实验 14 油菜籽品质分析 一、目的 通过操作练习，初步掌握用纸层析法测定 油菜籽中脂肪酸的组成和用氯化钯快速测定油 菜籽中硫代葡萄糖苷（以下简称硫苷）含量的 方法。

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1 实验 14 油菜籽品质分析 一、目的 通过操作练习，初步掌握用纸层析法测定 油菜籽中脂肪酸的组成和用氯化钯快速测定油 菜籽中硫代葡萄糖苷（以下简称硫苷）含量的 方法。

2 实验 14 油菜籽品质分析 二、内容说明 1 、纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成。

3 实验 14 油菜籽品质分析 二、内容说明 2 、氯化钯快速法测定油菜籽中硫苷。 油菜籽经粉碎后加入少量沸水，在接近沸腾 的水浴中提取，提取物在酸性条件下与氯化钯生 成有颜色复合体，依硫苷从多到少分别显出黑、 褐、桔黄、黄等四种颜色，颜色愈深，硫苷含量 愈高，反之含量愈低。

4 实验 14 油菜籽品质分析 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成 1 、用品： 三、所需用品和操作方法

5 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 - - （ 1 ）样品制备 编号： （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

6 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 - - （ 1 ）样品制备 取样 : 磨样： （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

7 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 - - （ 1 ）样品制备 酯化 : 6 － 8 小时 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

8 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 - - （ 1 ）样品制备 酸化 : 振摇 1 分钟， 静置分层。 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

9 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 -- （ 2 ）点样：在层析纸一边用铅笔画一 直线，编号。 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

10 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 -- （ 2 ）点样：将层析纸放入石蜡溶液中 浸透，取出晾干（使编号朝上） （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

11 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 -- （ 2 ）点样：在层析纸各编号处用针刺 一小孔，然后取样品上清液 10μl ，按编号顺序滴 入孔洞处。 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

12 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 （ 3 ）展开溶剂系统与条件 将点好样的层析纸固定在四脚架上（使编号 朝下），加入盛有醋酸溶液的长方形层析缸中。 醋酸溶液的多少以能浸泡层析纸但液面低于点样 处为宜。展开完毕，取出层析纸，晾干。 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

13 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 （ 3 ）展开溶剂系统与条件 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成 晾干取出层析纸 取出四脚架浸泡 固定层析纸

14 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 （ 4 ）显色： 将层析纸浸入醋酸溶液中， 40 分钟后取出。 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

15 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 （ 4 ）显色：用清水稍许冲洗再放入洁净瓷盘中，用 流水冲洗半小时左右。 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成 取出 冲洗

16 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 （ 4 ）显色：取出 → 40 ℃下干燥。 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

17 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 （ 4 ）显色：层析纸在红氨酸溶液中一带而过. （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

18 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 （ 4 ）显色：湘油 11 号和 Oro 等无芥酸品种则芥酸位 置不显谱带。层析图谱带顺序自上而下为 : 亚麻酸 亚油酸 油酸花 生烯酸 芥酸 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

19 实验 14 油菜籽品质分析 2 ．操作方法 （ 4 ）显色 （一）纸层析法测定油菜籽中脂肪酸组成

20 实验 14 油菜籽品质分析 1 、用品 低硫苷品种种子、高硫苷品种种子 显色盘 定量加液器 电热恒温水浴锅 0.5mol 氯化钯基本液 四氯化钯钠测定液 （二）氯化钯快速测定油菜籽中硫苷

21 实验 14 油菜籽品质分析 2 、方法 （ 1 ） 称取 0.2g 种子，研碎后加水 4ml ，装入试管中。 （二）氯化钯快速测定油菜籽中硫苷

22 实验 14 油菜籽品质分析 2 、方法 （ 2 ）将试管置于 90 ℃水浴中提取 30 分钟取出。 （二）氯化钯快速测定油菜籽中硫苷

23 实验 14 油菜籽品质分析 （ 3 ） 吸取 15μl 提取液入比色盘中，同时以蒸馏水作对照。 （二）氯化钯快速测定油菜籽中硫苷

24 实验 14 油菜籽品质分析 （ 3 ） 加入四氯化钯钠液 0.2ml （二）氯化钯快速测定油菜籽中硫苷

25 实验 14 油菜籽品质分析 （ 3 ） 在 40 ℃条件下放置 30 分钟，使颜色复合体充分形 成。 （二）氯化钯快速测定油菜籽中硫苷

26 实验 14 油菜籽品质分析 （ 4 ） 根据颜色复合体所显示出的黑、褐、桔黄、黄四 种颜色，判断硫苷含量高低。 比色 → （二）氯化钯快速测定油菜籽中硫苷

27 实验 14 油菜籽品质分析 四、 作业 1 、测定各供试品种芥酸和硫苷含量的有无，并指出哪些油菜 品种是低芥酸品种，哪些是低硫苷品种，哪些是双低（ 低芥酸、低硫苷）品种？ 2 、在测定中你认为哪些环节对取得好的结果最为重要？