Klinički značaj određivanja AMH i ovarijskih biljega u serumu i folikularnoj tekućini u procjeni plodnosti tijekom postupaka MO D. Tišlarić-Medenjak, K. Kuna, I. Bolanča, I. Zec, D. Ljiljak, R. Rakoš Justament, J. Tomić,, Ž. Bukovec Megla Klinika za ginekologiju i porodništvo Endokrinološki laboratorij, Klinika za onkologiju i nuklearnu medicinu KBC “Sestre milosrdnice”

Fiziologija AMH Dimerna molekula glikoproteina, član TGF-β obitelji Ključna uloga u diferencijaciji muškog spola Od 8. tjedna gestacije sintetizira se u Sertolijevim stanicama  indukcija regresije Müllerovih cijevi

AMH i fiziologija jajnika Sinteza AMH odvija se u granuloza stanicama preantralnih i antralnih folikula. Postiže biološki učinak putem transmembranskog serin/treonin kinaza receptora tipa II (AMHRII). Glavni fiziološki učinak AMH u jajniku – inhibicija ranih stadija razvoja folikula (Themmen, 2005; Visser i Themmen, 2005).

Razvoj folikula i sinteza AMH

Čimbenici utjecaja na koncentraciju AMH A. Koncentracija AMH s obzirom na životnu dob. B. Koncentracija AMH u menstruacijskom ciklusu.

Čimbenici utjecaja na koncentraciju AMH AMH je nedektabilan 3-5 dana nakon obostrane ooforektomije  AMH isključivo ovarijskog porijekla (La Marca et al, 2005) Potvrđena jaka povezanost između koncentracije AMH i ovarijske rezerve  AMH kao prediktor menopauze (Sowers et al, 2008) Minimalna varijabilnost unutar i između menstruacijskih ciklusa omogućava određivanje AMH neovisno o danu ciklusa (La Marca et al, 2006)

Čimbenici utjecaja na koncentraciju AMH Na koncentraciju AMH ne utječe: Trudnoća Terapija GnRH agonistima Kratkotrajna terapija OHK AMH i PCO 2-3 puta veće koncentracije AMH u odnosu na zdravu populaciju (Fallat et al, 2003) Korelacija koncentracije AMH i izraženosti PCO Viši AMH kod PCO i inzulinske rezistencije Viši AMH kod amenoroičnih u odnosu na oligomenoroične bolesnice s PCO

AMH kao prediktor ovarijskog odgovora u MO Prediktori ovarijskog odgovora tijekom ovarijske stimulacije: Broj antralnih folikula AMH FSH (3. dan) estradiol (3. dan) inhibin B (3. dan) dob Metaanaliza (Broer et al, 2008) Usporedba serumske koncentracije AMH i broja antralnih folikula u procjeni ovarijskog odgovora AMH jednako dobar kao određivanje broja antralnih folikula u procjeni ovarijskog odgovora Prednost AMH – mogućnost određivanja neovisno o fazi ciklusa

AMH u folikularnoj tekućini U grupi s visokim folikularnim AMH – viša stopa implantacije i kliničke trudnoće AMH u folikularnoj tekućini predstavlja dobar dodatni prediktor u procjeni kvalitete oocite Mogući važan doprinos u izboru oocite u državama s restriktivnim zakonom u pogledu broja oplođenih oocita

Ciljevi istraživanja: Odrediti hormonski status u serumu i folikularnoj tekućini u svrhu procjene funkcije osovine hipofiza – jajnici Usporediti koncentracije AMH s drugim ovarijskim biljezima u serumu i folikularnoj tekućini Ustanoviti povezanost koncentracije AMH u serumu i folikularnoj tekućini

Ispitanice i metode: Studija je uključila 25 žena obrađenih u Odjelu za humanu reprodukciju, Klinika za ginekologiju i porodništvo, KBCSM Normoovulatorni ciklusi s razmacima 30  4 dana Uzorci krvi i folikularnih tekućina prikupljeni su na dan punkcije jajne stanice u prirodnom ciklusu.

Ispitanice i metode: Uzorci su čuvani na -20°C do analize Serum: anti-Müllerov hormon (AMH), lutropin (LH), folitropin (FSH), estradiol (E2), progesteron (P), dehidroepiandrosteron-sulfat (DHEAS), testosteron (T), protein nosač spolnih hormona (SHBG), prolaktin (PRL), tireotropni hormon (TSH) Folikularna tekućina: AMH, E2, P, T. Koncentracije su izražene prema sadržaju proteina.

Folikularna tekućina (FF) * Koncentracije / proteini u FF * Rezultati: Serum* Folikularna tekućina (FF) * Koncentracije / proteini u FF * AMH 10,8 (0,9 – 42,3) pmol/L 40,8 (3,5 – 171,7) pmol/L 0,9 (0,1 - 4,7) pmol/g E2 0,5 (0,2 – 1,0) nmol/L 1360 (499 - 6274) nmol/L 27,3 (10,7 – 157,4) nmol/g P 4,0 (1,6 – 22,7) nmol/L 17020 (2835 – 30736) nmol/L 400 (89 - 650) nmol/g T 1,4 (0,5 – 2,6) nmol/L 35,0 (20,6 – 83,2) nmol/L 0,8 (0,4 – 2,1) nmol/g SHBG 61,2 (32,4 – 143,5) nmol/L Izračunati slob. T 14,9 (4 – 38,1) pmol/L DHEAS 7,4 (3,0 – 21,7) μmol/L FSH 12,6 (4,9 – 20,9) IU/L LH 26,8 (10,8 – 44,9) IU/L TSH 1,6 (0,5 – 4,3) mIU/L Prolaktin 9,3 (6,3 – 30,9) μg/L Proteini 42,0 (32,0 – 54,3) g/L *Medijan (raspon između 5.-95. percentila)

Uspoređivanje koncentracija hormona u serumu i FF

Rezultati: Koncentracije i povezanost AMH u serumu i FF obzirom na dob ispitanica: Dob (godine) AMH (serum) (pmol/L) AMH (FF) (pmol/g) P = 0,007 r = 0,63 37 (27 - 42) 10,8 (0,9 – 42,3) 0,9 (0,1 - 4,7) *Medijan (5. – 95. percentil) Usporedba koncentracija AMH u serumu i FF B. Usporedba koncentracija AMH u serumu i FF prema sadržaju proteina B. A.

Zaključci: Izmjerene koncentracije gonadotropina i ovarijskih biljega potvrdile su uredni hormonski status osovine hipofiza-jajnici, a koja je važan preduvjet za ovulaciju. Ispitivanjem smo ustanovili postojanje umjerene, ali statistički značajne povezanosti koncentracija AMH u serumu i FF (r = 0.63, P<0.001). Koncentracija AMH u folikularnoj tekućini – mogući kriterij u selekciji oocite?

HVALA NA PAŽNJI