Ανίχνευση Βιολογικού σήματος με ενίσχυση: Καλλιέργεια, εμβολιασμός σε θρεπτικά υλικά, αντιβιόγραμμα Εισαγωγή στις Ασκήσεις 2 & 3 Copyright© 2007 (Ν. 2121/93), Αριστέα Βελεγράκη. Με την επιφύλαξη κάθε νομίμου δικαιώματος. Εργαστήριο Μικροβιολογίας Δ/ντρια Α. Τσελένη-Κωτσοβίλη Ακαδημαϊκό Έτος 2006-2007 Α. Βελεγράκη

Ο πολλαπλασιασμός Βακτηρίων είναι ταχύτατος . . . Α. Βελεγράκη

Α. Βελεγράκη

Εμβολιασμός υλικού για ανάπτυξη μεμονωμένων αποικιών Α. Βελεγράκη

Ευαισθησία στα αντιβιοτικά-αντιβιόγραμμα Μετά την απομόνωση των βακτηρίων από κλινικά υλικά όπως αίμα, ούρα, τραύματα, έλκη ή αποστήματα στοματικής κοιλότητας, προσδιορίζεται η ευαισθησία τους στα αντιβιοτικά. Το απομονωθέν βακτήριο κατατάσσεται ως «ευαίσθητο», «μέτρια ευαίσθητο» ή «ανθεκτικό» σε κάθε αντιβιοτικό που ελέγχεται. Τα αποτελέσματα του αντιβιογράμματος διαμορφώνουν τον τον φαινότυπο αντοχής του κάθε βακτηρίου. Τα αντιβιοτικά που συνταγογραφούνται σήμερα ομαδοποιούνται με βάση τον μηχανισμό με τον οποίο αναστέλλουν την ανάπτυξη των βακτηρίων. Αυτά τα αντιβιοτικά δρουν κατά εκατοντάδων βακτηρίων, τα οποία έχουν ποικίλο βαθμό παθογονικότητας για τον άνθρωπο. Στα περίπου50 χρόνια που έχουν μεσολαβήσει από την εισαγωγή των αντιβιοτικών στη θεραπευτική των βακτηριακών λοιμώξεων έχει παρατηρηθεί αντοχή ορισμένων βακτηρίων σε πολλά συχνά συνταγογραφούμενα αντιβιοτικά, που τα καθιστά πλέον ακατάλληλα για χρήση. Α. Βελεγράκη

Ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση ή πυκνότητα [ΕΑΠ] Αντιβιοτικών minimum inhibitory concentration (MIC) Κλινικό δείγμα: Στέλεχος βακτηρίου απομονωμένο από αιμοκαλλιέργεια. Μέθοδος: Ευαισθησία σε διαφορετικές συγκεντρώσεις ενός αντιβιοτικού. Εφαρμογή (π.χ): Θεραπεία στρεπτοκοκκικής ή εντεροκοκκικής ενδοκαρδίτιδας. Ερμηνεία: Η EAΠ ενός αντιβιοτικού εκφράζεται σε mg/L ή μg/ml. Ως ΕΑΠ ορίζεται η μικρότερη συγκέντρωση του αντιβιοτικού που αναστέλλει την ανάπτυξη του βακτηρίου. Για παράδειγμα σε ασθενείς με ενδοκαρδίτιδα, η δοκιμασία βοηθά στον προσδιορισμό της ευαισθησίας και σε άλλα αντιβιοτικά πλην της πενικιλλίνης: π.χ Ο Streptococcus mutans με ΕΑΠ πενικιλλίνης > 0.1 mg/L θα απαιτεί συνδυασμένη θεραπεία με γενταμυκίνη. Μπορεί επίσης να προσδιοριστεί η ελάχιστη βακτηριοκτόνος συγκέντρωση (Minimum bacteriocidal concentration -MBC) Ως MBC ορίζεται η μικρότερη συγκέντρωση του αντιβιοτικού που μπορεί να «σκοτώσει» >99.9% του αρχικού ενοφθαλμίσματος του βακτηρίου. Η MBC είναι αμφιλεγόμενης αξίας στην απόφανση θεραπείας με αντιβακτηριακά αντιβιοτικά. Α. Βελεγράκη

Προσδιορισμός ελάχιστης ανασταλτικής πυκνότητας (MIC) Με τη μέθοδο (μακρο)αραιώσεων Θολερότητα McFarland 0,5 Καλλιέργεια μικροοργανισμού MΒC* = Η ελάχιστη συγκέντρωση του φαρμάκου που θανατώνει τα βακτήρια * minimum bacteriocidal concentration (ελάχιστη βακτηριοκτόνος συγκέντρωση ή πυκνότητα MIC = Η ελάχιστη συγκέντρωση του φαρμάκου που αναστέλλει την ανάπτυξη του βακτηρίου Α. Βελεγράκη

Προσδιορισμός MIC με τη δοκιμασία «έψιλον= έλλειψη» - Etest σε στερεό θρεπτικό υπόστρωμα Έλλειψη αναστολής ανάπτυξης βακτηρίου Τιμή MIC Α. Βελεγράκη

Α. Βελεγράκη