ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ Τ ΚΥΤΤΑΡΩΝ – Τ ΚΥΤΤΑΡΑ ΜΝΗΜΗΣ I.Στάδια ενεργοποίησης των Τ κυττάρων.
ΤΜΗΜΑ ΔΙΟΙΚΗΣΗΣ ΣΥΣΤΗΜΑΤΩΝ ΕΦΟΔΙΑΣΜΟΥ ΑΡΧΕΣ ΛΟΓΙΣΤΙΚΗΣ ΚΑΘΗΓΗΤΗΣ: Δρ ΠΑΝΑΓΙΩΤΗΣ ΚΩΤΣΙΟΣ ΑΚΑΔΗΜΑΪΚΟ ΕΤΟΣ 2015/2016.
ΤΑΞΙΝΟΜΗΣΗ ΜΕΘΟΔΩΝ ΧΗΜΙΚΗΣ ΑΝΑΛΥΣΗΣ Σκοπός της χημικής ανάλυσης είναι αρχικά η ποιοτική ανίχνευση των συστατικών ενός δείγματος και στη συνέχεια η ποσοτική.
Ενόργανη Χημική Ανάλυση (Θ) Ενότητα 7: Ατομική Φασματοσκοπία: Φλογοφωτομετρία Δρ. Αρχοντούλα Χατζηλαζάρου, Αναπληρώτρια Καθηγήτρια Ενόργανης Ανάλυσης και.
Κάθετες και πλάγιες. Κάθετα και πλάγια τμήματα Έστω ευθεία ε και σημείο Α εκτός αυτής. ε Κ Β Α Από το Α διέρχεται μοναδική κάθετη. Έστω ζ μια άλλη ευθεία.
Φασματοσκοπία NIR (Νear InraRed). Τι είναι NIR ; Tεχνολογία που έχει πολλές εφαρμογές στη γεωργία. Το εγγύς υπέρυθρο είναι ένα μικρό μέρος του φάσματος.
Πυροχημική ανίχνευση μετάλλων
OΠΤΙΚΑ (ΦΩΤΟΝΙΚΑ) ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΑ. ΓΕΝΙΚΕΣ ΑΡΧΕΣ.
ΤΟ ΝΕΟ ΓΥΜΝΑΣΙΟ ΠΔ 126/2016.
Φωτοσύνθεση Συμβαίνει στους αυτότροφους οργανισμούς
Απομόνωση και Tαυτοποίηση Κυττάρων του Ανοσοποιητικού Συστήματος
ΤΗΣ ΣΧΟΛΙΚΗΣ ΚΟΙΝΟΤΗΤΑΣ ΓΙΑ ΟΡΘΟΛΟΓΙΚΗ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗ ΔΙΑΤΡΟΦΙΚΩΝ ΕΠΙΛΟΓΩΝ
Προφύλαξη και Αντιμετώπιση
ΣΥΝΕΣΤΙΑΚΗ ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΑ
ΑΝΑΛΥΣΗ ΤΟΥ ΦΩΤΟΣ ΜΕ ΠΡΙΣΜΑ
Ανάλυση ενδοκυτταρικών
Απομόνωση και ταυτοποίηση
ΚΥΤΤΑΡΟΜΕΣΟΛΑΒΗΤΙΚΗ ΑΝΟΣΙΑ
Άσκηση 11 Κυτταρομετρία Ροής
Πότε και Πού κατασκευάστηκε το πρώτο ατομικό ρολόι ;
Απομόνωση και ταυτοποίηση
Μέθοδοι ενόργανης ανάλυσης
Απομόνωση και ταυτοποίηση A. Φωτεινοπούλου, Α. Μαρμάρη
ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ Τ ΚΥΤΤΑΡΩΝ –
Απομόνωση και ταυτοποίηση Ρ. Τσιτσιλώνη, Π. Παπαζαφείρη
Απομόνωση και Tαυτοποίηση Κυττάρων του Ανοσοποιητικού Συστήματος
ΩΡΙΜΑΝΣΗ ΤΩΝ Τ ΚΥΤΤΑΡΩΝ
Άσκηση 11 Κυτταρομετρία Ροής
Απομόνωση και ταυτοποίηση Ανοσοσφαιρινών
Αντιδράσεις κατακρήμνισης Ανοσοδιάχυση (άσκηση 5) Ag: ορός ανθρώπου
ΥΠΟΔΟΧΕΑΣ ΤΩΝ Τ ΛΕΜΦΟΚΥΤΤΑΡΩΝ
Τα παιχνίδια του φωτός (2)
ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ Τ ΚΥΤΤΑΡΩΝ –
Άσκηση 11 Κυτταρομετρία Ροής
Σύνθεση ηλιακού φωτός Το λευκό φως, η πιο σωστά το σχεδόν λευκό φως, περιέχει μια συνεχή κατανομή από διάφορα μήκη κύματος. Αντιστοιχεί όπως λέμε σε ακτινοβολία.
Kλυτία, η νύμφη που έγινε ηλιοτρόπιο
ΑΜΕΣΗ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΥ ΣΗΜΑΤΟΣ
ΦΥΣΗ ΤΟΥ ΦΩΤΟΣ.
Φασματοσκοπικές μέθοδοι Φασματοφωτομετρία ορατού-UV
Απομόνωση και ταυτοποίηση Ανοσοσφαιρινών
Άσκηση 11 Κυτταρομετρία Ροής
Σταθερά ΚΕΣΠΕΜ Κομοτηνής Εκπαιδευτικός: Κυριακή Ζαφείράκη Επιστημονική Υπεύθυνη: Μαρία Ζωγραφάκη Επόπτρια: Μαρία Γραμματίκα Τάξη: Στ Αριθμός Παιδιών:
Π.Παπαζαφείρη , Α. Φωτεινοπούλου
ΩΡΙΜΑΝΣΗ ΤΩΝ Τ ΚΥΤΤΑΡΩΝ
ΑΝΟΣΟΛΟΓΙΑ 2.
ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ Τ ΚΥΤΤΑΡΩΝ
Μεταγράφημα παρουσίασης:

Άσκηση 11 Κυτταρομετρία Ροής Ρ. Τσιτσιλώνη Λ. Φωτεινοπούλου Σ. Παπαβασιλείου

Η έννοια του φθορισμού έμμεσος ανοσοφθορισμός Φθορισμός: η εκπομπή φωτός ορισμένου μήκους κύματος από ουσίες που ακτινοβολούνται με φως μικρότερου μήκους κύματος. Φθοριοχρώματα: μόρια που απορροφούν ακτινοβολία υψηλής ενέργειας, διεγείρονται, τα ηλεκτρόνιά τους μετακινούνται σε ανώτερη ενεργειακή τροχιά, επανέρχονται στην αρχική κατάσταση εκπέμποντας ακτινοβολία μεγαλύτερου μήκους κύματος από τη διεγείρουσα. άμεσος ανοσοφθορισμός έμμεσος ανοσοφθορισμός

Τα CD (cluster of differentiation) μόρια Bοηθητικό Τ λεμφοκύτταρο: CD45+ CD3+ TCR+ CD4+ NK κύτταρο: CD45+ CD3- TCR- CD16+

Το FACS του Τομέα μας (CANTO II, BD)

Η ανάλυση των δειγμάτων

Η αρχή της μεθόδου λεμφοκύτταρα σημασμένα με φθορίζοντα mAb

Σήμανση με ένα αντίσωμα ιστογράμματα

Σήμανση με δύο αντισώματα ιστογράμματα

Σήμανση με δύο αντισώματα στικτόγραμμα CD3-CD8+ CD3+CD8+ CD3-CD8- CD3+CD8-

Xρησιμοποιούμενα φθοριοχρώματα

Συνδυασμοί mAb για τον έλεγχο ρουτίνας ατόμων με HIV λοίμωξη FITC PE Χρησιμότητα 1. CD45 CD14 Καθορισμός παραθύρων (CD45+CD14-) 2. Ισότυπος IgG1 Ισότυπος ΙgG2 Τοποθέτηση δεικτών 3. CD3 CD4 μέτρηση Τ βοηθητικών λεμφοκυττάρων 4. CD3 CD8 μέτρηση Τ κυτταροτοξικών λεμφ. 5. CD3 CD16/CD56 μέτρηση NK κυττάρων 6. CD3 CD19 μέτρηση B λεμφοκυττάρων Διπλός ανοσοφθορισμός Συνδυασμοί Χρησιμότητα 1. CD3/CD4/CD45 μέτρηση Τ και Τ βοηθητικών λεμφοκυττάρων 2. CD3/CD8/CD45 μέτρηση Τ και Τ κυτταροτοξικών λεμφοκυττάρων 3. CD3/CD19/CD45 μέτρηση Τ και Β λεμφοκυττάρων 4. CD3/CD16/CD45 μέτρηση ΝΚ κυττάρων Τριπλός ανοσοφθορισμός Συνδυασμοί Χρησιμότητα 1. CD3/CD4/CD8/CD45 μέτρηση Τ, Τ βοηθητικών και Τ κυτταροτοξικών λεμφοκυττάρων 2. CD3/CD19/CD16/CD45 μέτρηση Τ, ΝΚ και Β λεμφοκυττάρων Τετραπλός ανοσοφθορισμός

βοηθητικά Τ κυτταροτοξικά Τ ΝΚ κύτταρα Β κύτταρα

Ενδοκυτταρική χρώση

Διαχωρισμός κυττάρων (sorting)

Αποτελέσματα – Υπολογισμοί Για το φυλλάδιό σας 11% 42% 31% 0% Anti-CD3-FITC Anti-CD4-PE Για το κάθε στικτόγραμμα χωριστά: Ποσοστό Τ λεμφοκυττάρων ? Ποσοστό Τh λεμφοκυττάρων ? Ποσοστό Τc λεμφοκυττάρων ? Ποσοστό ΝΚ κυττάρων ? Υποπληθυσμοί με ιδιαίτερα χαρακτηριστικά? Anti-CD56-PE Anti-CD3-FITC 11% 66% 4%