♂ Σκοπός Όργανα: 2 όρχεις 2 επιδιδυμίδες 2 σπερματικοί πόροι ουρήθρα Όργανα: 2 όρχεις 2 επιδιδυμίδες 2 σπερματικοί πόροι ουρήθρα επικουρικοί γεννητικοί αδένες (2 κυστεοειδείς, προστάτης, 2 βολβουρηθραίοι) πέος Smok pp 476 Κυστεοειδείς όχι στα σαρκοφάγα, προστάτης (μεγαλύτερος στα σαρκοφάγα και στον ίππο), βολβουρηθραίοι (όχι στο σκύλο)

ΑΝΔΡΟΓΟΝΑ (τεστοστερόνη, ανδροστενεδιόνη, διϋδροεπιανδροστερόνη) Πηγή: χολοστερόλη από λιποπρωτεϊνες του αίματος ή παραγόμενη μέσα στα κύτταρα Leydig κοινός πυρήνας: κυκλοπεντανοϋπερυδροφαινανθρένιο Wikipedia. See Hafez 5-10 pp98 for details

Ανδρογονα Wikipedia. See Hafez 5-10 pp98 for details

Άτομα C: 18 → δράση οιστρογόνων 19 → δράση ανδρογόνων Wikipedia. See Hafez 7th edition pp40-42 for details Άτομα C: 18 → δράση οιστρογόνων 19 → δράση ανδρογόνων 20 → δράση προγεστερόνης

Κ-Ν Vol II pp 1231 Fig 13. Subtitlle from Hafez 7th edition pp40-42

Τόπος παραγωγής: όρχεις - κύτταρα Leydig (αλλά και φλοιός Corps: Hafez 7th edition pp40-42 . Last phrase: mc D pp245

Αλβουμίνη στο αίμα φέρει το 98% των ανδρογόνων Hafez 7th edition pp40-42 For ABP role, see K-N pp1299 left column Androgen-binding protein: παράγεται από τα κύτταρα Sertoli Ρόλος ABP: 1) Μεταφορά τεστοστερόνης μέσα στα Sertoli 2) Μεταφορά τεστοστερόνης στα σπερματικά σωληνάρια και στην επιδιδυμίδα με στόχο την ↑ συγκέντρωση ανδρογόνων

Φυσιολογικός ρόλος ανδρογόνων ☺ σπερματογένεση ☺ επιβίωση των σπερματοζωαρίων στην επιδιδυμίδα ☺ επικουρικοί γεννητικοί αδένες, σπερματικός πόρος και εξωτερικά γεννητικά όργανα ☺ δευτερογενή χαρακτηριστικά του φύλου smok

Φυσιολογικός ρόλος ανδρογόνων (συνέχεια) ☺ σεξουαλική συμπεριφορά (υποθάλαμος) και libido ☺ μεταβολισμός πρωτεϊνών ☺ ανάπτυξη του μυοσκελετικού συστήματος ☺ σμηγματογόνοι αδένες ☺ υποθάλαμος - υπόφυση (LH – FSH) ☺ επαναρρόφηση χλωρίου και νερού smok

Ρύθμιση παραγωγής ανδρογόνων Άξονας Υ-Υ-Ο LH: υποδοχέας επιφάνειας στα κύτταρα Leydig – G protein – αδενυλική κυκλάση – cAMP – φωσφορυλίωση πρωτεϊνών (μεταξύ των οποίων και η εστεράση της χολοστερόλης) – παραγωγή χολοστερόλης – παραγωγή πρεγνενολόνης στη μιτοχονδριακή μεμβράνη – παραγωγή τεστοστερόνης στο λείο ενδοπλασματικό δικτυωτό Μακροπρόθεσμα, επηρεάζεται και η έκφραση των γονιδίων που ελέγχουν τη σύνθεση της τεστοστερόνης K-N, Vol1, pp1357 (conclusions)

Mc Donald pp248 fig 8-5

Σμοκ, εικ 150 σελ 480 Προλακτίνη: επηρεάζει τον αριθμό των υποδοχέων LH στα κύτταρα Leydig και την ευαισθησία τους

Ρύθμιση παραγωγής ανδρογόνων (συνέχεια) Η συγκέντρωση της τεστοστερόνης στο αίμα δεν είναι σταθερή. Οι επεισοδιακές εκκρίσεις επηρεάζονται από ♂ την ηλικία ♂ την εποχή του έτους ♂ τους κιρκάδιους ρυθμούς smok

Παραγωγή σπερματοζωαρίων Guideline by Hafez pp193

Σπερματογένεση (spermatogenesis or spermatocytogenesis): από το σπερματογόνιο μέχρι το σχηματισμό των σπερματίδων Hafez 7th ed pp99 A0 replace stem cells. A2 give A3 and replace A1. In=A1 A2 A3 A4 spermatogonia. B give primary spermatocytes (I). II= secondary spermatocytes. II-1=meiosis 2 (mitosis of haploid cells). Up to 1=45d in the bull. 1-3=Golgi phase. 4-7= Cap phase. 8-12=acrosomal phase. 13-14=maturation phase. Spermiation follows

Σπερμιογένεση (spermiogenesis): η διαφοροποίηση των σπερματίδων ♂ συμπύκνωση της χρωματίνης ♂ σχηματισμό της ακροσωμιακής καλύπτρας ♂ σχηματισμό της ουράς Spermiation

Τα κύτταρα Sertoli Cytoplasmic bridges coordinate divisions

Ρόλος των κυττάρων Sertoli Hafez Fig 9-7 pp198 ♂ Aνακύκλωση του πρωτοπλάσματος ♂ Απορρόφηση των εκφυλισμένων κυττάρων

Ρόλος των κυττάρων Sertoli (συνέχεια) ♂ φραγμός αίματος – όρχεων ♂ παρέχουν τους παράγοντες για την ανάπτυξη των σπερματοζωαρίων ♂ εκκρίνουν ανασταλτίνη (inhibin) ♂ παράγουν ABP (androgen binding protein) Albumin in interstitial fluid is at same concentration as in blood, and binds testosterone as well (K-N pp1388)

Κύκλος του σπερματικού επιθηλίου: (σε εγκάρσια τομή σπερματικού σωληναρίου) τα γεγονότα που μεσολαβούν μεταξύ δύο εμφανίσεων κυττάρων της ίδιας φάσης ανάπτυξης (9-14 μέρες ανάλογα με το είδος) Χρειάζονται 4-5 κύκλοι 10 ημερών κατά μέσο όρο (κάπρος 9 μέρες, ταύρος 14 μέρες) για να φτάσουμε από το σπερματογόνιο στο σπερματοζωάριο

Κύμα της σπερματογένεσης

Διάρκεια σπερματογένεσης

Ο φραγμός αίματος-όρχεων (Slide No 5) basal compartment – adluminal compartment 1) Μυοειδή κύτταρα (για τα παραγωγικά ζώα (farm animals) είναι ήσσονος σημασίας και μάλλον ασήμαντος για τα μηρυκαστικά και το χοίρο) 2) Στενές συνδέσεις κυττάρων Sertoli (ήβη, εποχή) Ρόλος: ♂ έλεγχος εισόδου ουσιών από το αίμα – διευκολύνονται οι λιποδιαλυτές ουσίες (δημιουργία περιβάλλοντος ευνοϊκού για τη μείωση) ♂ έλεγχος εξόδου ουσιών από το περιβάλλον του σπερματικού σωληναρίου (ABP, inhibin…) ♂ προστασία σπερματοζωαρίων από αντισώματα Παρόμοιος φραγμός υπάρχει και στην επιδιδυμίδα Study K-N pp 1144 as well

Oρμονικός έλεγχος της σπερματογένεσης Η υποφυσεκτομή αναστέλλει τη σπερματογένεση (αποκατάσταση με FSH και LH ή FSH και τεστοστερόνη) Η τεστοστερόνη διαχέεται στα κύτταρα Sertoli Τα κύτταρα Sertoli παράγουν ABP και inhibin (-παλίνδρομη ρύθμιση FSH) Ακτιβίνες ορχεος (παρακρινής δράση) TGF Χαλόνες από πρωτογενή σπερματο-κύτταρα και σπερματίδες (κύκλος επιθηλίου) Guide: Mc D pp240-244. Σχόλια δεξιά: Hafez 7th ed pp 105. Για πληρη ενημερωση, Κ-Ν pp 1363-1418 Activin is produced in the gonads, pituitary gland, placenta, and other organs: it enhances LH action in the ovary and testis. In the male, it enhances spermatogenesis. Transforming growth factor-βs (TGF-βs) are known to regulate multiple physiological functions in the testis, which include spermatogenesis, Leydig cell steroidogenesis, extracellular matrix synthesis and testis development. TGF-β3 also regulates Sertoli cell tight junction dynamics, suggesting a crucial role in the opening and closing of the blood–testis barrier (BTB). This in turn regulates the passage of pre-leptotene and leptotene spermatocytes across the BTB at stages VIII-XI of the seminiferous epithelial cycle. Chalones are physiological inhibitors of cell proliferation. They have been described for a variety of tissues, including the seminiferous epithelium. The origin of the substance are the differentiated cells of the spermatogenesis from primary spermatocytes up to round spermatids. The target cells are the type A (and perhaps only the A0) spermatogonia. The inhibitory effect is not dependent on testicular steroids, Sertoli cell products (inhibin or the like) nor on the hypothalamic-hypophyseal-gonadal axis

Δράση τεστοστερόνης ♂ Ως στεροειδής πρωτεϊνη, επιδρά σε υποδοχείς του πυρήνα επηρεάζοντας τη γονιδιακή έκφραση (σε ποια συγκεντρωση;) ♂ Aυξάνει την πρωτεϊνοσύνθεση στα στάδια VI – VIII (κυρίως από τα Sertoli αλλά και από τις σπερματίδες) Κ-Ν pp 1401 - 1404

Δράση οιστρογόνων ♂ Παραγωγή από κύτταρα Leydig και σπερματοκύτταρα (πριν την ενήβωση παράγονται και απο τα κύτταρα του Sertoli) ♂ Υποδοχείς σε σπερματικό επιθήλιο, ορχικό δίκτυο, σπερματικούς πόρους και επιδιδυμίδα ♂ Επηρεάζουν πρωτείνες που ρυθμίζουν επαναρρόφηση νερού και ηλεκτρολυτών (επαναρρόφηση Na και έκκριση Cl) και έτσι οσμωτικά τη μορφολογία των σπερματοζωαρίων και των επιθηλίων Κ-Ν pp 1401 – 1404 και κυριως: Hess RA, “Estrogen in the adult male reproductive tract: a review”, Reprod Biol Endocrinol 2003, 1:52 “In the adult testis, estrogen is synthesized by Leydig cells and the germ cells, producing a relatively high concentration in rete testis fluid. Estrogen receptors are present in the testis, efferent ductules and epididymis of most species. However, estrogen receptor-alpha is reported absent in the testis of a few species, including man. Estrogen receptors are abundant in the efferent ductule epithelium, where their primary function is to regulate the expression of proteins involved in fluid reabsorption. Disruption of the alpha-receptor, either in the knockout (alphaERKO) or by treatment with a pure antiestrogen, results in dilution of cauda epididymal sperm, disruption of sperm morphology, inhibition of sodium transport and subsequent water reabsorption, increased secretion of Cl-, and eventual decreased fertility. In addition to this primary regulation of luminal fluid and ion transport, estrogen is also responsible for maintaining a differentiated epithelial morphology. Thus, we conclude that estrogen or its alpha-receptor is an absolute necessity for fertility in the male.”

Ρόλος FSH Προ ενήβωσης: υπεύθυνη για ABP Σπερματογένεση: συνέργεια με τεστοστερόνη για μιτώσεις σπερματογονίων, κα (βλεπε slide 3) Ρύθμιση αριθμού και μεγέθους των κυττάρων Leydig Ρύθμιση έκκρισης IGF-1 (παράγεται από το ήπαρ αλλά δεν περνά το φραγμό των όρχεων) από τα κύτταρα Sertoli. Ρόλος στη μείωση K-N pp1411. Για IGF δες McD 240

Άλλοι παράγοντες Προλακτίνη: πιθανός ρόλος σε ζώα που αναπαράγονται εποχικά. Επηρεάζει την έκκριση FSH και LH, αλλά και αυξάνει τον αριθμό των υποδοχέων LH στα κύτταρα Leydig Ωκυτοκίνη (οπίσθιος λοβός υπόφυσης): Παράγεται και από τα κύτταρα Leydig. Ρόλος θολός, αλλά επηρεάζει τις συσπάσεις των μυοειδών κυττάρων και τη μείωση Ινσουλίνη: επηρεάζει την πρόσληψη γλυκόζης από κύτταρα Sertoli (πιθανή διαταραχή σπερματογένεσης σε διαβητικά ζώα) Κ-Ν pp 1415-1416

O ρόλος του υγρού των σπερματικών σωληναρίων Από πού προέρχεται; (ενεργητική μεταφορά ηλεκτρολυτών από Sertoli και όσμωση. Σπερματικό επιθήλιο). ΑBP Είναι παραγνωρισμένο, αλλά το υγρό αυτό είναι κάτι παραπάνω από φορέας απομάκρυνσης από τον όρχη της τεστοστερόνης ή της ABP. Είναι ο κύριος δρόμος που ακολουθούν οι πρωτεϊνες-αγγελιοφόροι και οι διάφοροι ενεργειακοί και διατροφικοί παράγοντες από τα κύτταρα Sertoli προς τα σπερματοκύτταρα και τις σπερματίδες. Ίσως είναι ο σημαντικότερος παράγοντας για τη σπερματογένεση!!! Προελευση: Hafez 7th ed pp 104 Άλλα: K-N pp1417 conclusions, last par

Εποχή του έτους Υπάρχει περιοδικότητα, αν και όχι τόσο έντονη και προφανής όσο στο θηλυκό Ποιότητα εκσπερματίσματος και γονιμότητα LH, FSH, τεστοστερόνη και φωτοπερίοδος (κριός-τράγος, επιβήτορας, άλλα είδη ζώων). Ημισφαίρια; Βάρος όρχεων και σεξουαλική συμπεριφορά Καλοκαίρι και ποιότητα σπέρματος (ορμονικά αίτια ή απλά η θερμοκρασία;) Guide: Probably Mc Donald 242, και Σμοκ 489 για τη φωτοπερίοδο

Θερμοκρασία όρχεων ♂ Θέση οσχέου ♂ Κρυψορχία (uni- or bi- lateral) ♂ Πειραματική άνοδος Θ ♂ Δαρτός χιτώνας (επιφάνεια οσχέου), κρεμαστήρας μυς, αγγείωση, ιδρωτοποιοί αδένες ♂ Πυρετός ♂ Λίπος ♂ Αντίρροπη ροή αίματος σε έσω σπερματική αρτηρία και φλέβες σπερματικού τόνου Smok Εσω ή εσωτερική αρτηρία = ορχική αρτηρία Φλέβες σπερματικού τόνου = σπερματικό πλέγμα (δίκτυο φλεβών) Ορχικό δίκτυο: άσχετο (είναι δίκτυο που σχηματίζεται από την εκφορητική οδό των σπερματοζωαρίων, μετά από τα ευθέα σωληνάρια και πριν από την επιδιδυμίδα)

Η άνοδος της θερμοκρασίας προκαλεί την έκκριση από τα κύτταρα Sertoli ενός μιτωτικού παράγοντα που αυξάνει τον αριθμό των κυττάρων Leydig, μειώνει όμως τον αριθμό των υποδοχέων LH στα κύτταρα αυτά Η αντοχή στο κρύο είναι πολύ μεγαλύτερη: κάπροι διατηρούν φυσιολογικές παραμέτρους του σπέρματος, ακόμη και σε -15 με -20°C Κρυοπαγήματα

Διατροφή και σπερματογένεση Όχι τόσο σημαντική όσο στο θηλυκό (συμπεριφορά, territory) Απώλεια βάρους κατά την αναπαραγωγική περίοδο Νεαρά ζώα με σιτηρέσιο ανεπαρκές σε ενέργεια: καθυστέρηση ήβης, υποπλασία όρχεων και επικουρικών γεννητικών αδένων Βιταμίνη Α: απαραίτητη για να προχωρήσει η σπερματογένεση πέρα από το στάδιο του σπερματογόνιου Α Έλλειψη ιχνοστοιχείων, φυτοοιστρογόνα, νιτρικά Συστηματική χορήγηση μικρών δόσεων τεστοστερόνης (λόγω –feedback) μειώνει τη σπερματογένεση (!). Οι μεγάλες δόσεις την διατηρούν – rebound phenomenon Οιστρογόνα (προηβικά επιδρούν αρνητικά στην ανάπτυξη των επικουρικών αδένων και των σπερματικών σωληναρίων) και προγεστίνες (μείωση LH) Μc Donald 244. Προγεστίνες=συνθετικά προγεσταγόνα

Επιδιδυμίδα Ρόλος: μεταφορά σπερματοζωαρίων Ωρίμανση σπερματοζωαρίων (ικανότητα κίνησης, απώλεια νερού και απώλεια πρωτοπλασματικού σταγονιδίου) Ρόλος ανδρογόνων Epididymis guide: Hafez pp203

Επιδιδυμίδα: Μεταφορά σπερματοζωαρίων Λείες μυϊκές ίνες – προσταγλαδίνες (συσπάσεις: 3/min) και κροσσωτό επιθήλιο. Κριός: 16 ημέρες Ταύρος: 7 ημέρες Κάπρος: 12 ημέρες (διακύμανση ως 20% ανάλογα με τη συχνότητα των εκσπερματίσεων) Ο αριθμός των λείων μυϊκών ινών και η συμπαθητική εννεύρωση των τοιχωμάτων αυξάνει προς την ουρά και τον σπερματικό πόρο

Επιδιδυμίδα: Ωρίμανση και αποθήκευση των σπερματοζωαρίων ☻Ικανότητα κίνησης (ευλυγισία ουράς και pattern κίνησης). Αποκτάται από το μέσο του σώματος και προς την ουρά της επιδιδυμίδας

Επιδιδυμίδα: Ωρίμανση και αποθήκευση των σπερματοζωαρίων ☺ Έκκριση “immobilin” ή “quiescence factor” από το επιθήλιο της επιδιδυμίδας ☻ Αύξηση του cAMP ☺ Αλλαγές στη χρωματίνη (περαιτέρω συμπύκνωση) και στην κυτταρική μεμβράνη ☻ Μείωση των διαστάσεων του ακροσώματος ☺ Πρωτοπλασματικό σταγονίδιο -cytoplasmic droplet- (απώλεια) ☻ αφυδάτωση (τα δύο τελευταία δεν φαίνονται να έχουν – ως σήμερα – φυσιολογική σημασία) Τελικά, αποκτάται η «εν δυνάμει» γονιμοποιητική ικανότητα που πριν ΔΕΝ υπήρχε. Παρόλ’ αυτά δεν είναι ακόμη έτοιμα για γονιμοποίηση (ενεργοποίηση -capacitation- και υπερενεργοποίηση -hyperactivation)

Επιδιδυμίδα: αποθήκευση των σπερματοζωαρίων (70% όσων βρίσκονται στους εκφορητικούς πόρους) σε ευνοϊκό περιβάλλον Αν δεν πραγματοποιηθεί εκσπερμάτιση, τα σπερματοζωάρια αποβάλλονται με το ούρο Αν δεν αποβληθούν, «γηράσκουν»: α) χάνουν τη γονιμοποιητική ικανότητά τους β) χάνουν την κινητικότητά τους γ) καταστρέφονται και απορροφώνται Εκσπερμάτισμα μετά από μακρά αποχή έχει πολλά εκφυλισμένα σπερματοζωάρια

Μεταβολισμός στα σπερματοζωάρια Αποθήκες ATP στο σπερματοζωάριο Διπλός ρόλος cAMP: φωσφορυλίωση ATP αλλά και άλλων πρωτεϊνών σχετικών με την κίνηση Το σπερματοζωάριο δεν έχει τα σχετικά οργανύλλια, αλλά διαθέτει ένζυμα για το βασικό μεταβολισμό (γλυκόλυση, τρικαρβοξυλικός κύκλος, οξείδωση λιπαρών οξέων, μεταφορά ηλεκτρονίων...) Κύριο σάκχαρο η φρουκτόζη (αλλά και γλυκόζη, μαννόζη) Αναερόβια γλυκόλυση (...φρουκτόλυση...). Ρόλος σε Τ.Σ. Αερόβια γλυκόλυση (ενέργεια για κινητικότητα αλλά και αντλίες ιόντων)

Σπερματικοί πόροι

Επικουρικοί γεννητικοί αδένες Κυστεοειδείς αδένες (vesicular glands ή seminal vesicles) (όχι στα σαρκοφάγα) Υγρό αλκαλικό: περιέχει διττανθρακικά, κιτρικά ανιόντα, Κ, πρωτεϊνες, βιτ C, υδατάνθρακες (φρουκτόζη – όχι στον ίππο) Τεστοστερόνη: ρύθμιση παραγωγής φρουκτόζης Ρόλος: ενεργειακός και ρυθμιστικός. Αντιμικροβιακός παράγοντας (τουλάχιστον στον ταύρο) Κορμός Σμοκ και Hafez pp26 “Function” Κ-Ν pp1139 for details

Επικουρικοί γεννητικοί αδένες Προστάτης Μικρή συμμετοχή στον τελικό όγκο του εκσπερματίσματος Υγρό ελαφρώς όξινο: πρωτεολυτικά ένζυμα, κιτρικό οξύ, ρελαξίνη Anatomy: Hafez pp 26

Επικουρικοί γεννητικοί αδένες Βολβουρηθραίοι αδένες (όχι στο σκύλο) Βλεννώδες έκκριμα: σιαλικό οξύ, γαλακτόζη, άλλα σάκχαρα Πιθανό να καθαρίζουν την ουρήθρα και να διευκολύνουν τη δίοδο του σπέρματος Ζελατινώδες υγρό κάπρου

Πλάσμα του σπέρματος (η υγρή φάση του εκσπερματίσματος) ♂ θρεπτικές ουσίες για τα σπερματοζωάρια ♂ μεταβολισμός σπερματοζωαρίων ♂ καθαρισμός ουρήθρας ♂ λίπανση πέους και κόλπου ♂ εξουδετέρωση όξινου περιβάλλοντος του γεννητικού σωλήνα του θηλυκού Duke 686 Προφανώς μεγαλύτερη σημασία στην φυσική οχεία και στα είδη με κολπική εκσπερμάτιση (όχι τόση στον ίππο και στο χοίρο)

Κ – Ν, pp 1141 kai Smok pp494… ♂ Προσταγλανδίνες – κυρίως PGE και λιγότερες PGF ♂ Αντιμικροβιακές πρωτείνες;

Πλάσμα του σπέρματος (συνέχεια) Εποχική διακύμανση Ατομικές διαφορές Διαφορές από τη μία εκσπερμάτιση στην επόμενη Δράση πρωτεολυτικών ενζύμων Μεταβολισμός φρουκτόζης σε γαλακτικό οξύ

Αντανακλαστικό της στύσης Στύση: διαστολή αρτηριών και δευτερο-γενώς συμπίεση φλεβών ΚΝΣ: ιερό παρασυμπαθητικό (πυελικά νεύρα) Ερεθίσματα: διέγερση αισθητικών υποδο-χέων της βαλάνου (αιδοιικό νεύρο) / οπτικά, οσφρητικά και ακουστικά ερεθίσματα, εγκεφαλικές διεργασίες (μεταιχμιακό σύστημα και υποθάλαμος) Τοπικοί παράγοντες: ΝΟ και αγγειοκινη-τικό εντερικό πολυπεπτίδιο Σμοκ pp492

Αντανακλαστικό της εκσπερμάτισης Α) Κεντρομόλες ίνες: από το πέος (κυρίως) προς οσφυϊκή μοίρα ν.μ. (συμπαθητικά κέντρα) Φυγόκεντρες ίνες: συμπαθητικές ίνες προς επιδιδυμίδα, σπερματικό πόρο (το εκσπερμάτισμα φτάνει στην πυελική μοίρα της ουρήθρας), κυστεοειδείς αδένες και προστάτη

Β) Κεντρομόλες ίνες: Με το αιδοιϊκό νεύρο, στην ιερή μοίρα του ν. μ Β) Κεντρομόλες ίνες: Με το αιδοιϊκό νεύρο, στην ιερή μοίρα του ν.μ. Φυγόκεντρες ίνες: προς ουρηθραίο, ισχιοσηραγγώδη και βολβοσηραγγώδη μυ αυχένας ουροδόχου κύστης κλειστός Ηλεκτροδιεγέρτης

Διάρκεια εκσπερμάτισης Σκύλος: 5-20 (ή και 40)min (τμηματική) Κάπρος: 2-10 (ή και 20)min Ίππος: 10-15sec Ταύρος: 1 sec Κριός: 1 sec Γάτα: 1 sec Κάπρος – Eπιβήτορας: Εκσπερμάτιση στη μήτρα The dog will ejaculate the semen in three fractions. The first fraction is the presperm fraction, which is a small volume of clear fluid. The second fraction is a cloudy, sperm-rich fraction. During ejaculation of this second fraction, the dog will usually thrust vigorously. Prior to ejaculating the third fraction, which consists of clear prostatic fluid, the dog will usually dismount and attempt to step over the arm of the collector