Βασιλική Πιτυρίγκα Ιατρός Βιοπαθολόγος, Λέκτορας Μικροβιολογίας Ε.Κ.Π.Α. ΑΜΕΣΗ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΜΙΚΡΟΒΙΩΝ ΣΤΑ.

Παρουσίαση με θέμα: "Βασιλική Πιτυρίγκα Ιατρός Βιοπαθολόγος, Λέκτορας Μικροβιολογίας Ε.Κ.Π.Α. ΑΜΕΣΗ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΜΙΚΡΟΒΙΩΝ ΣΤΑ."— Μεταγράφημα παρουσίασης:

1 Βασιλική Πιτυρίγκα Ιατρός Βιοπαθολόγος, Λέκτορας Μικροβιολογίας Ε.Κ.Π.Α. Email: vpitiriga@med.uoa.grvpitiriga@med.uoa.gr ΑΜΕΣΗ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΜΙΚΡΟΒΙΩΝ ΣΤΑ ΚΛΙΝΙΚΑ ΔΕΙΓΜΑΤΑ - ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑΤΑ - ΧΡΩΣΕΙΣ

2 Τι είναι οι μικροοργανισμοί ? Οι μικροοργανισμοί είναι οργανισμοί που δεν φαίνονται με γυμνό μάτι και είναι μονοκύτταροι ή πολυκύτταροι Πως διαχωρίζονται ως προς την οργάνωση της κυτταρικής τους δομής ? Σε προκαρυωτικούς και ευκαρυωτικούς μικροοργανισμούς

3 Χαρακτηριστικά προκαρυωτικών - ευκαρυωτικών

4 Ταξινόμηση Μικροοργανισμών Ευκαρυωτικά κύτταρα Μύκητες (πρώτιστα) Πρωτόζωα (πρώτιστα) Μετάζωα ή έλμινθες (ζωϊκό βασίλειο) Προκαρυωτικά κύτταρα Βακτήρια ή ευ-βακτήρια Αρχαιοβακτήρια Ιοί (20-200 nm) Ιοειδή (5 nm) Prions (<5 nm)

5 Ταξινόμηση παθογόνων μικροβίων ΠΑΘΟΓΟΝΟΙ ΜΙΚΡΟΟΡΓΑ ΝΙΣΜΟΙ Βακτήρια Μύκητες Παράσιτα Ιοί

6 Βακτήρια Προκαρυωτικά Έχουν κυτταρικό τοίχωμα από πεπτιδογλυκάνη Έχουν κυτταρική μεμβράνη γύρω από το κυτταρόπλασμα Δεν έχουν πυρηνική μεμβράνη Πολλαπλασιάζονται με απλή διαίρεση

7 Μη τυπικά βακτήρια Χλαμύδια (0,2-1 μ m), υποχρεωτικά ενδοκυττάρια Ρικέτσιες (0,3-1 μ m), υποχρεωτικά ενδοκυττάρια, Μυκοπλάσματα (0,2-0,8 μ m), χωρίς στερεό κυτταρικό τοίχωμα

8 Ιοί Μικρό μέγεθος ( δεν φαίνονται στο κοινό μικροσκόπιο ) Απλή κατασκευή Δεν μπορούν να αναπαράγονται αυτόνομα Μεταβολική αδράνεια ( δεν μπορούν να συνθέσουν τις πρωτεΐνες τους ) Περιέχουν DNA ή RNA Δεν έχουν κυτταρικό τοίχωμα

9 Μύκητες Ευκαρυωτικά (5-10 μ m) Οι μούχλες και τα μανιτάρια ( υφομύκητες ) είναι πολυκύτταρα, αποτελούνται από ινίδια που λέγονται υφές Οι ζύμες ( ζυμομύκητες ) είναι μονοκύτταροι, μπορεί να σχηματίζουν ψευδο - υφές

10 Πρωτόζωα Ευκαρυωτικά (1-150 μ m) Απορροφούν και πέπτουν οργανικές ενώσεις Έχουν : Πυρήνα, μιτοχόνδρια, ενδοπλασματικό δίκτυο Μπορεί να κινούνται με ψευδοπόδια, βλεφαρίδες ή ινίδια Διακρίνονται σε :1) εντερικά & 2) αίματος - ιστών

11 Μετάζωα ( πολυκύτταρα ζωικά παράσιτα ) Ευκαρυωτικά (0,3 mm –25 m) Πολυκύτταροι οργανισμοί Τα μετάζωα τα οποία ονομάζονται και έλμινθες ή σκώληκες ανήκουν στο βασίλειο των ζώων Εμφανίζουν μεγάλη διαφοροποίηση

12 Κλασσική ( φαινοτυπική ) Ταξινόμηση βακτηρίων Μορφολογικά χαρακτηριστικά ( σχήμα, μέγεθος, χρώση gram κλπ.) Μεταβολικές απαιτήσεις ( αερόβια – αναερόβια – μικροαερόφιλα ) Συνθήκες ανάπτυξης, μορφές ανάπτυξης ( καλλιέργειες, τύπος αποικιών κλπ ) Βιοχημικές ιδιότητες Αντιγονικά χαρακτηριστικά - ανοσολογικές ιδιότητες Μοριακά προφίλ

13 Βασικά σχήματα βακτηριακών κυττάρων

14 Βακτήρια – Βασική διάκριση με βάση το σχήμα

15 Διάταξη βακτηριακών κυττάρων Ζεύγη : diplococci, diplobacilli Συστάδες : staphylococci Αλυσίδες : streptococci, streptobacilli

16 Ονομασία και Ταξινόμηση μικροοργανισμών Κάθε μικροοργανισμός έχει δύο συνθετικά : το όνομα του γένους και το όνομα του είδους Οι οικογένειες με την κατάληξη “-aceae”( στα Ελληνικά “- οειδή ”) Πχ.  Γένος : Escherichia  Είδος : E. coli  Οικογένεια : Enterobacteriaceae

17 ΑΜΕΣΗ ΑΝΑΖΗΤΗΣΗ ΜΙΚΡΟΒΙΩΝ Μικροσκόπηση Νωπό Κεχρωσμένο παρασκεύασμα Τι μελετάμε ? Παρουσία ή όχι μικροοργανισμών Μορφολογίας Διάταξης Δομής

18 Μικροσκόπηση Αντικείμενα που με γυμνό μάτι είναι αόρατα, είναι δηλαδή μικρότερα του 0,1mm. Ιδιότητες - χαρακτηριστικά Διακριτική ικανότητα του μικροσκοπίου (resolution): η " ικανότητα " του μικροσκοπίου να δείχνει δύο πολύ κοντινά σημεία ως δύο καθαρά ξεχωριστά σημεία. Μεγέθυνση του μικροσκοπίου Αντίθεση ανάμεσα στις δομές του βιολ. υλικού

19 ΕΙΔΗ ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΗΣΗΣ - ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΩΝ Κοινό μικροσκόπιο Μικροσκόπιο φθορισμού Μικροσκόπιο αντίθετης φάσης Μικροσκόπιο σκοτεινού πεδίου Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο Σαρωτικό ηλεκτρονικό μικροσκόπιο

20 Κοινό οπτικό ή φωτονικό μικροσκόπιο

21 Ζώντες μικροοργανισμοί αλλά κυρίως μονιμοποιημένα παρασκευάσματα Μέγεθος μέχρι 0,1μικρά=0,0001mm. Η μεγέθυνση Μ=m 1 *m 2 όπου m 1 και m 2 είναι οι μεγεθύνσεις του προσοφθάλμιου και του αντικειμενικού φακού.

22 Προσοφθάλμιοι - αντικειμενικοί φακοί Προσοφθάλμιοι X10 Αντικειμενικοί Χ 4 = κόκκινος, Χ 10 = κίτρινος, Χ 40 = γαλάζιος και Χ 100 = λευκός Ελαιοκαταδυτικός. Στην 1000X μεγέθυνση ο αέρας μεταξύ αντικ. φακού και αντικ. πλάκας καλύπτεται με λάδι  Αυξάνει το φως που διαπερνά από τον αντικειμενικό φακό  Αυξάνει τη διακριτική ικανότητα

23 Υλικά μικροσκοπίας Αντικειμενοφόρες πλάκες Καλυπτρίδες Φ.Ο. Κεδρέλαιο

24 Νωπό παρασκεύασμα για μικροσκόπηση Προετοιμασία μικροβιακού υλικού για μικροσκόπηση

25 Βακτήρια Ίζημα ούρων

26 Μύκητες

27

28 Παράσιτα Trichomonas vaginalis σε κολπικό επίχρισμα

29 Κολπικό επίχρισμα

30 Μικροσκόπηση σε σκοτεινό πεδίο Η εικόνα : φωτεινό αντικείμενο σε σκοτεινό πεδίο. Αδιαφανής δίσκος σκεπάζει τον συγκεντρωτή φακό το παρασκεύασμα φωτίζεται από πολύ πλάγιες ακτίνες που δεν εισέρχονται στον αντικειμενικό φακό παρά μόνο με διάθλαση. Εσωτερικές δομές των ευκαρυωτικών ζώντων κύτταρων χωρίς χρώση

31 Μικροσκόπηση σε σκοτεινό πεδίο

32 Treponema pallidum

33 M ικροσκόπιο αντίθεσης φάσης (phase contrast) Το παρασκεύασμα φωτίζεται από ένα κενό φωτεινό κώνο Διαφορά φάσης : Η σχέση μεταξύ του φωτός που διαπερνά το κυτταρόπλασμα και αυτού που περνά τα κυτταρικά οργανίδια Παρατήρηση ζώντων ευκαρυωτικών κυττάρων / μικροοργανισμών Δε συνιστάται για τη παρατήρηση μονιμοποιημένων και χρωματισμένων τομών ιστών

34 Ενδοσπόρια μυκήτων

35 Μικροσκόπιο φθορισμού Τα παρασκευάσματα χρωματίζονται με φθοριούχες χρωστικές ( φθορεσκεινη, αυραμίνη ) Οι φθοριούχες χρωστικές απελευθερώνουν ενέργεια υπό μορφή φωτός ( φθορισμός ) όταν διεγείρονται από ακτινοβολία μικρότερου μήκους κύματος ( υπεριώδης ακτινοβολία ) Οι εικόνες εμφανίζονται χρωματισμένες : το χρώμα εξαρτάται από το φθοριόχρωμα που χρησιμοποιείται

36 Μικροσκόπιο φθορισμού

37 Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο διέλευσης Χρήση δέσμης ηλεκτρονίων αντί φωτός Μεγάλη διακριτική ικανότητα ~ 1nm, Μεγέθυνση x10 6 Παρατήρηση ενδοκυττάριων δομών (DNA, RNA κλπ ) Μειονεκτήματα Μόνο νεκρά παρασκευάσματα Η εικόνα είναι άχρωμη Μελετώνται σε λεπτές τομές

38 Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο διέλευσης

39 Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο σάρωσης Συνδυασμένη εκπομπή δύο δεσμών ηλεκτρονίων από διαφορετικές πηγές. Σκιαγραφείται το είδωλο της επιφάνειας του βιολογικού υλικού - μελέτη δομών στην επιφάνεια των κυττάρων

40 Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο σάρωσης

41

42

43 Χρώσεις μικροβίων

44 ΧΡΩΣΗ (STAIN) Είναι η σήμανση των μικροοργανισμών με έγχρωμες ουσίες. Η μέθοδος της χρώσης εφαρμόστηκε πριν 150 χρόνια Μέσω αυτών γίνονται ορατά με τη βοήθεια μικροσκοπίου ποσοτικά & ποιοτικά χαρακτηριστικά που αφορούν : - τα μορφολογικά χαρακτηριστικά ( σχήμα, μέγεθος ) - τη διάταξη στο χώρο - των εσωτερικών δομών τους

45 Κατηγορίες χρώσεων Ι n vivo χρώσεις ( Έμβιες χρώσεις ) χρώσεις ζώντων μικροβίων ή ιστών ( σε πολύ αραιά διαλύματα χρωστικών 1/5000 –1/500.000) Ι n vitro χρώσεις ( Ξηρές χρώσεις ) χρώσεις ξηρών παρασκευασμάτων όπου οι μικρ / μοί ή οι ιστοί δεν είναι πλέον ζωντανοί

46 Χρώσεις στην Μικροβιολογία  Αρνητικές [ γίνονται με διαλύματα σινικής μελάνης ή νιγροσίνης ] Χρωματίζεται το περιβάλλον του μικροβίου ενώ το κύτταρο παραμένει άχρωμο  Θετικές Χρωματίζονται τα κύτταρα των μικροβίων

47 Κατηγορίες χρώσεων  Φυσικές Ζωικής Φυτικής προέλευσης ( αιματοξυλίνη )  Τεχνητές Βασικές Όξινες

48 Κατηγορίες χρώσεων Βασικές : Αποτελούνται από χρωμογόνο θετικό ιόν ( χρωστική +Cl -), Όξινες : Αποτελούνται από χρωμογόνο αρνητικό ιόν (Na+ χρωστική -) Οι βασικές χρησιμοποιούνται περισσότερο από τις όξινες

49 Βασικές Όξινες Κυανούν του μεθυλενίου κρυσταλλικό ιώδες Κυανούν της τολουϊδίνης Ιώδες γεντιανής Πράσινο μαλαχίτη Σαφρανίνη Θειονίνη Βασική φουξίνη Κυανούν μεθυλίου Όξινη φουξίνη Ηωσίνη Κατηγορίες χρώσεων

50 ΓΙΑΤΙ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΟΥΜΕ ΠΕΡΙΣΣΟΤΕΡΟ ΤΙΣ ΒΑΣΙΚΕΣ ΧΡΩΣΤΙΚΕΣ ? Τα κύτταρα περιέχουν μεγάλο ποσό ριβονουκλεϊνικών οξέων To έγχρωμο θετικό ιόν σε μια βασική χρωστική έλκεται από τα αρνητικά επιφανειακά φορτία του βακτηριακού κυττάρου Οι όξινες δεν προσελκύονται από τους περισσότερους τύπους βακτηρίων, επειδή τα αρνητικά ιόντα της χρωστικής απωθούν την αρνητικά φορτισμένη βακτηριακή επιφάνεια ( αρνητική χρώση ).

51 Κατηγορίες χρώσεων Απλές Σύνθετες Ειδικές

52 ΑΠΛΕΣ ΧΡΩΣΕΙΣ Είναι υδατικά ή αλκοολικά διαλύματα μιας μόνο βασικής χρωστικής. Μορφολογία των βακτηρίων ( σχήμα, μέγεθος, διάταξη ). - Στο νωπό παρασκεύασμα - Στο μονιμοποιημένο δείγμα  Μπλε του μεθυλενίου,  Βασική φουξίνη,  Κρυσταλλικό ιώδες  Χρώση ιωδίου

53 Χρώση Lugol Αυγό παρασίτου σε ίζημα κοπράνων

54 Χρώση σινικής μελάνης Cryptococus neoformans σε ίζημα ΕΝΥ

55 Μπλε του μεθυλενίου Bacilli

56 ΔΙΑΦΟΡΙΚΕΣ - ΣΥΝΘΕΤΕΣ ΧΡΩΣΕΙΣ Αντιδρούν διαφορετικά στα διάφορα είδη μικροβίων. Χρησιμοποιούνται για τον διαχωρισμό διαφορετικών ειδών μικροβίων. Gram χρώση,Zelh Nielsen stain.

57 ΕΙΔΙΚΕΣ ΧΡΩΣΕΙΣ Χρησιμοποιούνται για την ανάδειξη συγκεκριμένων τμημάτων των μικροοργανισμών ή οργανιδίων ( ενδοσπόρια, μαστίγια, έλυτρα )

58 Χρώση Gram

59 Hans Christian Gram -Danish Bacteriologist Η Gram χρώση είναι πολύ σημαντική Αναπτύχθηκε το 1884 από το Δανό βακτηριολόγο. Βασίζεται στο διαφορετικό αποχρωματισμό που προκαλεί η αιθανόλη μετά από χρώση με κρυσταλλικό ιώδες και ιώδιο. Μία από τις πιο χρήσιμες χρώσεις της Μικροβιολογίας επειδή ταξινομεί τα βακτήρια σε δύο μεγάλες κατηγορίες. Gram (+), Gram (-). Gram (+) θετικά αυτά που διατηρούν το χρώμα, Gram (-) αρνητικά αυτά που όχι.

60 Gram (+) VS Gram (-) στην κλινική πράξη Gram (-) Βακτήρια Μεγαλύτερη παθογονικότητα Παρουσία ενδοτοξινών ( λιποπολυσακχαρίτες εξ. μεμβράνης ) Gram (+) κόκκοι Πιο μικρής παθογονικότητας λοιμώξεις Το κυτταρικό τοίχωμα πιο ευάλωτο σε ένζυμα του οργανισμού ( λυσοζύμη ) Πιο εύκολη αντιμετώπιση με αντιμικροβιακά

61 Κυτταρικό τοίχωμα Gram positive Παχύ στρώμα πεπτιδογλυκάνης (παχιά άκαμπτη δομή). Η πεπτιδογλυκάνη (μουρείνη) αποτελείται από επαναλαμβανόμενους δισακχαρίτες συνδεδεμένους με πολυπεπτίδια τειχοϊκά οξέα -αρνητικό φορτίο -αντιγονική ειδικότητα

62 Gram negative βακτήρια Έχουν λεπτό στρώμα πεπτιδογλυκάνης που συνδέεται με λιποπρωτείνες της εξωτερικής μεμβράνης και βρίσκεται στον περιπλασμικό χώρο. Εξωτερική μεμβράνη από λιποπολυσακχαρίτες–LPs, λιποπρωτείνες, φωσφολιπίδια (αρνητικό φορτίο, αντιγονική ειδικότητα) Όχι τειχοϊκά οξέα.

63 Gram positive vs Gram negative

64

65 Χρώση Gram Χρωστικές : Αποχρωματισμός με οινόπνευμα 1. Κρυσταλλικό ιώδες (Crystal violet CV + Cl − ions) 2. Διάλυμα ιωδίου (Lugol ) iodine (I − or I−3) 1. Κρυσταλλικό ιώδες (Crystal violet CV + Cl − ions) 2. Διάλυμα ιωδίου (Lugol ) iodine (I − or I−3) 3. Σαφρανίνη (Safranine) Παραγωγή συμπλόκου

66

67 Αρχή της χρώσης Διαφορετική χημική και δομική σύσταση του κυτταρικού τοιχώματος : Σχηματίζεται μέσα στο κύτταρο ένα αδιάλυτο σύμπλοκο ιωδίου - κρυσταλλικού ιώδους, Gram (-) βακτήρια : Εξουδετέρωση εξ. μεμβράνης από αλκοόλη, απομάκρυνση συμπλόκου Gram (+) βακτήρια : αφυδάτωση κυττάρου με την αλκοόλη, κλείνουν οι πόροι των τοιχωμάτων και το σύμπλοκο εγκλωβίζεται.

68

69 Εκτέλεση διαδικασίας χρώσης Gram Σταγόνες κρυσταλλικού ιώδους για 1 min. Το κρυσταλλικό ιώδες χρωματίζει βαθύ κυανό χρώμα όλα ανεξαιρέτως τα βακτηριακά κύτταρα. Ξέπλυμα με άφθονο νερό. Προσθήκη διαλύματος ιωδίου (Lugol) για 1 min Ξέπλυμα με οινόπνευμα - ακετόνη 1/1 (<10 ΄΄ ). Ξέπλυμα με άφθονο νερό. Στο στάδιο αυτό μερικά μόνο κύτταρα ( τα θετικά κατά Gram) διατηρούν το κυανό χρώμα, τα υπόλοιπα αποχρωματίζονται. Το παρασκεύασμα καλύπτεται με σαφρανίνη για 1 min Ξέπλυμα με άφθονο νερό. Η περίσσεια του νερού απομακρύνεται με απορροφητικό χαρτί. Μικροσκοπική παρατήρηση

70 Gram Staining Procedure

71

72 Αποτελέσματα Gram- θετικά μικροοργανισμοί – μπλε Gram- αρνητικά μικροοργανισμοί - κόκκινο / ροζ Gram ποικίλλοι (variable) μικροοργανισμοί Δύσκολα χρωματιζόμενοι μικροοργανισμοί Μη χρωματιζόμενοι μικροοργανισμοί

73 Κλινικά δείγματα για χρώση Gram Κλινικά δείγματα ( Ούρα, πτύελα, πύο, ENY κλπ ) Υλικά βιοψίας ή τεμάχια ιστού Καλλιεργήματα σε υγρά θρεπτικά υλικά Αποικίες από στερεό θρεπτικό υλικό

74 Προετοιμασία παρασκευάσματος Δημιουργία μικροβιακού εναιωρήματος από :  Βιολογικό δείγμα  Δείγμα από καλλιέργεια Αποξήρανση Μονιμοποίηση : Διαδικασία συντήρησης των εξωτερικών και εσωτερικών δομών των μικροβιακών κυττάρων  Θερμική ( διατηρεί τη γενική μορφολογία, αλλά όχι τις εσωτερικές δομές )  Χημική ( μεθανόλη, αιθανόλη κλπ.) διατηρεί τις εσωτερικές δομές )

75 Gram (+) bacteria

76 Χρώση Gram

77

78

79 ΑΞΙΟΛΟΓΗΣΗ ΤΗΣ ΧΡΩΣΗΣ GRAM Ευρήματα - εκτίμηση Περιγραφική ως προς τη μορφολογία Gram (+) κόκκοι : σε ζευγάρια, σε αλυσίδες σε συστάδες Gram (+) κοκκοβακτηρίδια, βάκιλλοι, βακτηρίδια κορυνόμορφα σε σχηματισμούς ή κινέζικα γράμματα Gram (-) διπλόκοκκοι βακτηρίδια νηματοειδή βακτηρίδια κοκκοβακτηρίδια με πολυμορφισμό Βλαστοκύτταρα μυκήτων με εκβλαστήσεις / υφές

80 ΑΞΙΟΛΟΓΗΣΗ ΤΗΣ ΧΡΩΣΗΣ GRAM Ημιποσοτική ως προς τον αριθμό των μικροοργανισμών Σπάνια <1 μικρόβιο / ΟΠ ( Χ 1000) Λίγα 1-5 μικρόβια / ΟΠ Αρκετά 5-10 μικρόβια / ΟΠ Άφθονα >10 μικρόβια / ΟΠ Δεν έχουμε στοιχεία για το γένος και το είδος των μικροοργανισμών αλλά μόνο για την μορφολογία τους

81 ΑΞΙΟΛΟΓΗΣΗ ΤΗΣ ΧΡΩΣΗΣ GRAM Καταλληλότητα δείγματος για καλλιέργεια - Ανεύρεση πολλών επιθηλίων σε : ούρα, πτύελα ακατάλληλο δείγμα Παρουσία πυοσφαιρίων Λοίμωξη, αποικισμός

82 Κλινική σημασία της χρώσης Gram Άμεση αναγνώριση μικροοργανισμού ( πιο γρήγορη από την καλλιέργεια ) Καθοδήγηση της θεραπευτικής αγωγής Συμβολή στην πρόγνωση και θεραπεία

83 Κλινική σημασία της χρώσης Gram ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΟΥΡΩΝ Δεν φυγοκεντρούμε - καλή ανάδευση - στρώσιμο σταγόνας σε αντικειμενοφόρο πλάκα Εκτίμηση μικροβιακ o ύ φορτίου : 1 μικρ / σμός ανά οπτικό πεδίο ( Χ 1000) σε αφυγοκέντρητα ούρα ~ 105ml σε καλλιέργεια GRAM χρώση (95% ευαισθησία )

84 Προστατικό υγρό GRAM-Neisseria gonorrhoea Προστατικό υγρό GRAM-Neisseria gonorrhoea Clue cells σε κολπικό επίχρισμα Κλινική σημασία της χρώσης Gram

85 Δείγματα κοπράνων Καλή ανάδευση ( λεπτή επίστρωση ) Gram χρώση Cambylobacter jejuni-gram stain

86 Κλινική σημασία της χρώσης Gram Ανίχνευση παθογόνων σε ΕΝΥ Φυγοκέντρηση GRAM stain

87 Κλινική σημασία της χρώσης Gram ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΑΠΌ ΤΟ KAT ΩΤΕΡΟ ΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟ ΣΥΣΤΗΜΑ Πτύελα, βρογχικές εκκρίσεις GRAM ΧΡΩΣΗ - καταλληλότητα του δείγματος

88 Κλινική σημασία της χρώσης Gram Αιμοκαλλιέργειες - Νωπό παρασκεύασμα - ΑΜΕΣΗ GRAM ΧΡΩΣΗ ΣΤΗ ΘΕΤΙΚΗ ΦΙΑΛΗ ΑΠΌ ΤΟ ΑΥΤΟΠΟΙΗΜΕΝΟ ΣΥΣΤΗΜΑ... Έγκαιρη έναρξη αντιμικροβιακής θεραπείας σε ασθενείς με σηψαιμία

89 Κλινική σημασία της χρώσης Gram Μορφολογία μυκήτων ( τρίχες, νύχια, δέρμα )

90 ΕΠΑΝΑΛΗΨΗ

91 Ποιος είναι ο τύπος μικροσκόπησης ? Μικροσκόπιο σκοτεινού πεδίου

92 Ποιος είναι ο τύπος μικροσκόπησης ?

93

94

95 Τι είδους μικροοργανισμοί ?

96 Τι είδους χρώση ?

97 Τι είδους μικροοργανισμοί ?

98