ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΜΕΤΑΛΛΑΓΩΝ ΣΤΑ ΓΟΝΙΔΙΑ ΤΗΣ ΑΙΜΟΧΡΩΜΑΤΩΣΗΣ ΚΑΙ ΤΗΣ ΦΕΡΡΟΠΟΡΤΙΝΗΣ ΣΕ ΑΤΟΜΑ ΜΕ ΑΙΜΟΧΡΩΜΑΤΩΣΗ Χαρατζά Γ1 , Παπαϊωάννου Μ2, Κορομηλά Θ1, Δρόσος Ι1, Αλεπόρου- Μαρίνου Β1, Κόλλια Π1 1Εργαστήριο Γενετικής Ανθρώπου, Τομέας Γενετικής και Βιοτεχνολογίας, Τμήμα Βιολογίας, Πανεπιστήμιο Αθηνών, 2Εργαστήριο Ιατρικών Μεταγγίσεων και Αιμοδοσίας, Τμήμα Ιατρικής, Πανεπιστήμιο Θεσσαλίας Εισαγωγή Κληρονομική αιμοχρωμάτωση: συχνή κληρονομική νόσος που οδηγεί σε υπερφόρτωση σιδήρου oφείλεται σε μεταλλαγές στα γονίδια HFE, HJV, HAMP, TfR2 και SLC40A1 η πλειονότητα των μεταλλαγών ταυτοποιείται στα γονίδια HFE και φερροπορτίνης (SLC40A1) Σκοπός Aνίχνευση νέων μεταλλαγών ή/και πολυμορφισμών στα γονίδια HFE και SLC40A1 σε ασθενείς με αιμοχρωμάτωση

Υλικά-Μέθοδοι Μελετήθηκαν 34 ασθενείς με πιθανή HFE. Απομόνωση DNA από το περιφερικό αίμα ασθενών (Qiacube, Qiagen), Έλεγχος γνωστών μεταλλαγών των γονιδίων HFE, HAMP, TfR2 και SLC40A1, με τη χρήση του εμπορικού kit αιμοχρωμάτωσης (HAIN). Ενίσχυση της αλληλουχίας DNA των γονιδίων της φερροπορτίνης (8 εξωνίων) και του HFE (6 εξωνίων). Ανάλυση αλληλουχίας (Sequencing) για εύρεση πιθανών πολυμορφισμών και μεταλλαγών στα παραπάνω PCR προϊόντα.

Αποτελέσματα HFE: 4 γνωστές μεταλλαγές (H63D, C282Y, S65C, Q127H/P150del) 2 γνωστοί πολυμορφισμοί (5’UTR περιοχή και εσώνιο 2) 5 νέοι πολυμορφισμοί (στα εσώνια 3, 4 και 6 και στην 5’UTR)

Αποτελέσματα Φερροπορτίνη (SLC40A1): Πολυμορφισμός στο εξώνιο 6 και μεταλλαγή στο εξώνιο 7 5 νέοι πολυμορφισμοί στα εσώνια 1, 2 και 6 9 νέες νουκλεοτιδικές αντικαταστάσεις στα εξώνια 3, 6 και 7

ΣΥΖΗΤΗΣΗ-ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ Για το γονίδιο HFE: Επικρατούσα από τις γνωστές μεταλλαγές είναι η H63D. 5 νέοι πολυμορφισμοί IVS3 T ->A, IVS4 G ->A καθώς και IVS6 G ->A και T ->C και 5’UTR A ->G απαντώνται σε ποσοστά 1,9%, 9,6%, 7,8%, 1,9% και 1,9%, αντίστοιχα. Για το γονίδιο της Φερροπορτίνης: ο πολυμορφισμός T->C V221 του εξωνίου 6 και η μεταλλαγή aa425G->T του εξωνίου 7. 4 νέοι πολυμορφισμοί στα εσώνια 1, 2 και 6 του γονιδίου. 5 νέες νουκλεοτιδικές αντικαταστάσεις στα εξώνια 3, 6 και 7 του γονιδίου που οδηγούν σε συνώνυμο αμινοξύ. 4 νέες νουκλεοτιδικές αντικαταστάσεις στο εξώνιο 7, οι οποίες χρήζουν περαιτέρω διερεύνηση. Ε υ χ α ρ ι σ τ ώ γ ι α τ η ν π ρ ο σ ο χ ή σ α ς !!