Απομόνωση νουκλεϊκών οξέων

Παρουσίαση με θέμα: "Απομόνωση νουκλεϊκών οξέων"— Μεταγράφημα παρουσίασης:

1 Απομόνωση νουκλεϊκών οξέων
Άσκηση 1 εργαστηριακού οδηγού Γ ΤΑΞΗ ΛΥΚΕΙΟΥ Βιολογία Κατεύθυνσης

2 Όργανα και υλικά για το πείραμα

3 Πορεία του πειράματος Παίρνουμε μισή μπανάνα και την πολτοποιούμε μέσα
στο σακουλάκι, πιέζοντας με το χέρι μας

4 Φτιάχνουμε το διάλυμα εκχύλισης DNA
Σε ποτήρι ζέσεως των 500ml βάζουμε 25ml απορρυπαντικό, όχι συμπυκνωμένο και προσθέτουμε 7,5 gr μαγειρικό αλάτι συμπληρώνουμε με 450 ml νερό και ανακατεύουμε χωρίς να προκαλέσουμε έντονο αφρισμό Σημείωση: Το διάλυμα αυτό είναι αρκετό για 50 εκχυλίσεις

5 Προσθέτουμε 2 κουταλάκια διαλύματος εκχύλισης DNA
στο σακουλάκι με την πολτοποιημένη μπανάνα

6 Πιέζουμε το μίγμα με το χέρι μας για ένα λεπτό
Το απορρυπαντικό δεσμεύει τις πρωτεΐνες και τα λιπίδια της κυτταρικής μεμβράνης με αποτέλεσμα, τη θραύση των μεμβρανών και την απελευθέρωση του DNA

7 Τοποθετούμε ένα χωνί σε ένα
δοκιμαστικό σωλήνα και βάζουμε μία γάζα μέσα στο χωνί. Ρίχνουμε το μίγμα απορρυπαντι- κό – πολτοποιημένη μπανάνα στη γάζα και φιλτράρουμε το μίγμα μέσα στο σωλήνα.

8 Στάζουμε 2-3 σταγόνες υγρού φακών επαφής ανακινώντας
ΠΡΟΑΙΡΕΤΙΚΑ: Στάζουμε 2-3 σταγόνες υγρού φακών επαφής ανακινώντας ελαφρά Το υγρό των φακών επαφής περιέχει ένζυμα που διασπούν τις πρωτεΐνες (ιστόνες) με τις οποίες πακετάρεται το DNA. Μπορούμε να χρησιμοποιήσουμε και χυμό ανανά ή πεψίνη εφόσον υπάρχει.

9 Πως μπορούμε να παγώσουμε την αλκοόλη και να την
διατηρήσουμε χωρίς ψυγείο!!! Σε ποτήρι ζέσεως των 500ml βάζουμε αλάτι, λίγο πιο κάτω από την μέση. Προσθέτουμε λίγο νερό, ίσα που να καλύψει το αλάτι και συμπληρώνουμε με παγάκια. Τοποθετούμε τον δοκιμαστικό σωλήνα με το οινόπνευμα μέσα στο ποτήρι και σε λίγο έχουμε παγωμένη αλκόόλη -20ο C

10 Προσθέτουμε με προσοχή
το παγωμένο οινόπνευμα (-20oC) στο σωλήνα με το φιλτραρισμένο υλικό της μπανάνας μέχρι να γεμίσει περίπου ως τη μέση και να σχηματίσει μία δεύτερη στοιβάδα πάνω από το φιλτραρισμένο υλικό. Τοποθετούμε τον δοκιμαστικό σωλήνα στο στήριγμα και περιμένουμε 2-3 λεπτά.

11 Τα νουκλεϊκά οξέα συγκεντρώνονται στην επιφάνεια επαφής διαλύματος/αιθανόλης και «ανεβαίνουν».
DNA Οι φυσαλίδες οφείλονται στον αέρα που ελευθερώνεται καθώς ζεσταίνεται η αλκοόλη

12 Μπορούμε να συλλέξουμε το DNA με μια ξύλινη ράβδο.