ΔΙΑΧΩΡΙΣΜΟΣ ΑΜΙΝΟΞΕΩΝ ΜΕ ΤΗ ΤΕΧΝΙΚΗ ΤΗΣ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑΣ ΛΕΠΤΗΣ ΣΤΟΙΒΑΔΑΣ (Thin Layer Chromatography, TLC) Egon Stahl Στατική Φάση 0.15 – 2 mm Υλικό στήριξης
ΣΤΑΤΙΚΗ ΦΑΣΗ
ΚΙΝΗΤΗ ΦΑΣΗ ΠΙΝΑΚΑΣ ΙΙ. Μερικοί από τους διαλύτες που χρησιμοποιούνται στη χρωματογραφία προσρόφησης.
ΕΞΗΓΗΣΗ ΤΟΥ ΦΑΙΝΟΜΕΝΟΥ Η κινητή φάση μετακινείται (ανέρχεται) επί της στατικής λόγω τριχοειδών φαινομένων 2. Οι χρωματογραφούμενες ουσίες προσροφώνται στην στατική φάση και κατόπιν εκροφώνται (επιστρέφουν στην κινητή) δυναμική ισορροπία 3. Η κινητή φάση τις μετακινεί σε νέα θέση, όπου ξαναπροσροφώνται κλπ
ΠΟΥ ΟΦΕΙΛΕΤΑΙ Η ΠΡΟΣΡΟΦΗΣΗ ? Σε αλληλεπιδράσεις διπόλου-διπόλου και δεσμούς υδρογόνου μεταξύ μορίων της ουσίας και της στατικής φάσης.
ΠΟΥ ΟΦΕΙΛΕΤΑΙ Η ΕΚΡΟΦΗΣΗ ? Σε αλληλεπιδράσεις διπόλου-διπόλου και δεσμούς υδρογόνου μεταξύ μορίων της ουσίας και της κινητής φάσης.
ΠΑΡΑΤΗΡΗΣΕΙΣ Οι περισσότερο πολικές ενώσεις προσροφώνται ισχυρότερα από τις λιγότερο πολικές ή τις άπολες. Ουσίες που προσροφώνται ισχυρά μετακινούνται πιο αργά από άλλες που προσροφώνται λιγότερο ισχυρά. διαλύτες ανάπτυξης με μεγαλύτερο δείκτη πολικότητας μετακινούν πιο γρήγορα τις χρωματογραφούμενες ουσίες
ΕΜΦΑΝΙΣΗ ΤΟΥ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΗΜΑΤΟΣ Με υπεριώδη ακτινοβολία Δια ψεκασμού με ειδικά αντιδραστήρια (έγχρωμα παράγωγα) Τα αμινοξέα μπορούν να ανιχνευθούν με νινυδρίνη.
ΕΦΑΡΜΟΓΕΣ Έλεγχος καθαρότητας ουσίας (μια κηλίδα) Από πόσα συστατικά αποτελείται ένα μίγμα. Παρακολούθηση της πορείας μιας χημικής αντίδρασης Ταυτοποίηση μιας άγνωστης ένωσης από την τιμή Rf, χρησιμοποιώντας δείγμα αναφοράς Rf = α/β όπου α η απόσταση που διάνυσε η ουσία και β η απόσταση που διάνυσε ο διαλύτης
ΘΑΛΑΜΟΣ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑΣ ΘΑΛΑΜΟΣ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑΣ
ΤΟΠΟΘΕΤΗΣΗ ΔΕΙΓΜΑΤΟΣ
ΠΛΑΚΑ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑΣ ΜΕΤΑ ΤΗΝ ΕΜΦΑΝΙΣΗ ΠΛΑΚΑ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑΣ ΜΕΤΑ ΤΗΝ ΕΜΦΑΝΙΣΗ Rf = α/β