1 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας Ενότητα 3 : Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών Γεώργιος Παπαδόπουλος Ελληνική Δημοκρατία Τεχνολογικό Εκπαιδευτικό Ίδρυμα Ηπείρου

2 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Τμήμα Τεχνολόγων Γεωπόνων Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας Ενότητα 3: Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών Γεώργιος Παπαδόπουλος Καθηγητής Άρτα, 2015 Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου

3 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Άδειες Χρήσης Το παρόν εκπαιδευτικό υλικό υπόκειται σε άδειες χρήσης Creative Commons. Για εκπαιδευτικό υλικό, όπως εικόνες, που υπόκειται σε άλλου τύπου άδειας χρήσης, η άδεια χρήσης αναφέρεται ρητώς. 3

4 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Χρηματοδότηση Το έργο υλοποιείται στο πλαίσιο του Επιχειρησιακού Προγράμματος «Εκπαίδευση και Δια Βίου Μάθηση» και συγχρηματοδοτείται από την Ευρωπαϊκή Ένωση (Ευρωπαϊκό Κοινωνικό Ταμείο) και από εθνικούς πόρους. Το έργο «Ανοικτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο TEI Ηπείρου» έχει χρηματοδοτήσει μόνο τη αναδιαμόρφωση του εκπαιδευτικού υλικού. Το παρόν εκπαιδευτικό υλικό έχει αναπτυχθεί στα πλαίσια του εκπαιδευτικού έργου του διδάσκοντα.

5 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Συγκέντρωση των πρωτεϊνών Έχει μεγάλη σημασία να μπορούμε να προσδιορίσουμε τη συγκέντρωση των πρωτεϊνών, είτε ως σύνολο είτε τη κάθε μια ξεχωριστά, σε ένα οποιοδή-ποτε παρασκεύασμα, βιολογικό υγρό, ιστό ή σύνολο κυττάρων. Τόσο σε ένα σύνολο πολλών και διαφορετικών πρωτεϊνών, όσο και όταν έχουμε μια και μόνο πρωτεΐνη (σε διάλυμα) σε καθαρή μορφή. 5

6 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Πρωτεΐνες Οι πρωτεΐνες 50 χρόνια πριν, και παλαιότερα, ονομαζόταν και λευκώματα, μάλιστα η κυριότερη πρωτεΐνη στο πλάσμα αίματος ζώων λέγεται λευκωματίνη, επειδή έχει άσπρο χρώμα, σε αντίθεση με την κύρια πρωτεΐνη των ερυθρών αιμοσφαιρίων, την αιμοσφαιρίνη, που έχει κόκκινο χρώμα. Μάλιστα, ακούμε και σήμερα κόσμο να λέει ότι έχει λεύκωμα στα ούρα, δηλ. πρωτεΐνη στα ούρα, πράγμα που σημαίνει ότι το φίλτρο του αίματος, που είναι οι νεφροί, δεν λειτουργεί τόσο καλά. 6

7 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Λευκωματίνη 7 Α. Β. Εικόνα 1. Α. Τριδιάστατη δομή βόειας λευκωματίνης ορού και Β. ανθρώπινης λευκωματίνης ορού. Υπάρχει μία μόνον πολυπεπτιδική αλυσίδα που αποτελείται από 7 δομικές περιοχές (με τρεις α-έλικες η κάθε μια), με διαφορετικό χρώμα για τη κάθε δομική περιοχή: κόκκινη, πορτοκαλί, λαδί, πράσινη, ανοιχτή πράσινη, πετρόλ, μπλε. Η βιολογική λειτουργία της λευκωματίνης είναι η ωσμωτική ισορροπία και η μεταφορά λιπαρών οξέων και άλλων σχετικά λιπόφιλων ουσιών μέσω της κυκλοφορίας του αίματος. Στην Β. με λίγη προσπάθεια μπορείτε να διακρίνετε αλυσίδες μυριστικού οξέος (επίμηκες λιπαρό οξύ) και τρι-ιωδοβενζοϊκού οξέος (αρωματικός δακτύλιος), χαρακτηριστιές των ουσιών που μεταφέρονται από τη λευκωματίνη.

8 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Τρόποι μέτρησης των πρωτεϊνών Οι τρόποι μέτρησης των πρωτεϊνών που αναπτύχθηκαν είναι πάρα πολλοί, εμείς θα εστιάσουμε τη προσοχή μας σε έναν που έχει καταστεί πολύ δημοφιλής εξ αιτίας της απλότητάς του. Η μέθοδος ονομάζεται Μέθοδος Bradford, από τον επιστήμονα που την επινόησε, και υπάρχει μια εταιρεία η οποία έχει και εμπορικό αντιδραστήριο που επιτρέπει την διεξαγωγή αυτής της μεθόδου. 8

9 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Βιβλιογραφία 1. J. Clark, R. Switzer. Πειραματική Βιοχημεία. 2 η έκδοση. Πανεπιστημιακές Εκδόσεις Κρήτης, Ηράκλειο J.M. Berg, J.L Tymozcko., L.Sryer, Βιοχημεία, 5 η έκδοση, Πανεπιστημιακές Εκδόσεις Κρήτης, Ηράκλειο Γρ. Χ. Διαμαντίδη, Εισαγωγή στη Βιοχημεία, 3 η έκδοση, University Studio Press, Θεσσαλονίκη, Άσκηση 3 στο Εργαστήριο Γεωργικής Χημείας: Μέτρηση του pH. E-class, Dir=/52678eb6ccy1 Dir=/52678eb6ccy1

1010 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου 10 Διατήρηση Σημειωμάτων Οποιαδήποτε αναπαραγωγή ή διασκευή του υλικού θα πρέπει να συμπεριλαμβάνει: το Σημείωμα Αναφοράς το Σημείωμα Αδειοδότησης τη Δήλωση Διατήρησης Σημειωμάτων το Σημείωμα Χρήσης Έργων Τρίτων (εφόσον υπάρχει) μαζί με τους συνοδευόμενους υπερσυνδέσμους.

1 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου 11 Σημείωμα Αναφοράς Παπαδόπουλος, Γ. Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας. Τεχνολογικό Ίδρυμα Ηπείρου. Διαθέσιμο από:

1212 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Σημείωμα Αδειοδότησης Το παρόν υλικό διατίθεται με τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Αναφορά Δημιουργού-Μη Εμπορική Χρήση-Όχι Παράγωγα Έργα 4.0 Διεθνές [1] ή μεταγενέστερη. Εξαιρούνται τα αυτοτελή έργα τρίτων π.χ. φωτογραφίες, Διαγράμματα κ.λ.π., τα οποία εμπεριέχονται σε αυτό και τα οποία αναφέρονται μαζί με τους όρους χρήσης τους στο «Σημείωμα Χρήσης Έργων Τρίτων». [1] Ο δικαιούχος μπορεί να παρέχει στον αδειοδόχο ξεχωριστή άδεια να χρησιμοποιεί το έργο για εμπορική χρήση, εφόσον αυτό του ζητηθεί.

1313 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Τέλος Ενότητας Επεξεργασία: Αντώνιος Σακελλάριος Άρτα, 2015

1414 Βιοχημεία - Αρχές Βιοτεχνολογίας - Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών, Τμήμα Τεχνολόγων γεωπόνων, ΤΕΙ ΗΠΕΙΡΟΥ - Ανοιχτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο ΤΕΙ Ηπείρου Τέλος Ενότητας Προσδιορισμός συγκέντρωσης πρωτεϊνών