ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΙΩΑΝΝΙΝΩΝ ΑΝΟΙΚΤΑ ΑΚΑΔΗΜΑΪΚΑ ΜΑΘΗΜΑΤΑ Ιατρική Γενετική (BET) Προγεννητική διάγνωση Διδάσκουσα: Αν. Καθ. Μαρίκα Σύρρου.

Παρουσίαση με θέμα: "ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΙΩΑΝΝΙΝΩΝ ΑΝΟΙΚΤΑ ΑΚΑΔΗΜΑΪΚΑ ΜΑΘΗΜΑΤΑ Ιατρική Γενετική (BET) Προγεννητική διάγνωση Διδάσκουσα: Αν. Καθ. Μαρίκα Σύρρου."— Μεταγράφημα παρουσίασης:

1 ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΙΩΑΝΝΙΝΩΝ ΑΝΟΙΚΤΑ ΑΚΑΔΗΜΑΪΚΑ ΜΑΘΗΜΑΤΑ Ιατρική Γενετική (BET) Προγεννητική διάγνωση Διδάσκουσα: Αν. Καθ. Μαρίκα Σύρρου

2 Άδειες Χρήσης Το παρόν εκπαιδευτικό υλικό υπόκειται σε άδειες χρήσης Creative Commons. Για εκπαιδευτικό υλικό, όπως εικόνες, που υπόκειται σε άλλου τύπου άδειας χρήσης, η άδεια χρήσης αναφέρεται ρητώς.

3 Eνδείξεις Μητρική ηλικία (>35 ε ). Προηγούμενο παιδί με χρωμοσωμική ανωμαλία (ΧΑ) de novo. Δομική ΧΑ σε έναν από τους γονείς. Μονογονιδικαό νόσημα στην οικογένεια. Κίνδυνος ανωμαλίας νευρικού σωλήνα. Υπερηχογραφικά ευρήματα ή τριπλού τεστ.

4 Μητρική Ηλικία

5 Μέθοδοι προγεννητικής διάγνωσης

6 Αμνιοκέντηση (14-20 εβδ)

7 Βιοψία τροφοβλάστης (CVS)(9η- 12η εβδ)

8 Ομφαλοκέντηση- Λήψη Εμβρ. Αίματος (19-21εβδ )

9 Μη επεμβατικές μέθοδοι α- εμβρυϊκή πρωτεΐνη (μητρικός ορός) Εκτίμηση κινδύνου για ανοικτές βλάβες του κεντρικού νευρικού σωλήνα, Εκτίμηση κινδύνου για ύπαρξη τρισωμίας. Τριπλό τεστ ή τετραπλό. Υπέρηχοι.

10

11 Υπέρηχοι Μονογονιδιακά- : Ολοπροσεγκεφαλία, ΄πολυδακτυλία, πολυκυστικοί νεφροί κ.λ.π. Πολυπαραγοντικά: λαγώχειλος, λυκόστομα, στρεβλοποδία, συγγενής καρδιοπάθεια, βλαβες ΚΝΣ. Βλάβες που μπορεί να συνδυάζονται με συγκεκριμένο σύνδρομο: ανωμαλίες γεννητ. Οργάνων, κυστικό ύγρωμα, πολυδακτυλία, ομφαλοκήλη, ανωμαλίες άκρων.

12 Σύνδρομο Down

13 Π.χ.κυστικό ύγρωμα Σποραδικό. Συνδυαζόμενο με χρωμοσωμικές ανωμαλίες –Τρισωμία 21. –Μονοσωμία Χ (45,X). –del(8p). Γενετικά μεταβολικά νοσήματα. Γενετικά νοσήματα π.χ. Σύνδρομο Noonan (MIM.163950) (PTPN11 mutations). NoonanMIM.163950PTPN11 κ.α.

14 Εργαστηριακός προγεννητικός έλεγχος Κυτταρογενετική ανάλυση (πιθανά προβλήματα: μωσαϊκισμός-αληθινος ή ψευδής, του πλακούντα) μητρική επιμόλυνση, αποτυχία καλλιέργειας, περίεργα ευρήματα?). Βιοχημική ανάλυση (αμνιοκέντηση ή βιοψία τροφοβλάστης). Ανάλυση DNA ( χρειάζεται να γνωρίζουμε τη μετάλλαξη ).

15

16

17 Βιοχημική ανάλυση για μεταβολικά νοσήματα Χοριακές λάχνες ή καλλιεργημένα αμνιοκύτταρα ή Άμεσος προσδιορισμός με έλεγχο κάποιας ουσίας στο αμνιακό υγρό.

18 Νέες τεχνολογίες Προεμφυτευτικός έλεγχος. Εμβρυϊκά κύτταρα στη μητρική κυκλοφορία (ειδικά αντισώματα/ εμβρυϊκά αντιγόνα). Εμβρυϊκή Μαγνητική για διάγνωση διαμαρτίες στον εγκέφαλος.

19 Εμβρυϊκά κύτταρα στη μητρική κυκλοφορία 1 εμβρυϊκό κύτταρο/ml μητρικού αίματος. FISH σε μεσοφασικούς πυρήνες(φύλο, ανευπλοειδίες )* Bianchi et al.,2002 Πολυκεντρική μελέτη..

20 Εμβρυϊκό DNA στη μητρική κυκλοφορία Πλάσμα εγκύων περιέχει ελεύθερο DNA από το οποίο 3-6% είναι εμβρυϊκής προέλευσης. Ανιχνεύεται από την 7 η εβδομάδα της κύησης και η συγκέντρωσή του αυξάνεται κατά την διάρκειά της. Αποτελείται κυρίως από <200kb κομμάτια άγνωστης προέλευσης πιθανότατα πλακουντιακής. Επειδή υπερέχει το μητρικό DNA υπάρχει δυσκολία να αναλυθούν μητρικές μεταλλάξεις αλλά μόνο πατρικές.

21 Ghanta et al. Non-invasive prenatal detection of trisomy 21 using tandem single nucleotide polymorphisms.PLoS One. 2010 We outline a novel, rapid, highly sensitive, and targeted approach to non-invasively detect fetal T21 using maternal plasma DNA. Βianchi et al. Insights into fetal and neonatal development through analysis of cell-free RNA in body fluids. Early Hum Dev. 2010. Between 1997 and the present era this field has gone from basic research to clinical application for diagnosis of fetal gender and Rhesus D status. Over the next few years it is likely that noninvasive prenatal diagnosis for Down syndrome will also be possible. Here we summarize current and future clinical applications of analyzing cell-free fetal DNA and RNA in both maternal and neonatal body fluids, including maternal plasma, serum, whole blood, amniotic fluid, and neonatal saliva. We describe methods to evaluate normal and abnormal fetal and neonatal development using gene expression microarrays. We also discuss the ways in which differentially-regulated gene lists can advance knowledge of both fetal and neonatal biology, as well as suggest novel possibilities for fetal and neonatal treatment. Lo et al. Noninvasive approaches to prenatal diagnosis of hemoglobinopathies using fetal DNA in maternal plasma Hematol Oncol Clin North Am. 2010. Early work had focused on the detection of paternally inherited fetal mutations in maternal plasma. Recent advances in single-molecule counting approaches have allowed the mutation dosage of the fetus to be analyzed in maternal plasma(prenatal diagnosis of several hemoglobinopathies, including β- thalassemia and hemoglobin E disease).

22 Nat Med. 2011 Apr;17(4):510-3. Epub 2011 Mar 6. Fetal-specific DNA methylation ratio permits noninvasive prenatal diagnosis of trisomy 21. Papageorgiou EAPapageorgiou EA, Karagrigoriou A, Tsaliki E, Velissariou V, Carter NP, Patsalis PC.Karagrigoriou ATsaliki EVelissariou VCarter NPPatsalis PC Source Cytogenetics and Genomics Department, The Cyprus Institute of Neurology and Genetics, Nicosia, Cyprus. Abstract The trials performed worldwide toward noninvasive prenatal diagnosis (NIPD) of Down's syndrome (or trisomy 21) have shown the commercial and medical potential of NIPD compared to the currently used invasive prenatal diagnostic procedures. Extensive investigation of methylation differences between the mother and the fetus has led to the identification of differentially methylated regions (DMRs). In this study, we present a strategy using the methylated DNA immunoprecipitation (MeDiP) methodology in combination with real-time quantitative PCR (qPCR) to achieve fetal chromosome dosage assessment, which can be performed noninvasively through the analysis of fetal-specific DMRs. We achieved noninvasive prenatal detection of trisomy 21 by determining the methylation ratio of normal and trisomy 21 cases for each tested fetal-specific DMR present in maternal peripheral blood, followed by further statistical analysis. The application of this fetal-specific methylation ratio approach provided correct diagnosis of 14 trisomy 21 and 26 normal cases.

23 Τέλος Ενότητας

24 Χρηματοδότηση Το παρόν εκπαιδευτικό υλικό έχει αναπτυχθεί στα πλαίσια του εκπαιδευτικού έργου του διδάσκοντα. Το έργο «Ανοικτά Ακαδημαϊκά Μαθήματα στο Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων» έχει χρηματοδοτήσει μόνο τη αναδιαμόρφωση του εκπαιδευτικού υλικού. Το έργο υλοποιείται στο πλαίσιο του Επιχειρησιακού Προγράμματος «Εκπαίδευση και Δια Βίου Μάθηση» και συγχρηματοδοτείται από την Ευρωπαϊκή Ένωση (Ευρωπαϊκό Κοινωνικό Ταμείο) και από εθνικούς πόρους.

25 Σημειώματα

26 Σημείωμα Ιστορικού Εκδόσεων Έργου Το παρόν έργο αποτελεί την έκδοση 1.0. Έχουν προηγηθεί οι κάτωθι εκδόσεις: Έκδοση 1.0 διαθέσιμη εδώ. http://ecourse.uoi.gr/course/view.php?id=1129. http://ecourse.uoi.gr/course/view.php?id=1129

27 Σημείωμα Αναφοράς Copyright Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων, Διδάσκουσα: Αν. Καθ. Μαρίκα Σύρρου. «Ιατρική Γενετική (BET). Προγεννητική διάγνωση». Έκδοση: 1.1. Ιωάννινα 2014. Διαθέσιμο από τη δικτυακή διεύθυνση: http://ecourse.uoi.gr/course/view.php?id=1129. http://ecourse.uoi.gr/course/view.php?id=1129

28 Σημείωμα Αδειοδότησης Το παρόν υλικό διατίθεται με τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Αναφορά Δημιουργού - Παρόμοια Διανομή, Διεθνής Έκδοση 4.0 [1] ή μεταγενέστερη. [1] https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/