Ανοσολογία του καρκίνου Ανοσοθεραπεία ΑΝΟΣΟΛΟΓΙΑ 38, 39 / 16 & 18-1-2012 Ρ. Τσιτσιλώνη.

Παρουσίαση με θέμα: "Ανοσολογία του καρκίνου Ανοσοθεραπεία ΑΝΟΣΟΛΟΓΙΑ 38, 39 / 16 & 18-1-2012 Ρ. Τσιτσιλώνη."— Μεταγράφημα παρουσίασης:

1 Ανοσολογία του καρκίνου Ανοσοθεραπεία ΑΝΟΣΟΛΟΓΙΑ 38, 39 / 16 & 18-1-2012 Ρ. Τσιτσιλώνη

2 Ανάπτυξη των όγκων και μετάστασή τους

3 Η μοριακή βάση δημιουργίας καρκίνου

4 Μοντέλο διαδοχικών γενετικών αλλοιώσεων σε μεταστατικό καρκίνο του εντέρου MCCMSH2MLH1PMS1/2GTBPMCCMSH2MLH1PMS1/2GTBP Fearon, 1992

5 Κάποιοι ιοί προκαλούν κακοήθη μετασχηματισμό των κυττάρων Ανθρώπινοι καρκίνοι σχετιζόμενοι με ιικές λοιμώξεις: Τ κυτταρικές λευχαιμίες/λεμφώματα :  Τ κυτταρικές λευχαιμίες/λεμφώματα : HTLV-1 (human T-cell leukemia virus 1)  σάρκωμα Καposi : HHV-8 (human herpes virus 8) & HIV-1  καρκίνος του τραχήλου της μήτρας : HPV (human papillomavirus)  ηπατοκυτταρικός καρκίνος : HBV (hepatitis B virus) & HCV (hepatitis C virus)  λέμφωμα Burkitt : EBV (Epstein-Barr virus)

6 Κύριοι σταθμοί στην Ανοσολογία του Καρκίνου 1965: # immunological memory for cancer cells (mice) # immune surveillance-recognition and destruction of non-self tumor cells on their appearance 1908: positive mechanism eliminating transformed cells 1970: lymphocytes can kill autologous melanoma cells 1991: cloning of the first tumor antigen (Belgium) 2003: therapeutic & prophylactic vaccines in the market

7 Θεραπεία καρκινοπαθών με ζωντανά βακτήρια Coley, 1893; Ahiwar et al., 2011 BCG ?

8 1965: # immunological memory for cancer cells (mice) # immune surveillance-recognition and destruction of non-self tumor cells on their appearance 1908: positive mechanism eliminating transformed cells 1970: lymphocytes can kill autologous melanoma cells 1991: cloning of the first tumor antigen (Belgium) 2003: therapeutic & prophylactic vaccines in the market Κύριοι σταθμοί στην Ανοσολογία του Καρκίνου

9 KILLED TUMOR CELLS VIABLE TUMOR CELLS νοσολογική μνήμη για τα καρκινικά κύτταρα Α νοσολογική μνήμη για τα καρκινικά κύτταρα Mitchison, 1967

10 1965: # immunological memory for cancer cells (mice) # immune surveillance-recognition and destruction of non-self tumor cells on their appearance 1908: positive mechanism eliminating transformed cells 1970: lymphocytes can kill autologous melanoma cells 1991: cloning of the first tumor antigen (Belgium) 2003: therapeutic & prophylactic vaccines in the market Κύριοι σταθμοί στην Ανοσολογία του Καρκίνου

11 Τα λεμφοκύτταρα «εκπαιδεύονται» για να λύουν καρκινικά κύτταρα tumor cells from melanoma patient lymphocytes from the same melanoma patient MLTC for one week recovered lymphocytes can kill melanoma cells recovered lymphocytes can proliferate Parmiani et al, 1971

12 1965: # immunological memory for cancer cells (mice) # immune surveillance-recognition and destruction of non-self tumor cells on their appearance 1908: positive mechanism eliminating transformed cells 1970: lymphocytes can kill autologous melanoma cells 1991: cloning of the first tumor antigen (Belgium) 2003: therapeutic & prophylactic vaccines in the market Κύριοι σταθμοί στην Ανοσολογία του Καρκίνου

13 Κλωνοποίηση του πρώτου καρκινικού αντιγόνου Van den Eynde et al, 1991 CTL 2 CTL 1 Τu 1 Τu 3 Τu 2 CTL 3 1. CTL generation CTL 1 + CTL 2 + CTL 3 + CTL 4 + Lysis Lysis Lysis No lysis CTL sensitive CTL resistant 2. Screening 3. Transduce eukaryotic cells or bacteria with tumor cDNA libraries 4. Test for lysis by CTL 5. Clone Ag by direct packaging in λ-phages 1st human tumor antigen = MAGE-1 (melanoma)

14 1965: # immunological memory for cancer cells (mice) # immune surveillance-recognition and destruction of non-self tumor cells on their appearance 1908: positive mechanism eliminating transformed cells 1970: lymphocytes can kill autologous melanoma cells 1991: cloning of the first tumor antigen (Belgium) 2003: therapeutic & prophylactic vaccines in the market Κύριοι σταθμοί στην Ανοσολογία του Καρκίνου

15 Εμπορικά διαθέσιμα αντικαρκινικά εμβόλια Prophylactic Therapeutic  Melacine (human melanoma) 10-20 % OR  Canvacine (human melanoma) ?  mAbs (Herceptin, rituximab, mylotarg, etc)  Sipuleucel-T, ProstVac (prostate cancer)  Gardasil (h. cervical cancer)  HBV vaccine (liver cancer) ?  mucin I (colon cancer) ?  breast cancer? pancreatic cancer? Finn OJ, 2003; Gulley et al., 2011

16 Η φύση των καρκινικών αντιγόνων a.Ογκοειδικά αντιγόνα (tumor specific antigens; TSA) παρόντα μόνο στα καρκινικά κύτταρα γονίδια που εκφράζονται ειδικά από τους όγκους φυσιολογικά γονίδια που έχουν υποστεί μεταλλάξεις b. Ογκοσχετιζόμενα αντιγόνα (tumor associated antigens; TAA) παρόντα στα καρκινικά κύτταρα και σε μερικά φυσιολογικά κύτταρα φυσιολογικά εκφράζονται σε άλλα στάδια διαφοροποίησης μεταλλαγμένες πρωτεΐνες υπερεκφραζόμενες πρωτεΐνες

17 Μηχανισμοί δημιουργίας καρκινικών αντιγόνων (or specific gene expression) (or expression of mutated protein)

18 Ταυτοποίηση καρκινικών αντιγόνων (γενετική προσέγγιση)

19 Ταυτοποίηση καρκινικών αντιγόνων (βιοχημική προσέγγιση)

20 Τύποι καρκινικών αντιγόνων που αναγνωρίζονται από Τ κύτταρα

21 πρωτο-ογκογονίδια ογκοκατασταλτικά αποκατάσταση DNA απόπτωση

22 Tα Τ κύτταρα «βλέπουν» το εσωτερικό του καρκινικού κυττάρου Berzofsky et al, 2004

23 I. A tumor cell must: express MHC class I & class II molecules  express MHC class I & class II molecules  increased levels of antigen expression (40.000 vs 400 copies)  express costimulatory signals & adhesion molecules  produce & secrete cytokines (to differentiate and activate lymphocytes to effector cells) lymphocytes to effector cells) II. A cancer patient must: possess the relevant T cell clones that recognize cancer antigens  possess the relevant T cell clones that recognize cancer antigens & self MHC molecules (directly on tumor cells or indirectly & self MHC molecules (directly on tumor cells or indirectly on host’s APC) on host’s APC) Αναγνώριση καρκινικών Ags από τα Τ κύτταρα

24 Χαμηλή πυκνότητα έκφρασης MHC μορίων

25 Υψηλή πυκνότητα έκφρασης MHC μορίων

26 A P C T cell MHC class II TCR co-stimulatorB7-1B7-2 12 CD4 ACTIVATES T CELLS T cell proliferation Η ανάγκη συνδιεγερτικών σημάτων CD28

27 “TWO-SIGNAL MODEL” 1 st SIGNAL is delivered to the TCR and is Ag-specific and MHC restricted 2 nd SIGNAL is delivered by costimulatory receptors of the B7 family of molecules APC/Ca cell T cell MHC class II TCR co-stimulationB7-1B7-2 12 CD4 IMMUNITY T cell MHC class II TCR 1 CD4 ANERGY Η σημασία του 2ου σήματος ? APC/Ca cell

28 Σημαντικά σήματα για βέλτιστη παρουσίαση αντιγόνων MHC class II TCRTCR co-stimulator B7-1 (CD80) B7-2 (CD86) co-stimulator B7-1 (CD80) B7-2 (CD86) 1 2 CD4 p56 lck IFN-γ GMC-SFIL-4 TNFβ IL-1IL-6 TNFα IL-12 IL-15 LFA-1LFA-1 CD2CD2 ICAM-1ICAM-1 LFA-3LFA-3 CD28CD28

29 I. A tumor cell must: express MHC class I + class II molecules  express MHC class I + class II molecules  increased levels of antigen expression (40.000 vs 400 copies)  express costimulatory signals & adhesion molecules  produce & secrete cytokines (to differentiate and activate lymphocytes to effector cells) lymphocytes to effector cells) II. A cancer patient must: possess the relevant T cell clones that recognize cancer antigens  possess the relevant T cell clones that recognize cancer antigens & self MHC molecules (directly on tumor cells or indirectly & self MHC molecules (directly on tumor cells or indirectly on host’s APC) on host’s APC) Αναγνώριση καρκινικών Ags από τα Τ κύτταρα

30 Επαγωγή CD8+ Τ κυτταρικών απαντήσεων κατά όγκων Cross-priming

31 Κυτταρικοί υποπληθυσμοί που λύουν καρκινικά κύτταρα Αναγνώριση καρκινικών κυττάρων από λεμφοκύτταρα ειδική (peptide-mediated MHC-restricted) μη ειδική ΝΚ κύτταρα CIK κύτταρα ΝΚ-Τ κύτταρα μακροφάγα T λεμφοκύτταρα (CTL, TIL)

32 CΤLCΤLCΤLCΤL εξωκυττάρωση λυτικών κυστιδίων απελευθέρωση περφορίνης και granzymes επαγωγή φαινομένων απόπτωσης Tumor cell Eκκριτικός μηχανισμός κυτταροτοξικότητας Eκκριτικός μηχανισμός κυτταροτοξικότητας

33 CΤLCΤLCΤLCΤL Μη εκκριτικός μηχανισμός κυτταροτοξικότητας, Fas-Fas Ligand Μη εκκριτικός μηχανισμός κυτταροτοξικότητας, Fas-Fas Ligand A) Το μόριο Fas (CD95, Apo-1) είναι μια διαμεμβρανική γλυκοπρωτεΐνη με τρεις κυτταροπλασματικές υπομονάδες που περιέχουν αλληλουχίες DD (Death Domains) B) Η σύνδεση του FasL με το Fas οδηγεί στη δημιουργία του συμπλόκου επαγωγής κυτταρικού θανάτου (Death Inducing Signalling Complex) Σύνδεση FADD (Fas Associated protein with Death Domains) με Fas (DD-DD αλληλεπιδράσεις) Σύνδεση προκασπάσης-8 με FADD (DED-DED αλληλεπιδράσεις)

34 Κυτταρικοί υποπληθυσμοί που λύουν καρκινικά κύτταρα Αναγνώριση καρκινικών κυττάρων από λεμφοκύτταρα ειδική (peptide-mediated MHC-restricted) μη ειδική ΝΚ κύτταρα CIK κύτταρα ΝΚ-Τ κύτταρα μακροφάγα T λεμφοκύτταρα (CTL, TIL)

35 -- ++ -- ++ ++ ++ -- -- -- ++ KIR: Inhibitory ReceptorKAR: Activating Receptor AL: Activating Ligand Δύο τύποι υποδοχέων στα ΝΚ κύτταραNK

36 τα ΝΚ-T διαθέτουν υποδοχείς που χαρακτηρίζουν τα ΝΚ, αλλά και τον Τ κυτταρικό υποδοχέα (TCR) αναγνωρίζουν αντιγόνα στην επιφάνεια καρκινικών κυττάρων με τη βοήθεια του TCR, ενεργοποιούνται άμεσα και παράγουν περφορίνη και granzymes αναγνωρίζουν αντιγόνα στην επιφάνεια αντιγονοπαρουσια- στικών κυττάρων, ενεργοποιούνται και παράγουν IFN-γ, που με τη σειρά της ενεργοποιεί τα ΝΚ ώστε να εκδηλώσουν κυτταροτοξική δράση NK-T κύτταρα (CD56+ CD3+)NKΤ

37 NK-Τ ΝΚΤΝΚΤ ΝΚΝΚ IFN-γ perforinreleaseperforinreleaseperforinreleaseperforinrelease MICMIC NKG-2DNKG-2D DAP10-DAP10DAP10-DAP10 MHCI,CD1dMHCI,CD1d peptide or glycolipidligands(a-Gal-Cer) glycolipidligands(a-Gal-Cer) TCRTCR Αμεση αναγνώριση καρκινικού κυττάρου από ΝΚ-Τ κύτταρα

38 NK-Τ Έμμεση αναγνώριση καρκινικού κυττάρου από ΝΚ-Τ κύτταρα ΜΦΜΦ ΝΚΝΚ ΝΚΤΝΚΤ perforinreleaseperforinrelease IFN-γ shedded tumor Ag MICMIC NKG-2DNKG-2D DAP10-DAP10DAP10-DAP10 a-Gal-Cera-Gal-Cer TCRTCR CD1dCD1d

39 Μακροφάγα (TNF-α)

40 Τρόποι διαφυγής των καρκινικών κυττάρων από την ανοσοεπιτήρηση

41 Frequency of HLA class I antigen loss or down-regulation in various human cancers

42 Frequency of TAP loss or down-regulation in various human cancers

43   

44 Abnormal expression of adhesion or accessory molecules Changes in T cell signal transduction molecules Anergy induction or clonal deletion of responding cells Utilization of products of tumor- stimulated leukocytes for tumor cell growth Inhibition of NK-activity by the absence of activating ligands and/or presence of inhibitory receptors Failure to express MHC antigen Induction of suppressor (regulatory) cells Occurence in immuno suppressed hosts Decrease of and heterogeneity of TAA expression Secretion of immune -downregulatory soluble factors Σύνοψη των μηχανισμών διαφυγής καρκινικών κυττάρων από την ανοσοεπιτήρηση

45 Ανοσοθεραπεία του καρκίνου

46 Μεσολαβητές της ανοσολογικής άμυνας Antigen specific Non- specific macrophages NK cells cytokines antibodies T cells rec. cytokines rec. cytokines cocktails cocktails transfer of Abs transfer of Abs tumor-specific T cells tumor-specific T cells vaccines vaccines allogeneic stem cell allogeneic stem cell transplantation transplantation non-specific non-specific immunostimulators immunostimulators bacteria bacteria bacterial components bacterial components

47 Ανοσοθεραπεία του Καρκίνου 1. Ενεργός ανοσοποίηση (εμβολιασμός) 2. Παθητική ανοσοθεραπεία ή ανοσοθεραπεία με μεταφορά (επαναλαμβανόμενες εγχύσεις ex vivo ενεργοποιημένων κυττάρων, αντισωμάτων ή κυτταροκινών) 3. Γονιδιακή θεραπεία («εξοπλισμός» του κυττάρου με ελαττωματική έκφραση μορίων ή λειτουργίες) 3 βασικές μέθοδοι

48 Active Immunization (Vaccines) Cellular vaccination (whole tumor cell lysates) ? Cellular vaccination (whole tumor cell lysates) ? Use of defined tumor antigens ? (+cytokines? modified?) Use of defined tumor antigens ? (+cytokines? modified?) Dendritic cells as APC Dendritic cells as APC Adoptive Immunotherapy LAK immunotherapy LAK immunotherapy TIL immunotherapy TIL immunotherapy Cytokines Cytokines Monoclonal antibodies Monoclonal antibodies Κλινικές θεραπείες στην Ανοσοθεραπεία του Καρκίνου

49 Τρόποι Ανοσοθεραπείας του καρκίνου Καρκινικά αντιγόνα (DC + πεπτίδια) Καρκινικά αντιγόνα (DC + cDNA) Καρκινικά αντιγόνα (Ca cell + συνδιεγέρτες)

50 Ανοσοθεραπεία με καρκινικά αντιγόνα

51 Ογκοσχετιζόμενα Ag (ΤΑΑ) ως εμβόλια Phase II study with melanoma pts Peptide used: gp-100 (209-217) Vaccine: 1.0 mg peptide in IFA, sc Protocol Vac: #1#2 in vitro assays #3 #4#5 Days: 012 + 2122 + 28 3542 +: iv injections of IL-2 every 8 h (6-10 doses) CTLmemory clinical outcome Peptide +++ - 17 % CR+PR Peptide+IL-2 + ++ 31 % CR+PR

52 Τροποποίηση συνθετικών πεπτιδίων (gp100) για τη θεραπεία ασθενών με μελάνωμα gp100 209-217 : 1 2 3 4 5 6 7 8 9 gp100 209-217 : 1 2 3 4 5 6 7 8 9 I T D Q V P F S Vwild type I T D Q V P F S Vwild type I M D Q V P F S V I M D Q V P F S V modified gp100 209-217(M) vs. gp100 209-217(wt) : in vitro studies: 9-fold better binding to HLA-A*201 9-fold better binding to HLA-A*201 higher levels of IFN-γ and GM-CSF production by gp100 209-217(M) – specific T cell clones higher levels of IFN-γ and GM-CSF production by gp100 209-217(M) – specific T cell clones Clinical studies (melanoma patients) VaccinationReactivity in vitro (%) to Clinical objective responses (%) gp100(wt)gp100(M) gp100 (wt) +IFA+IL-2 202510 gp100 (M) +IFA+IL-2 809042

53 Monocyte selection GM-CSFIL-4 Immature DCs TNF-α Antigen loading Mature DCs PBMC Τα δενδριτικά κύτταρα ως “οχήματα”Ag Reinfuse in patient

54 General Protocol day –10:FLT3 day –10:FLT3 days 0 and 28:Leucapheresis days 0 and 28:Leucapheresis days 7 and 33:DC vaccination days 7 and 33:DC vaccination day 58 and on: Follow-up day 58 and on: Follow-up CTL-PRECTL-POST CEA + -CTL- PRE CEA + -CTL- POST CEA + -CTL FOLD EXPANSION CR (n=4)3-5 %26-38 %0,28-0,40 %1,03-1,15 %2,6-3,7 PD (n=7)3-12 %0-43 %0,03-0,26 %0,04-0,50 %0-1,1 SD (n=2)5-8 %33-41 %0,15-0,43 %1,05-1,11 %2,4-7,4 CEA-pulsed DCs used for vaccination of CEA + tumor patients

55 Sipuleucel-T: Μηχανισμός δράσης

56  απομόνωση κυττάρων περιφερικού αίματος καρκινοπαθών  καλλιέργεια με υψηλές συγκεντρώσεις ιντερλευκίνης- 2 (IL-2)  επιστροφή των ενεργοποιημένων κυττάρων στον ασθενή, σε συνδυασμό με IL-2 ή χημειοθεραπευτικά φάρμακα  προέρχονται κυρίως από πληθυσμούς ΝΚ κυττάρων και αναπτύσσουν μη ειδική κυτταροτοξική δράση LAK KYTTAPA

57 Γενικό πρωτόκολλο ανοσοθεραπείας με LAK

58  απομόνωση κυττάρων περιφερικού αίματος καρκινοπαθών  καλλιέργεια με ιντερφερόνη-γ (IFN-γ)  περαιτέρω καλλιέργεια με α-CD3 μονοκλωνικό αντίσωμα, IL-2, IL-1α  προέρχονται κυρίως από πληθυσμούς ΝΚ-Τ κυττάρων (CD56+CD3+) CIK KYTTAPA

59 CYTOKINE-INDUCED KILLER CELLS IN VIVO CYTOTOXIC ACTIVITY COMPARED TO LAK CELLS % survival Days

60 Tumor is resected and placed in tissue culture Gene The growing tumor cells are genetically altered with immunostimulatory genes Cells are reinjected subcutaneously after irradiation GENE IMMUNOTHERAPY (genetic modification of tumor cells)

61 Ανοσοθεραπεία με διαμόλυνση καρκινικών κυττάρων (γονιδιακή θεραπεία) γονίδιο συνδιεγερτικού μορίου (Β7) γονίδιο aυξητικού παράγοντα (GM-CSF)

62 MHC class II TCR CD4 p56 lck CD8 MHC class I p56 lck TCR IL-4 GM-CSF Διαμόλυνση καρκινικών κυττάρων (με γονίδια της IL-4 και του GM-CSF)

63 TCR CD4 p56 lck CD8 TCR B7 CD28 B7 CD28 IL-2IL-2 Διαμόλυνση καρκινικών κυττάρων (με γονίδια της IL-2 και του μορίου B7)

64 Presentation of Ag expressed by the tumor cell in concert with costimulating capabilities of DCs B7 MHC II MHC I Adhesionmolecule MHC II B7 Adhesionmolecule AdhesionmoleculeB7 Adhesionmolecule MHC I Dendritic cell-tumor cell fusion (Tu-DC hybrids)

65 Aνοσοενισχυτικοί παράγοντες Interferon-α: melanoma, renal carcinoma, hairy cell leukemia, CML Interferon-α: melanoma, renal carcinoma, hairy cell leukemia, CML Interleukin-2: melanoma, renal cell carcinoma, ALL, CLL, non-Hodkin’s lymphoma Interleukin-2: melanoma, renal cell carcinoma, ALL, CLL, non-Hodkin’s lymphoma GM-CSF: melanoma GM-CSF: melanoma TNF-α, IL-3, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-β, IFN-γ TNF-α, IL-3, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-β, IFN-γ BCG, alum, CpG oligos BCG, alum, CpG oligos Thymic peptides: thymic fraction V, thymosin α1, prothymosin α Thymic peptides: thymic fraction V, thymosin α1, prothymosin α

66  γυμνά (naked) μονοκλωνικά αντισώματα  αντισώματα εναντίον καρκινικών αντιγόνων σχηματίζουν σύμπλοκα με τοξικούς παράγοντες  διειδικά αντισώματα (Bispecific antibodies)  διαντισώματα (Diabodies) Ανοσοθεραπεία με αντισώματα

67 Χρήση Αντισωμάτων στην Ανοσοθεραπεία του Καρκίνου A d v a n t a g e s Easy production of monoclonal antibodies Easy production of monoclonal antibodies High affinity for antigen High affinity for antigen MHC-unrestricted binding capacity MHC-unrestricted binding capacity Induction of immune effector functions Induction of immune effector functions a. complement-dependent cytotoxicity (CDC) b. cellular-dependent cytotoxicity (ADCC)

68 D i s a d v a n t a g e s Development of human anti-mouse antibodies (generation of humanized or human mAb) Development of human anti-mouse antibodies (generation of humanized or human mAb) Low half-life Low half-life Low tissue penetration Low tissue penetration Low immunostimulation Low immunostimulation Not always cytotoxic Not always cytotoxic Χρήση Αντισωμάτων στην Ανοσοθεραπεία του Καρκίνου

69 antibody dependent cellular cytotoxicity (ADCC) complement dependent cytotoxicity (CDC) Effector cell Tumor cell CR1 C1qH CR3 FcγR Γυμνά αντισώματα: Μηχανισμός δράσης

70 Συζεύγματα αντισωμάτων macrophage NK naked mAb tumortumor mAb-RicinconjugatemAb-Ricinconjugate active drug pro-drugpro-drug enzyme mAb-isotopeconjugatemAb-isotopeconjugate

71 mAb name Capromab pendetide ( 111 In) Rituximab Trastuzumab Gemtuzumab ozogamicin Alemtuzumab Ibritumomab tiuxetan ( 90 Y) Tositumomab ( 131 I) Cetuximab Bevacizumab Trade Name ProstaScint Rituxan Herceptin Mylotarg Campath Zevalin Bexxar Erbitux Avastin Used for the treatment of Prostate cancer B-cell lymphoma Breast cancer Acute myelogenous leukemia (AML) Chronic lymphocytic leukemia (CLL) B-cell lymphoma Colorectal cancer Head and neck Colorectal cancer in in1996199719982000200120022003200420062004 FDA εγγεκριμένα mAbs FDA εγγεκριμένα mAbs

72 Μηχανισμός δράσης του Herceptin

73 mAb name Apolizumab Chimeric 14.18 Epratuzumab Galiximab HuMax-CD4 Lumilliximab MDX-010 Matuzumab Orgegovomab Panitumumab Pertuzumab Rencarex Vitaxin Agent/Target Human anti-HLA-DR Chimeric anti-GD2 Humanized anti-CD22 Humanized anti-CD80 Human anti-CD4 Humanized anti-CD23 Anti-CTLA-4 Humanized antriEGFR Murine anti-CA-125 Human anti-EGFR Humanized anti-HER2 Chimeric anti-G250 Humanized anti- α v β 3 integrin To be used for treatment of CLL, SLL Neuroblastoma NHL Cutaneous T cell lymphoma CLL Melanoma Colorectal cancer Ovarian cancer NSCLC, colorectal, renal Breast, prostate, ovarian Kidney Melanoma, prostate Unconjugated mAbs in Advanced Clinical Testing

74 Engineering Murine mAbs Reduces their Immunogenicity induce HAMA mV L & mV H to hIgG mV L & mV H to hIgG only mCDRs obtained from transgenic mice or Fab phage libraries obtained from transgenic mice or Fab phage libraries

75 Bispecific mAbs with one binding site for a tumor antigen and the other recognizing an activation molecule on effector lymphocyte Συνδέοντας Τ κύτταρα μέσω αντισωμάτων για την καταστροφή των καρκινικών κυττάρων

76 Diabodies directed to a target Ag and the CD3/TCR have shown to be effective in recruiting CTL to specifically kill cells Ag bearing targets TCR/CD3 IdiotypeΔιασώματαΔιασώματα

77 Ο κίνδυνος εμφάνισης αυτοανοσίας Cancer type Number of patients Response (duration in months) Autoimmunity Metastatic melanoma 13 6/13 PR; 4/13 NR/m; 3/13 NR 4/13 Vitiligo; 1/13 Uveitis Melanoma stage IV 14 3/14 PR 6/14 grade III/IV toxicity (enterocolitis, hypophysitis, hepatitis) Dudley and Rosenberg, 2003; Phan et al, 2003

78 Μεταμόσχευση αρχέγονων κυττάρων  Autologous or Allogeneic  Graft vs Leukemia, Myeloma, Tumor (T & NK cell recognition)

79 Malignancies treatable with Stem Cell Transplantation AutologousAllogeneicNeuroblastoma Acute Lymphocytic Leukemia Non-Hodgkin’s Lymphoma Acute Myeloid Leukemia Hodgkin’s Lymphoma Chronic Myelogenous Leukemia Wilm’s Tumor Juvenile Chronic Myelocytic leukemia Ewing’s Sarcoma Myelodysplastic Syndrome + Brain Tumors

80 Πρωτόκολλα Ανοσοθεραπείας για τον Ca του προστάτη PROSTVAC –VC TriCom Sipuleucel-T mAb

81 GARDASIL: From Bench Top to Bed-side Vaccine charasteristics non-infectious recombinant (yeast) non-infectious recombinant (yeast) quadrivalent (capsid prt of HPV types 6, 11, 16, 18) quadrivalent (capsid prt of HPV types 6, 11, 16, 18) approved for women aged 9-26 years approved for women aged 9-26 years prevention of cervical cancer & genital wards, prevention of cervical cancer & genital wards, vulvar and vaginal precancerous lesions Vaccine charasteristics non-infectious recombinant (yeast) non-infectious recombinant (yeast) quadrivalent (capsid prt of HPV types 6, 11, 16, 18) quadrivalent (capsid prt of HPV types 6, 11, 16, 18) approved for women aged 9-26 years approved for women aged 9-26 years prevention of cervical cancer & genital wards, prevention of cervical cancer & genital wards, vulvar and vaginal precancerous lesions Clinical trials Phase I : 2,391 women, efficacy 100 % over 40 months Phase I : 2,391 women, efficacy 100 % over 40 months Phase II : 552 women, efficacy 100 % over 5 years Phase II : 552 women, efficacy 100 % over 5 years Phase III : 18,000 women, efficacy 100 % over 2 years Phase III : 18,000 women, efficacy 100 % over 2 years Clinical trials Phase I : 2,391 women, efficacy 100 % over 40 months Phase I : 2,391 women, efficacy 100 % over 40 months Phase II : 552 women, efficacy 100 % over 5 years Phase II : 552 women, efficacy 100 % over 5 years Phase III : 18,000 women, efficacy 100 % over 2 years Phase III : 18,000 women, efficacy 100 % over 2 years

82

83 Σχεδιασμός πρωτοκόλλων ανοσοθεραπείας του καρκίνου