Λ. Λατανιώτης, Αγγελή I.K., Γαϊτανάκη Αικ. και Μπέης Ι. ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ, ΤΜΗΜΑ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ ΤΟΜΕΑΣ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΑΣ ΖΩΩΝ ΚΑΙ ΑΝΘΡΩΠΟΥ ΕΜΠΛΟΚΗ ΤΟΥ ΝF-κB ΣΤΗΝ ΑΠΟΚΡΙΣΗ ΚΑΡΔΙΑΚΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ H9c2 ΚΑΤΩ ΑΠΟ ΣΥΝΘΗΚΕΣ ΥΠΕΡΩΣΜΩΤΙΚΟΥ ΣΤΡΕΣ Λ. Λατανιώτης, Αγγελή I.K., Γαϊτανάκη Αικ. και Μπέης Ι. Τομέας Φυσιολογίας Ζώων και Ανθρώπου, Τμήμα Βιολογίας, ΕΚΠΑ, Πανεπιστημιούπολη Ιλίσσια, 157 84 Αθήνα

MAPKs (ERKs, JNKs, p38-MAPK) NF-κΒ IκΒ Ωσμωτικό στρες PKA ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ, ΤΜΗΜΑ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ ΤΟΜΕΑΣ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΑΣ ΖΩΩΝ ΚΑΙ ΑΝΘΡΩΠΟΥ MAPKs (ERKs, JNKs, p38-MAPK) NF-κΒ IκΒ Ωσμωτικό στρες PKA Γονιδιακή ρύθμιση STATs καταστολή κύριο ρόλο στην απόπτωση του κυττάρου προ-αποπτωτικά ή αντι-αποπτωτικά γονίδια ενεργοποιείται και σε περιπτώσεις προσβολής του κυττάρου από βακτηριακές τοξίνες, ακτινοβολία (UV, γ, ιονίζουσα κ.ά.) και σε στρες, όπως το οξειδωτικό

Egr-1 (205bp) 0 0.5 1 2 4 6 12 (ώρες) H2O2 (200μΜ) GAPDH (452bp) 0 0.5 1 2 4 6 12 (ώρες) H2O2 (200μΜ) 300bp 200bp Egr-1 (205bp) GAPDH (452bp) 500bp 400bp ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ, ΤΜΗΜΑ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ ΤΟΜΕΑΣ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΑΣ ΖΩΩΝ ΚΑΙ ΑΝΘΡΩΠΟΥ Για τα πειράματά μας χρησιμοποιήθηκε η κυτταρική σειρά των H9c2 καρδιακών μυοβλαστών. Προκειμένου να προσομοιωθούν συνθήκες ωσμωτικού στρες χρησιμοποιήθηκε διάλυμα σορβιτόλης συγκέντρωσης 0,25Μ. Οι επιδράσεις έγιναν για χρονική διάρκεια 5min, 15min, 30min, 1h, 2h και 4h. Εκχυλίσματα ολικής πρωτεϊνης αναλύθηκαν με ανοσοστύπωμα κατά Western, με αντισώματα που ανιχνεύουν τα επίπεδα του pΝF-κΒ (ser 536) και της ακτίνης. 0 0.5 1 2 4 6 12 (ώρες) H2O2 (200μΜ) 300bp 200bp Egr-1 (205bp) GAPDH (452bp) 500bp 400bp 0 0.5 1 2 4 6 12 (ώρες) H2O2 (200μΜ) 300bp 200bp Egr-1 (205bp) GAPDH (452bp) 500bp 400bp 0 0.5 1 2 4 6 12 (ώρες) H2O2 (200μΜ) 300bp 200bp Egr-1 (205bp) GAPDH (452bp) 500bp 400bp 0 0.5 1 2 4 6 12 (ώρες) H2O2 (200μΜ) 300bp 200bp Egr-1 (205bp) GAPDH (452bp) 500bp 400bp 0 0.5 1 2 4 6 12 (ώρες) H2O2 (200μΜ) 300bp 200bp Egr-1 (205bp) GAPDH (452bp) 500bp 400bp

c 5 15 30 60 180 360 (λεπτά) σορβιτόλη (0,25Μ) ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ, ΤΜΗΜΑ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ ΤΟΜΕΑΣ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΑΣ ΖΩΩΝ ΚΑΙ ΑΝΘΡΩΠΟΥ pNF-κΒ c 0,08 0,25 0,5 1 2 4 (ώρες) σορβιτόλη (0,25Μ) actin c 0,08 0,25 0,5 1 2 4 (ώρες) σορβιτόλη (0,25Μ) Σταδιακή αύξηση της φωσφορυλίωσης του παράγοντα ΝF-κΒ Γρήγορη επαγωγή κυτταρική προστασία c 5 15 30 60 180 360 (λεπτά) σορβιτόλη (0,25Μ)

ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ, ΤΜΗΜΑ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ, ΤΜΗΜΑ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ ΤΟΜΕΑΣ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΑΣ ΖΩΩΝ ΚΑΙ ΑΝΘΡΩΠΟΥ Προεπώαση με ταυρίνη 10mM (30min) και επίδραση διαλύματος σορβιτόλης 0,25Μ (1h) Ταυρίνη Κανάλια ιόντων Λιγότερη σορβιτόλη εισέρχεται στο κύτταρο Αναστολή της φωσφορυλίωσης του παράγοντα NF-κΒ προστατευτικός ρόλος