ΜΙΚΡΟΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΣΜΟΣ

Παρουσίαση με θέμα: "ΜΙΚΡΟΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΣΜΟΣ"— Μεταγράφημα παρουσίασης:

1 ΜΙΚΡΟΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΣΜΟΣ

2 Με τον όρο μικροπολλαπλασιασμό περιγράφουμε την τεχνική της παραγωγής ολόκληρων φυτών από μικρά φυτικά μέρη τα οποία ονομάζονται έκφυτα. Τα έκφυτα μπορεί να είναι φυτικά κύτταρα, ιστοί, όργανα, σπόροι που για διάφορους λόγους αδυνατούν αν βλαστήσουν στην φύση ή άλλα φυτικά μέρη. Η εγκατάσταση των εκφύτων γίνεται υπό ασηπτικές συνθήκες και η ανάπτυξη τους σε ελεγχόμενο περιβάλλον

3 ΠΛΕΟΝΕΚΤΗΜΑΤΑ Παραγωγή πολύ μεγάλου αριθμού πανομοιότυπων γενετικά φυτών Τα φυτά που παράγονται είναι απαλλαγμένα από ιώσεις και βακτήρια Δυνατότητα για διατήρηση γενετικού υλικού σε περιορισμένο χώρο Δυνατότητα πολλαπλασιασμού και διάσωσης απειλούμενων φυτών που επιζούν σε πολύ μικρό αριθμό

4 ΜΕΙΟΝΕΚΤΗΜΑΤΑ Απαιτείται εξειδικευμένο προσωπικό
Απαιτείται ακριβός εξοπλισμός

5 ΥΠΟΣΤΡΩΜΑΤΑ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ
Τα έκφυτα αναπτύσσονται σε ειδικά Θρεπτικά υποστρώματα που περιέχουν Ανόργανα θρεπτικά συστατικά Σάκχαρα Βιταμίνες Οργανικά συστατικά Φυτορυθμιστικές ουσίες Διάφορα άλλα συστατικά

6 ΤΡΟΠΟΣ ΠΑΡΑΣΚΕΥΗΣ ΘΡΕΠΤΙΚΩΝ ΥΠΟΣΤΡΩΜΑΤΩΝ
Ανάμιξη σε δοχείο ζέσεως με αποσταγμένο νερό των ανόργανων και οργανικών συστατικών και των φυτορυθμιστικών ουσιών Ογκομέτρηση Μέτρηση του ρΗ Προσθήκη άγαρ Αποστείρωση

7 Συστατικά κυριότερων θρεπτικών υποστρωμάτων
Συστατικά MS (mg/l) WPM (mg/l) NH4NO CaCl2 2H2O Ca(NO3 )2 · 4H2O MgSΟ4 · 7H2O KNO K2 SO KH2 PO H3 BO CoCl2 · 6H2O CuSO4 · 5H2O Na2 EDTA FeSΟ4 · 7H MnSo4 · H2O KI Na2MoO4 · 2H2O ZnSO4· 7H2O Myo-inositol Glycine Nicotinic acid Pyridoxine HCl Thiamin HCl Συστατικά κυριότερων θρεπτικών υποστρωμάτων 

8

9 ΑΡΧΙΚΕΣ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ Η ΦΑΣΗ ΤΗΣ ΕΓΚΑΤΑΣΤΑΣΗΣ ΤΩΝ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΩΝ IN VITRO
ΕΠΙΦΑΝΕΙΑΚΗ ΑΠΟΛΥΜΑΝΣΗ ΤΩΝ ΕΚΦΥΤΩΝ ΣΤΟΧΟΣ ΤΟ ΧΑΜΗΛΟΤΕΡΟ ΠΟΣΟΣΤΟ ΜΟΛΥΝΣΕΩΝ ΚΑΙ ΤΟ ΥΨΗΛΟΤΕΡΟ ΕΠΙΒΙΩΣΗΣ ΤΩΝ ΕΚΦΥΤΩΝ ΚΥΡΙΩΣ ΜΕ ΥΔΑΤΙΚΟ ΔΙΑΛΥΜΑ ΧΛΩΡΙΝΗΣ ΕΥΡΕΣΗ ΙΔΑΝΙΚΟΥ ΧΡΟΝΟΥ ΑΠΟΛΥΜΑΝΣΗΣ ΚΑΙ ΣΥΓΚΕΝΤΡΩΣΗΣ ΑΠΟΛΥΜΑΝΤΙΚΟΥ

10 ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ: ΤΗΣ ΙΔΑΝΙΚΗΣ ΕΠΟΧΗΣ ΛΗΨΗΣ ΤΩΝ ΕΚΦΥΤΩΝ (ΚΑΤΑΛΛΗΛΟ ΒΛΑΣΤΙΚΟ ΣΤΑΔΙΟ) ΤΗΣ ΙΔΑΝΙΚΗΣ ΗΛΙΚΙΑΣ ΤΩΝ ΜΗΤΡΙΚΩΝ ΦΥΤΩΝ ΤΟΥ ΑΠΟΔΟΤΙΚΟΤΕΡΟΥ ΣΥΝΔΥΑΣΜΟΥ ΦΥΤΟΡΥΘΜΙΣΤΙΚΩΝ ΟΥΣΙΩΝ

11 ΦΑΣΗ ΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΣΜΟΥ Στόχος στο στάδιο αυτό είναι η επίτευξη του υψηλότερου ποσοστού πολλαπλασιασμού Δεν απαιτείται απολύμανση αφού τα μητρικά φυτά αναπτύσσονται in vitro Εξετάζουμε τον ικανότερο συνδυασμό φυτορυθμιστικών ουσιών Προσπαθούμε να παράγουμε φυτά όσο δυνατό φωτοαυτότροφα

12 Στο στάδιο αυτό προσπαθούμε να παράγουμε φυτά σε συνθήκες όσο δυνατόν παραπλήσιες με φυτά που αναπτύσσονται ex vitro, ώστε να πετύχουμε πιο φυσιολογικά ανατομικά χαρακτηριστικά των φυτών που παράγονται Προσπαθούμε την αύξηση του αερισμού των δοχείων καλλιέργειας και την αύξηση του φωτισμού που δέχονται τα φυτά.

13 Εγκάρσια τομή φύλλων στο κεντρικό νεύρο που αναπτύχθηκαν σε διαφορετικό υλικό κάλυψης (μεγέθυνση 200Χ) Εικόνα 1. Ex vitro Εικόνα 2. Μεμβράνη Sanitas Εικόνα 4. Μεταλλικό καπάκι Εικόνα 3. Μagenta

14 Κάτω επιφάνεια φύλλων που αναπτύχθηκαν σε διαφορετικό υλικό κάλυψης (μεγέθυνση 400Χ)
Εικόνα 1. Μεμβράνη Sanitas Εικόνα 2. ημίσκληρο διαφανές πλαστικό Εικόνα 3. Μagenta Εικόνα 4. Μεταλλικό καπάκι Εικόνα 5. Ex vitro

15 ΦΑΣΗ ΡΙΖΟΒΟΛΙΑΣ Χρήση αυξινών στο υπόστρωμα καλλιέργειας
Επαγωγή ριζών μετά από παραμονή για μικρό χρονικό διάστημα σε πυκνό διάλυμα αυξίνης ή μετά από παραμονή για μεγάλο χρονικό διάστημα σε αραιό διάλυμα αυξίνης Ριζοβολία ex vitro Μας ενδιαφέρει μεγάλος αριθμός ριζών μεγάλου μήκους και ριζικά τριχίδια

16 ΕΓΚΛΙΜΑΤΙΣΜΟΣ Από τη φάση της ετεροτροφίας στη φάση της αυτοτροφίας
Επιβίωση σε συνθήκες φυσιολογικής ατμοσφαιρικής υγρασίας Έκμάθηση του μηχανισμού ανοιγοκλεισίματος των στοματίων Φωτοσύνθεση φωτοεγκλιματισμός

17 Ex vitro εγκλιματισμός φυταρίων του Q. euboica
Παρατήρηση μυκορριζών σε ρίζα σε οπτικό μικροσκόπιο (μεγέθυνση 200 Χ)

18 ΠΡΟΒΛΗΜΑΤΑ ΕΜΒΡΥΟΓΈΝΝΕΣΗ
Σχηματισμός κάλλου Σωμακλωνική παραλλακτικότητα Σχηματισμός εμβρύων

19

20