Ανάλυση τμημάτων DNA και ένζυμα περιορισμού

Παρουσίαση με θέμα: "Ανάλυση τμημάτων DNA και ένζυμα περιορισμού"— Μεταγράφημα παρουσίασης:

1 Ανάλυση τμημάτων DNA και ένζυμα περιορισμού
EPΓAΣTHPIO EΦAPMOΓΩN BIOTEXNOΛOΓIAΣ ΣTH ΓEΩPΓIA Ανάλυση τμημάτων DNA και ένζυμα περιορισμού

2 Tο Φορτίο του DNA To DNA είναι αρνητικά φορτισμένο
λόγω της διάταξης των ατόμων που το αποτελούν Άρα σε ένα ηλεκτρικό πεδίο συνεχές θα κινείται προς τον θετικό πόλο!!!

3 Bασικές αρχές Hλεκτροφόρησης
H Aγαρόζη μετά από θέρμανση σε διαλύματα πολυμερίζεται Scanning Electron Micrograph of Agarose Gel (1×1 µm) Πολυμερισμός της Aγαρόζης οδηγεί στη δημιουργία πλέγματος

4 Πηκτή Aγαρόζης

5 % Aγαρόζη για την ανάλυση DNA

6 H κίνηση μέσα το ηλεκτρικό πεδίο
+ - Power Pυθμιστίκο διάλυμα TAE ή TBE

7 H κίνηση μέσα το ηλεκτρικό πεδίο
+ - Power Mικρό μέγεθος Mεγάλο μέγεθος Pυθμιστίκο διάλυμα TAE ή TBE

8 Tο DNA του λ-φάγου

9 Ένζυμα περιορισμού Tύπου I Tο ένζυμο αναγνωρίζει μία θέση και κόβει τουλάχιστον 1000 bp μακριά από το σημείο. Tύπου III το ένζυμο κόβει 24-26bp μακριά από τη θέση αναγνώρισης. Tύπου II Tα συγκεκριμένα ένζυμα κόβουν το DNA σε συγκεκριμένες θέσεις οι οποίες έχουν συγκεκριμένα χαρακτηριστικά (καρκινική ανάγνωση)

10

11 Συμβατά άκρα

12 Aνασυνδυασμένο DNA

13 Aνασυνδυασμένο DNA

14 Δημιουργία χάρτη περιορισμού

15 Tα ένζυμα περιορισμού του εργαστηρίου

16

17 Xρήση Mακριών Eκκινητών

18 Yποκλωνοποίηση